Нитроцефин - Nitrocefin

Нитроцефин

Идентификаторы
Название ИЮПАК (2S,5р,6р) -6 - {[карбокси (фенил) ацетил] амино} - 3,3-диметил-7-оксо-4-тиа-1-азабицикло [3.2.0] гептан-2-карбоновая кислота
Количество CAS	41906-86-9 Y
PubChem CID	6436140
ChemSpider	4940809 Y
UNII	EWP54G0J8F
ЧЭМБЛ	ChEMBL480517
ECHA InfoCard	100.164.734
Химические и физические данные
Формула	C21ЧАС16N4О8S2
Молярная масса	516.50 г · моль^−1
(проверять)

Нитроцефин это хромогенный цефалоспорин субстрат, обычно используемый для обнаружения присутствия бета-лактамаза ферменты, продуцируемые различными микробами. Бета-лактамаза опосредованное сопротивление бета-лактам антибиотики, такие как пенициллин является широко распространенным механизмом сопротивления целому ряду бактерии включая членов семьи Энтеробактерии, основная группа кишечных Грамотрицательные бактерии. Другие методы для бета-лактамаза обнаружение существует в том числе ПЦР; однако нитроцефин позволяет быстро бета-лактамаза обнаружение с использованием небольшого количества материалов и недорогого оборудования.^[1][2]

Структура

Как цефалоспорин, нитроцефин содержит бета-лактам кольцо, которое восприимчиво к бета-лактамаза опосредованный гидролиз. После гидролиза разложившееся соединение нитроцефина быстро меняет цвет с желтого на красный. Хотя нитроцефин считается цефалоспорин, он не обладает противомикробными свойствами.^[3]

Деградация и хромогенные свойства

Нетронутый бета-лактам антибиотики действуют путем связывания с связывающие пенициллин белки (PBPs) участвуют в пептидогликан синтез. Бета-лактамазы гидролизовать амид связь между карбонил углерод и азот в бета-лактам кольцо чувствительных бета-лактамов и членов бета-лактам подклассы (включая определенные цефалоспорины). После гидролиза амидной связи антибиотик теряет способность связывать бактериальные PBP и становится бесполезным. Визуальное обнаружение этого процесса практически невозможно с большинством цефалоспорины потому что сдвиг ультрафиолетовый абсорбция из неповрежденного продукта по сравнению с гидролизованным происходит за пределами видимый спектр. Однако гидролиз нитроцефина вызывает сдвиг ультрафиолетовый поглощение в видимом спектре света от интактного (желтого) нитроцефина (~ 380 нм) до деградированного (красного) нитроцефина (~ 500 нм), что позволяет визуально обнаруживать бета-лактамаза активность на макроскопическом уровне.^[4]

Анализы обнаружения

Следующие ниже анализы описывают методы, в которых нитроцефин может использоваться для обнаружения бета-лактамаза ферменты с использованием недорогих материалов и оборудования.^[5] Рабочие растворы нитроцефина лежат в пределах от 0,5 мг / мл до 1,0 мг / мл.

Анализ поверхности скольжения

1. Добавьте одну каплю 0,5 мг / мл нитроцефина на поверхность чистого предметного стекла.
2. Выберите колония с поверхности агара стерильной петлей и перемешать с каплей.
3. Появление красного цвета через 20-30 мин. указывает бета-лактамаза Мероприятия.

Прямой контактный анализ

1. Нанесите одну каплю 0,5 мг / мл нитроцефина непосредственно на поверхность изолированного колония.
2. Появление красного цвета через 20-30 мин. указывает бета-лактамаза Мероприятия.

Анализ суспензии бульона

1. Добавьте 3-5 капель 0,5 мг / мл нитроцефина в 1 мл бульонной суспензии.
2. Появление красного цвета через 20-30 мин. указывает бета-лактамаза Мероприятия.

Анализ лизированных клеток

1. Обработайте 1 мл суспензии клеток ультразвуком.
2. Добавьте 3-5 капель 0,5 мг / мл нитроцефина к суспензии лизированных клеток.
3. Появление красного цвета через 20-30 мин. указывает бета-лактамаза Мероприятия.

Анализ фильтровальной бумаги

1. Поместите небольшой кусок фильтровальной бумаги (~ 3 x 3 см) в чистую чашку Петри или другую чистую изолированную поверхность и пропитайте (3-5 мл) нитроцефином 0,5 мг / мл.
2. Выберите изолированный колония и размазываем по поверхности пропитанной фильтровальной бумаги.
3. Появление красного цвета через 20-30 мин. указывает бета-лактамаза Мероприятия

^[6]

Смотрите также

• Устойчивость к антибиотикам
• Противомикробный
• Бета-лактам
• β-лактамный антибиотик
• Бета-лактамаза
• Цефалоспорин
• Пептидогликан

Рекомендации

1. О'Каллаган, Синтия Х. и др. «Новый метод обнаружения B-лактамаз с использованием хромогенного цефалоспоринового субстрата». Противомикробные агенты и химиотерапия 1.4 (1972): 283-88. Ncbi.gov. Интернет. 10 октября 2012 г.
2. Кудрон, П. Э., Э. С. Моланд и К. С. Сандерс. «Возникновение и обнаружение бета-лактамаз расширенного спектра у членов семейства Enterobacteriaceae в медицинском центре для ветеранов: ищите, и вы можете найти». Журнал клинической микробиологии 35.10 (1997): 2593-597. Jcm.asm.org. Интернет. 9 января 2013 г.
3. О'Каллаган, Синтия Х. и др. «Новый метод обнаружения B-лактамаз с использованием хромогенного цефалоспоринового субстрата». Противомикробные агенты и химиотерапия 1.4 (1972): 283-88. Ncbi.gov. Интернет. 10 октября 2012 г. 35.10 (1997): 2593-597. Jcm.asm.org. Интернет. 9 января 2013 г.
4. О'Каллаган, Синтия Х. и др. «Новый метод обнаружения B-лактамаз с использованием хромогенного цефалоспоринового субстрата». Противомикробные агенты и химиотерапия 1.4 (1972): 283-88. Ncbi.gov. Интернет. 10 октября 2012 г.
5. Парр, Т. Р., младший "Простой метод скрининга бета-лактамаз-положительных и -отрицательных ампициллин-резистентных изолятов Haemophilus Influenzae". Журнал клинической микробиологии 20.1 (1984): 131-32. Ncbi.gov. Интернет. 10 октября 2012 г.
6. http://www.toku-e.com/Assets/Protocols/Nitrocefin_Protocol.pdf