Вибратом - Vibratome - Wikipedia

Вибратом производства Leica Biosystems

А вибратом представляет собой инструмент, используемый для резки тонких срезов материала (хотя обычно более толстых срезов, чем те, которые нарезаются в образцах, залитых парафином, с использованием микротом ). Это похоже на микротом но использует вибрирующее лезвие, чтобы прорезать ткань. Вибрация амплитуда, скорость и угол лезвия можно контролировать. Фиксированные или свежие кусочки ткани залиты при низкой температуре гелеобразования агароза. Полученный блок агарозы, содержащий кусочек ткани, затем прикрепляют к металлическому блоку и разрезают, погружая в воду или буферную баню. Затем отдельные срезы собирают тонкой кистью и переносят на предметные стекла или многолуночные планшеты для окрашивания.[1]

Vibratome - это не общее название, а зарегистрированная торговая марка Leica Biosystems Richmond, Inc. в США.

Преимущества

  • Нет необходимости обезвоживать ткани перед заливкой, что снижает потерю клеточных компонентов
  • Без беспорядка парафин встраивание
  • Позволяет заделать ткань агарозой для обеспечения стабильности резки
  • Нет необходимости депарафинизировать и регидратировать срезы перед иммуноокрашиванием
  • Никаких высоких температур или жестких химических обработок, которые могут привести к нестабильности антигена.
  • Не требуются специальные лезвия микротома
  • Меньше шансов появления артефактов, вызванных заливкой парафином или замерзанием
  • Снижение аутофлуоресценции тканей благодаря предотвращению фиксации формалина и парафина
  • Меньше времени ожидания от взятия пробы ткани до времени иммунной метки
  • Позволяет напрямую создавать свободно плавающие секции для иммуногистохимии.

Недостатки

  • Вместо лент нарезаются и собираются отдельные секции, которые более деликатны и сложны в обращении.
  • Срезы обычно толще, чем те, что получены парафиновым методом; проникновение антител и других реагентов может быть медленнее, поэтому может потребоваться более длительное время инкубации. Кроме того, с помощью микроскопа может быть трудно получить изображение толстых срезов. (Однако толстые срезы совместимы, а иногда даже желательны при использовании конфокальной микроскопии.)
  • Закрепление секций вибратома на предметных стеклах может быть затруднено или невозможно из-за толщины секций.[2]

Рекомендации

  1. ^ «Улучшенные методы получения острых срезов головного мозга взрослых и стареющих животных» (PDF). Архивировано из оригинал 17 июля 2011 г.. Получено 1 июня, 2009.
  2. ^ http://www4.ncsu.edu/~rgfranks/FRANKS%20LAB%20PROTOCOLS/immuno%20histio%20chemistry/robertson%20vbratmimuno.doc[постоянная мертвая ссылка ]