Кальцеин - Calcein

Кальцеин
Calcein.svg
Имена
Другие имена
Флуорексон
Идентификаторы
3D модель (JSmol )
ЧЭБИ
ЧЭМБЛ
ChemSpider
ECHA InfoCard100.014.507 Отредактируйте это в Викиданных
Характеристики
C30ЧАС26N2О13
Молярная масса622,53 г / моль
Температура плавленияРазлагается
Точка кипенияНет данных
Слегка
Если не указано иное, данные для материалов приведены в их стандартное состояние (при 25 ° C [77 ° F], 100 кПа).
☒N проверить (что проверятьY☒N ?)
Ссылки на инфобоксы

Кальцеин, также известный как флуорексон, флуоресцеин сложный, это флуоресцентный краситель с возбуждение и выброс длины волн 495/515 нм соответственно и имеет вид оранжевых кристаллов. Кальцеин самостоятельногасит при концентрациях выше 70 мМ и обычно используется в качестве индикатора утечки липидных пузырьков.[1][2][3] Он также традиционно используется как комплексометрический индикатор за титрование из кальций ионы с EDTA, и для флуорометрический определение кальция.

Приложения

После того, как кальцеин-AM попадает в клетку, он превращается эстеразами в кальцеин (см. Ниже). Он способен образовывать комплексы с ионами кальция, что приводит к зеленой флуоресценции. Поскольку только живые клетки обладают достаточным количеством эстераз, только живые клетки после возбуждения светятся зеленым светом.

Нефлуоресцентное ацетометоксипроизводное кальцеина (кальцеин AM, AM = акетоксимэтил) используется в биологии, так как он может транспортироваться через клеточную мембрану в живые клетки, что делает его полезным для тестирования клеток. жизнеспособность и для кратковременной маркировки клеток. В качестве альтернативы, Фура-2 , Фураптра , Индо-1 и экуорин может быть использовано. Ацетометоксигруппа скрывает часть молекулы, которая хелатирует Ca2+, Mg2+, Zn2+ и другие ионы. После переноса в клетки внутриклеточные эстеразы удаляют ацетометоксигруппу, молекула попадает внутрь и излучает сильную зеленую флуоресценцию. Поскольку в мертвых клетках отсутствуют активные эстеразы, маркируются только живые клетки.[4] и подсчитано проточной цитометрии.

Человеческие неонатальные человеческие фибробласты кожи, окрашенные кальцеином-AM, отображаемые с помощью монохроматического микроскопа и псевдоцветные.

Кальцеин в настоящее время редко используется в качестве Ca2+ или Mg2+ индикатор, потому что его флуоресценция напрямую чувствительна к этим ионам только при сильно щелочном pH, и поэтому он не особенно полезен для измерения Ca2+ или Mg2+ в камерах. Флуоресценция кальцеина сильно гасится Co2+, Ni2+ и Cu2+ и заметно Fe3+ и Mn2+ при физиологическом pH. Этот отклик гашения флуоресценции можно использовать для обнаружения открытия митохондриальная проницаемость переходная пора (mPTP) и для измерения изменения объема клеток.[5] Кальцеин обычно используется для отслеживания клеток и в исследованиях эндоцитоза, миграции клеток и щелевых контактов.[6]

Ацетоксиметиловый эфир кальцеина также используется для обнаружения лекарственного взаимодействия с белки множественной лекарственной устойчивости (Транспортёры ABC АТФ-связывающие гены-переносчики кассет ) в интактных клетках, так как он является отличным субстратом транспортера 1 множественной лекарственной устойчивости (MDR1) Р-гликопротеин и Белок, связанный с множественной лекарственной устойчивостью (MRP1).[7] Анализ кальцеина AM можно использовать в качестве модели лекарственного взаимодействия, для скрининга субстратов-переносчиков и / или ингибиторов; а также для определения лекарственной устойчивости клеток in vitro, включая образцы от пациентов.[8]

Кальцеин также используется для маркировки только что вылупившихся рыб.[9] и для маркировки кости у живых животных.

Рекомендации

  1. ^ Allen, T.M .; Cleland, L.G. (1980). «Вызванная сывороткой утечка содержимого липосом». Biochimica et Biophysica Acta (BBA) - Биомембраны. 597 (2): 418–426. Дои:10.1016/0005-2736(80)90118-2. PMID  7370258.
  2. ^ Вирус Сендай вызвал утечку липосом, содержащих ганглиозиды Yung Shyeng Tsao и Leaf Huang Biochemistry 1985 24 (5), 1092-1098
  3. ^ Patel, H .; Чека, Ц .; Херклоц, Х. (2009). «Характеристика утечки пузырьков путем измерения времени жизни флуоресценции». Мягкая материя. 5 (15): 2849–2851. Bibcode:2009SMat .... 5.2849P. Дои:10.1039 / B908524F.
  4. ^ «Как работают световые микроскопы». Как это работает.
  5. ^ Hamann, J.F .; Kiilgard; Литман, Т .; Alvarez-Leefmans, J .; Цойтен, Т. (2002). «Измерение изменения объема клеток по самотушению флуоресценции». J. Флуоресценция. 12 (2): 139–145. Дои:10.1023 / а: 1016832027325.
  6. ^ «Люминесцентные индикаторы на цинк.2+ и другие ионы металлов - раздел 19.7 ". Молекулярные зонды: Справочник. invitrogen.
  7. ^ Главинас Х., Крайчи П., Черепес Дж., Саркади Б. (январь 2004 г.). «Роль переносчиков ABC в лекарственной устойчивости, метаболизме и токсичности». Curr Drug Deliv. 1 (1): 27–42. Дои:10.2174/1567201043480036. PMID  16305368. Архивировано из оригинал 19 июля 2012 г.
  8. ^ Karászi E, Jakab K, Homolya L, et al. (Февраль 2001 г.). «Кальцеиновый анализ множественной лекарственной устойчивости надежно предсказывает терапевтический ответ и выживаемость при остром миелоидном лейкозе». Br. J. Haematol. 112 (2): 308–14. Дои:10.1046 / j.1365-2141.2001.02554.x. PMID  11167823.
  9. ^ «Маркировка мальков кальцеином». Фонд охраны дичи и дикой природы. Архивировано из оригинал 25 сентября 2006 г.