Флюорохромазия - Fluorochromasia

Флюорохромазия (Греческое flōr χρῶμα - Произношение: flｕ̇r · ō · krə′mā · zhə), это клеточный феномен, характеризующийся немедленным появлением ярко-зеленой флуоресценции внутри жизнеспособных клеток при воздействии определенных проницаемых для мембран флуорогенный субстраты, такие как флуоресцеин диацетат, дибутират флуоресцеина и дипропионат флуоресцеина.[1]Это явление широко используется для измерения жизнеспособности клеток многих различных видов, включая животных, растения и микроорганизмы. Более того, флюорохромазия наблюдалась внутри органов, эмбрионов и данио. Флюорохромазия имеет множество применений, включая тестирование гистосовместимости, измерение цитотоксических антител, тестирование химиочувствительности опухолей in vitro и межклеточную транслокацию флуорохромов. Применяется с растениями,[2] бактерии[3] ооциты млекопитающих,[4] эмбрионы мыши,[5] и опухолевые клетки человека.[6]

История

В 1966 году Ротман и Папермастер случайно обнаружили флюорохромазию при изучении внутриклеточных ферментов с использованием флуорогенные субстраты. Они изучили его механизм действия и представили молекулярную модель, в которой внутриклеточное удержание флуоресцеина зависит от целостности клеточной мембраны. Неполярные молекулы сложных эфиров флуоресцеина, такие как диацетат флуоресцеина, легко проникают в клетку и гидролизуются неспецифическими эстеразами, продуцирующими флуоресцеин в качестве полярного соединения. В жизнеспособных клетках внутриклеточный флуоресцеин не может легко проходить через неповрежденную мембрану (т.е. он медленно просачивается), накапливаясь в цитоплазме клетки. Их модель проиллюстрирована на рисунке 1.

Принципиальная схема молекулярного механизма флюорохромазии

Рекомендации

  1. ^ Ротман, Борис и Бен У. Папермастер. «Мембранные свойства живых клеток млекопитающих при изучении ферментативного гидролиза флуорогенных сложных эфиров». Известия национальной академии наук 55.1 (1966): 134-141.
  2. ^ Уидхольм, Джек М. «Использование диацетата флуоресцеина и феносафранина для определения жизнеспособности культивируемых растительных клеток». Морилка 47.4 (1972): 189-194.
  3. ^ Chrzanowski, Thomas H., et al. «Применимость метода флуоресцеиндиацетата для обнаружения активных бактерий в пресной воде». Микробная экология 10.2 (1984): 179-185.
  4. ^ Дж. Боендер (1984) Флуоресцеин-диацетат, флуоресцентный краситель, окрашивающий соединение для быстрой оценки жизнеспособности ооцитов млекопитающих до исследований in vitro, Veterinary Quarterly, 6, 236-240
  5. ^ Линда Р. Мор и А. О. Траунсон. Использование диацетата флуоресцеина для оценки жизнеспособности эмбрионов у мышей. J Reprod Fertil 1, 1980 189–196.
  6. ^ Юджин А. Вольтеринг, Методика тестирования химиочувствительности опухолей, развивающаяся. Lab Medicine 21, 82-84, 1990.