Предметное стекло микроскопа - Microscope slide

«Стеклянная горка» перенаправляется сюда. Термин может также относиться к фотографические слайды.
Набор стандартных предметных стекол размером 75 на 25 мм. Белая область может быть написана для обозначения слайда.
Предметное стекло микроскопа (вверху) и покровное стекло (внизу)

А предметное стекло микроскопа тонкий плоский кусок стекло, обычно 75 на 26 мм (3 на 1 дюйм) и толщиной около 1 мм, используются для хранения предметов для исследования под микроскоп. Обычно объект установленный (закреплены) на предметном стекле, а затем оба вместе помещаются в микроскоп для просмотра. Такое расположение позволяет быстро вставлять и извлекать из микроскопа несколько установленных на предметных стеклах объектов, маркировать, транспортировать и хранить в соответствующих футлярах для предметных стекол или папках и т. Д.

Предметные стекла микроскопа часто используются вместе с покровным стеклом или покровным стеклом, меньшим и более тонким листом стекла, который помещают поверх образца. Предметные стекла удерживаются на предметном столике микроскопа с помощью зажимов для предметных стекол, зажимов для предметных стекол или перекрестного стола, который используется для достижения точного дистанционного перемещения предметного стекла на предметном столике микроскопа (например, в автоматизированной / управляемой компьютером системе или при касании слайд пальцами не подходит из-за риска загрязнения или неточности)

История

Предметное стекло микроскопа, приготовленное в 1855 г., содержащее контрольные образцы из внутренней слизистая оболочка из тонкий кишечник из холера потерпевший.

Происхождение концепции было частями слоновая кость или кость, содержащий образцы, помещенные между дисками прозрачного слюда, Это было горка в разрыв между сценой и целью.[1] Эти «слайдеры» были популярны в Викторианский Англия до Королевское микроскопическое общество представила стандартизированное предметное стекло для микроскопа.[2]

Размеры и типы

Общие размеры предметных стекол микроскопа (в мм).

Стандартное предметное стекло микроскопа имеет размеры около 75 мм на 25 мм (3 дюйма на 1 дюйм) и имеет толщину около 1 мм. Доступен ряд других размеров для различных специальных целей, например, 75 x 50 мм для геологический использовать, 46 x 27 мм для петрографический этюды и 48 х 28 мм для шлифы. Горки обычно изготавливаются из обычного стекла, и их края часто имеют тонкоизмельченный или полированный.

Предметные стекла микроскопа обычно бывают оптического качества. стекло, такие как натриевое стекло или боросиликатное стекло, но также используются специальные пластмассы. Плавленый кварц слайды часто используются, когда ультрафиолетовый прозрачность важна, например в флуоресцентная микроскопия.[3][4]

Хотя обычные слайды являются наиболее распространенными, существует несколько специализированных типов. А ползун с вогнутостью или полость слайд имеет одно или несколько неглубоких углублений («колодцев»), предназначенных для удерживания более толстых предметов, а также некоторых образцов, таких как жидкости и тканевые культуры.[5] Слайды могут иметь закругленные углы для повышения безопасности или прочности, или срезанный угол для использования с зажимом скольжения или поперечным столом, где слайд фиксируется подпружиненным изогнутым рычагом, контактирующим с одним углом, заставляя противоположный угол скользите по рычагу, наклоненному под прямым углом, который не двигается. Если бы эта система использовалась с суппортом, который не имел этих срезанных углов, углы были бы сколами, и суппорт мог расколоться.[5]

А сетка отмечен сетка линий (например, сетка 1 мм), которая позволяет легко оценить размер объектов, видимых при увеличении, и обеспечивает контрольные области для подсчета мелких объектов. Иногда один квадрат сетки сам подразделяется на более мелкую сетку. Слайды для специализированных приложений, таких как гемоцитометры для подсчета клеток, может иметь различные резервуары, каналы и барьеры травленый или земля на их верхней поверхности.[6] Могут быть нанесены различные перманентные маркировки или маски. напечатанный, пескоструйный, или наносится на поверхность производителем, обычно с помощью инертных материалов, таких как PTFE.[7]

А Слайд Neubauer для подсчета клеток.
Изображение сетки Нойбауэровского предметного стекла, полученное с помощью микроскопа для подсчета клетки.
Предметное стекло Нойбауэра, удерживаемое на штативе микроскопа зажимом для предметного стекла на поперечном столе.

На некоторых слайдах есть матовый или покрытый эмалью область на одном конце, для маркировки карандашом или ручкой.[5] Слайды могут иметь специальные покрытия, нанесенные производителем, например на химическую инертность или повышенную клеточная адгезия. Покрытие может иметь постоянный электрический заряд для хранения тонких или порошкообразных образцов. Общие покрытия включают поли-L-лизин, силаны, эпоксидные смолы,[5][7] или даже золото.[8]

Монтаж

Мазки крови на патологическое исследование, пример мокрого образца.
Предметные стекла микроскопа с подготовленными, окрашенными и маркированными образцами тканей в стандартной папке с 20 предметными стеклами.

