ПОЗВОНОЧНИК (молекулярная биология) - SPINE (molecular biology) - Wikipedia

ПОЗВОНОЧНИК означает эксперимент по взаимодействию стрептококка с белком. SPINE - мощный инструмент для обнаружения белок-белковые взаимодействия in vivo. Белок приманки должен быть экспрессирован Стреп-тег в условиях, когда в клетках предположительно присутствуют потенциальные партнеры по взаимодействию. Добавление формальдегид связывает белок приманки с его потенциальными партнерами по взаимодействию. Затем белок-приманка вместе с его потенциальными партнерами по взаимодействию можно выделить с помощью колонки со стрептактин-сефарозой. Поперечные связи между белком-приманкой и потенциальным партнером по взаимодействию могут быть расщеплены путем нагревания образцов в буфере Лэммли. Наконец, совместно очищенный партнер взаимодействия может быть отделен с помощью SDS PAGE и идентифицирован с помощью масс-спектрометрии.

Рекомендации

• Герцберг К., Вейдингер Л.А., Дёррбекер Б., Хюбнер С., Штюльке Дж. И Коммихау FM (2007). ПОЗВОНОЧНИК: метод быстрого обнаружения и анализа белок-белковых взаимодействий in vivo.. Протеомика 7 (22): 4032-4035
• Мюллер VS, Jungblut PR, Meyer TF, Hunke S (2011). Мембрана-ПОЗВОНОЧНИК: улучшенный метод идентификации партнеров белок-белкового взаимодействия мембранных белков in vivo. Протеомика 11 (10): 2124-2128.
• Мюллер В.С., Чаунер К., Хунке С. (2013). Мембрана-ПОЗВОНОЧНИК: биохимический инструмент для определения межбелковых взаимодействий мембранных белков in vivo.. J Vis Exp 7 (81): e50810