Супер Оптимальный бульон - Super Optimal Broth

Супер Оптимальный бульон (SOB средний) это питательное вещество -богатый бактериальный среда роста используется для микробиологическая культура, как правило кишечная палочка. Он был разработан Дуглас Ханахан в 1983 году и является скорректированной версией широко используемой среды LB (бульон лизогении ). Рост Кишечная палочка в среде SOB или SOC приводит к более высоким трансформация эффективность плазмиды.[1][2]

Супер Оптимальный бульон с Катаболит репрессии (SOC) является SOB с добавленным глюкоза.[3]

Сочинение

(В скобках указаны массы, необходимые для создания 1 литра среды)

Сука

  • 2% мас. / Об. триптон (20 г)
  • 0,5% мас. / Об. Дрожжевой экстракт (5 г)
  • 8,56 мм NaCl (0,5 г) или 10 мМ NaCl (0,584 г)
  • 2,5 мм KCl (0,186 г)
  • ддЧАС2О до 1000 мл[4]
  • 10 мм MgCl2 (безводный: 0,952 г; гексагидрат: 2,033 г) И 10 мМ MgSO4 (безводный: 1,204 г; гептагидрат: 2,465 г)[2]

SOC

Помимо содержания SOB, SOC также содержит 20 мМ глюкозы (3,603 г).

В качестве альтернативы, SOB и SOC могут быть получены путем добавления небольших количеств концентрированных растворов хлорида магния и глюкозы к предварительно приготовленному SOB.


регулировка pH

Для максимальной эффективности СМИ SOB / SOC должны иметь pH доведен до 7,0 добавлением концентрированного едкий натр.[3] В оригинальной литературе указано, что pH конечной среды должен быть от 6,8 до 7,0.

Стерилизация

Наконец, среда SOB должна быть автоклавированный при 121 ° C для обеспечения бесплодие. Компоненты среды SOC не следует автоклавировать вместе, потому что высокая температура может вызвать реакцию глюкозы с триптическими пептидами (см. Реакция Майяра ), что снижает качество. Растворы SOB и добавок магния и глюкозы можно автоклавировать по отдельности и затем смешивать до конечных концентраций. Полный SOC может быть стерилизованный фильтром через фильтр 0,22 мкм.

Рекомендации

  1. ^ Ханахан, Д. (1983). «Исследования по трансформации Escherichia coli плазмидами». Журнал молекулярной биологии. 166 (4): 557–580. Дои:10.1016 / S0022-2836 (83) 80284-8. PMID  6345791.
  2. ^ а б SOC Средний
  3. ^ а б [1]
  4. ^ SOC средний