Размещение образцов на предметных стеклах микроскопа часто имеет решающее значение для успешного просмотра. Этой проблеме уделялось много внимания в последние два столетия, и это хорошо развитая область с множеством специализированных, а иногда и довольно сложных техник. Образцы часто удерживаются на месте с помощью стекла меньшего размера. покровные стекла.

Основная функция покровного стекла заключается в том, чтобы твердые образцы прижимались плоско, а жидкие образцы формировались в плоский слой одинаковой толщины. Это необходимо, потому что высокое разрешение микроскопы имеют очень узкую область, край в котором они сосредоточены.

Покровное стекло часто выполняет еще несколько функций. Он удерживает образец на месте (либо за счет веса покровного стекла, либо, в случае влажного крепления, за счет поверхностное натяжение ) и защищает образец от пыли и случайного контакта. Он защищает микроскоп объектив от контакта с образцом и наоборот; в иммерсионная микроскопия или иммерсионная микроскопия покровное стекло предотвращает контакт между иммерсионной жидкостью и образцом. Покровное стекло можно приклеить к предметному стеклу, чтобы изолировать образец, замедляя обезвоживание и окисление образца, а также предотвращение загрязнения. Используется ряд герметиков, в том числе коммерческие герметики, лабораторные препараты или даже обычные герметики. лак для ногтей, в зависимости от образца. Не содержащий растворителей герметик, который можно использовать для образцов живых клеток, - это «валап», смесь вазелин, ланолин и парафин в равных частях.[9]Микробный и клеточные культуры можно выращивать непосредственно на покровном стекле перед тем, как поместить на предметное стекло, а образцы можно постоянно закреплять на стекле, а не на предметном стекле.[9]

Покровные стекла доступны в различных размерах и толщинах.[10] Использование неправильной толщины может привести к сферическая аберрация и снижение разрешения и интенсивности изображения. Специальные объективы могут использоваться для получения изображений образцов без покровных стекол или могут иметь корректирующие кольца, которые позволяют пользователю приспособиться к альтернативной толщине покровного стекла.[11][12]

Сухое крепление

В сухое крепление, самый простой вид крепления, объект просто помещается на слайд. Сверху может быть помещено покровное стекло, чтобы защитить образец и объектив микроскопа, а также чтобы образец оставался неподвижным и прижатым. Эта установка может быть успешно использована для просмотра таких образцов, как пыльца, перья, волосы и т. Д. Она также используется для исследования частиц, попавших в прозрачную пленку. мембранные фильтры (например, при анализе бортовых пыль ).

Мокрое или временное крепление

В мокрое крепление, образец помещается в каплю воды или другой жидкости, удерживаемой между предметным стеклом и покровным стеклом поверхностное натяжение. Этот метод обычно используется, например, для просмотра микроскопические организмы которые растут в воде пруда или других жидких средах, особенно при изучении их движения и поведения. Необходимо соблюдать осторожность, чтобы исключить пузырьки воздуха, которые будут мешать обзору и затруднять движения организмов. Примером временного влажного крепления является лактофуксин, который обеспечивает как монтаж образца, так и фуксин окрашивание.

Подготовленное крепление или постоянное крепление

Для патологический и биологический исследования образец обычно проходит сложный гистологический подготовка, которая включает фиксация это для предотвращения разложения, удаление воды содержащегося в нем, заменив воду на парафин, разрезая его на очень тонкие секции с помощью микротом, помещая срезы на предметное стекло микроскопа, окрашивание ткань использует различные пятна, чтобы выявить определенные компоненты ткани, очищая ткань, чтобы сделать ее прозрачной, и покрывая ее покровным стеклом и монтажной средой.

Посыпанное крепление

Посыпанный монтаж описывает производство палинологический предметные стекла микроскопа, подвешивая концентрированный образец в дистиллированная вода, поместив образцы на предметное стекло и дав воде стечь. испариться.[13]

Монтажный носитель

В монтажная среда раствор, в который образец погружен, как правило, под покровным стеклом. Простые жидкости, такие как вода или глицерин можно рассматривать как монтажную среду, хотя этот термин обычно относится к соединениям, которые затвердевают в постоянное крепление. Популярные монтажные средства включают: Permount [14], и Монтажная среда Хойера и альтернатива глицериновое желе [15] Свойства хорошей монтажной среды включают: показатель преломления близка к стеклу (1,518), нереагирует на образец, стабильность во времени без кристаллизации, потемнения или изменения показателя преломления, растворимость в среде, в которой был приготовлен образец (либо водный или неполярный, такие как ксилол или толуол ), не вызывая выцветания или выщелачивания пятна на образце.[16]

