Снятие кровли - Cell unroofing

Наиболее распространенные процессы отсоединения клеток. (слева) Сэндвич из двух ячеек между двумя покровными стеклами. (справа) Боковой поток среды позволяет разрушать клетки.

Снятие кровли любой из различных методов изолировать и обнажить клеточная мембрана из клетки. В отличие от более распространенной мембраны протоколы извлечения выполняется с несколькими этапами центрифугирования (цель которого - отделить мембранную фракцию от клеточный лизат ), в снятие кровли цель состоит в том, чтобы оторвать и сохранить участки плазматической мембраны для выполнения на месте эксперименты с использованием (микроскопии и биомедицинская спектроскопия ).

История

Первое наблюдение за двухслойной клеточной мембраной было сделано в 1959 году.[1] на срезе клетки с помощью электронного микроскопа, но первая микрофотография внутренней стороны клетки датируется 1977 годом.[2] М.В. Нермут. Профессор Джон Хьюзер внесли существенный вклад в эту область, визуализируя детальную внутреннюю структуру мембраны и цитоскелет связаны с ним с широким использованием электронного микроскопа.

Это было только после разработки атомно-силовой микроскоп работал в жидкости, чтобы можно было визуализировать клеточные мембраны в почти-физиологические условия[3] и проверить его механические свойства.[4]

Методы

Смотрите также

Рекомендации

  1. ^ Робертсон, Дж. Д. (1959). «Ультраструктура клеточных мембран и их производных». Biochem. Soc. Symp.
  2. ^ Nermut, M. V .; Уильямс, Линн Д. (1977). «Замораживание монослоев (капиллярных слоев) клеток, мембран и вирусов: некоторые технические соображения». Журнал микроскопии. 110 (2): 121–132. Дои:10.1111 / j.1365-2818.1977.tb00023.x. ISSN  1365-2818. PMID  335072.
  3. ^ Чо, Сан Джун; Ан, Чонхун; Юн, Дэхван; Минаката, Шихо; Ёсимура, Азуми; Усукура, Дзиро (01.10.2012). «Использование техники снятия крышек для атомно-силовой микроскопии внутриклеточного цитоскелета в водных условиях». Журнал электронной микроскопии. 61 (5): 321–326. Дои:10.1093 / jmicro / dfs055. ISSN  0022-0744. PMID  22872282.
  4. ^ а б Гальванетто, Никола (01.12.2018). «Одноклеточное снятие кровли: исследование топологии и наномеханики нативных мембран». Biochimica et Biophysica Acta (BBA) - Биомембраны. 1860 (12): 2532–2538. arXiv:1810.01643. Дои:10.1016 / j.bbamem.2018.09.019. ISSN  0005-2736. PMID  30273580.
  5. ^ Nermut, M. V .; Уильямс, Линн Д. (1977). «Замораживание монослоев (капиллярных слоев) клеток, мембран и вирусов: некоторые технические соображения». Журнал микроскопии. 110 (2): 121–132. Дои:10.1111 / j.1365-2818.1977.tb00023.x. ISSN  1365-2818. PMID  335072.
  6. ^ Хойзер, Джон (2000). «Производство« клеточной коры »для световой и электронной микроскопии». Трафик. 1 (7): 545–552. Дои:10.1034 / j.1600-0854.2000.010704.x. ISSN  1600-0854. PMID  11208142.
  7. ^ Усукура, Дзиро; Ито, Шуичи; Яги, Акира; Нарита, Акихиро; Усукура, Эйдзи (07.06.2016). «Незащищенный метод наблюдения цитоскелета непосредственно при молекулярном разрешении с использованием атомно-силовой микроскопии». Научные отчеты. 6: 27472. Дои:10.1038 / srep27472. ISSN  2045-2322. ЧВК  4895337. PMID  27273367.