Примеры монтажных средств

Водный

Широко используется в иммунофлуоресцентной цитохимии, где невозможно заархивировать флуоресценцию. Временное хранение должно производиться в темном влажном помещении. Типичные примеры:

  1. Глицерин-PBS (9: 1) с антипоглощением, например любой из следующих[17]
    1. п-фенилендиамин
    2. пропилгаллат
    3. 1,4-Диазабицикло (2,2,2) -октан (DABCO) (очень популярен)
    4. Аскорбиновая кислота
    5. Мовиол или Гельватол
  2. Желатин
  3. Mount
  4. Vectashield
  5. Продлить золото
  6. CyGEL / CyGEL Sustain (для иммобилизации живых, незафиксированных клеток и организмов)
Безводный
Слайд 60-летнего голотип экземпляр плоского червя (Lethacotyle fijiensis ) постоянно установлен в Канадский бальзам

Используется, когда требуется постоянное крепление

  1. Permount (толуол и полимер a-пинена, b-пинена, дипентена, b-фелландрена)
  2. Канадский бальзам
  3. DPX (Distrene 80 - реклама полистирол, а ппоследний например дибутилфталат и ксилол )
  4. DPX новый (с ксилол но без канцерогенов дибутилфталат )
  5. Энтеллан (с толуолом)
  6. Энтеллан новый
  7. Hempstead Halide Hoyer's Medium (запатентованная формулировка традиционной среды Хойера, содержащая 60% Хлорал, но без известных канцерогенов)
  8. Neo-Mount (совместим с алифатическим нео-прозрачным покрытием, но не совместим с ароматическими растворителями, такими как ксилол)

В отличие от других видов / значений слова "монтаж"

В отличие от монтажа, необходимого для стеклянных покровных стекол, подобный монтаж может быть выполнен для хранения более объемных образцов в стеклянных контейнерах в музеях. Однако для Базовые приготовления, которые могут относиться к биологическим или небиологическим материалам и далее подразделяются на процессы монтажа «горячего» (компрессионного) и «холодного» (литьевого) типа.[18][19] Хотя это называется «монтаж», в гистологии он больше похож на встраивание, и его не следует путать с описанным выше монтажом. Термин «монтаж» в других областях имеет множество других значений.

Смотрите также

использованная литература

  1. ^ Адам, Джордж. Очерки под микроскопом. 1798
  2. ^ Коннетт, Джесс (4 октября 2017 г.). «Искусство невидимого». Бристоль24-7. Получено 29 марта 2018.
  3. ^ Кварцевые предметные стекла для микроскопов и покровные стекла с коммерческого сайта (Тед Пелла). Проверено 23 января 2010 г.
  4. ^ Предметные и покровные стекла для кварцевых микроскопов В архиве 2015-08-10 на Wayback Machine Страница каталога с коммерческого сайта (SPI Supplies). Проверено 23 января 2010 г.
  5. ^ а б c d Гистология и световая микроскопия Страница каталога с коммерческого сайта (EMS). Проверено 23 января 2010 г.
  6. ^ "Коллекция микроскопии Ленца" (PDF). Получено 29 марта 2018.[постоянная мертвая ссылка ]
  7. ^ а б Предметные стекла микроскопа Страница каталога с коммерческого сайта (ТЕКДОН). Проверено 23 января 2010 г.
  8. ^ Покрытые золотом предметные стекла для микроскопов и комплект для визуализации ДНК Страница каталога с коммерческого сайта (Asylum Research). Проверено 31 августа 2011 г.
  9. ^ а б Микроскопия - Протоколы В архиве 2013-04-03 в Archive.today обучающая веб-страница Онкологического центра Мура при Калифорнийском университете в Сан-Диего. Проверено 07 февраля 2013 г.
  10. ^ Технические характеристики GE с коммерческого сайта (Тед Пелла). Проверено 23 января 2010 г.
  11. ^ "Корректирующие ошейники покровного стекла". Ресурсный центр по микроскопии. Олимп. Получено 4 июн 2017.
  12. ^ Майкл В. Дэвидсон (2010), Оптические аберрации, глава в Молекулярные выражения веб-сайт в Университете штата Флорида. Последнее изменение 15 июня 2006 г., 14:39, просмотрено 12 января 2010 г.
  13. ^ Зиппи, Пьер А. (1991). «Техника монтажа и размещения образца с помощью SEM и светового микроскопа для изучения палинологических креплений на одном образце». Микропалеонтология. 37 (4): 407–13. Дои:10.2307/1485913. JSTOR  1485913.
  14. ^ «Паспорт безопасности материала, постоянная монтажная среда» (PDF). Получено 29 марта 2018.
  15. ^ "Глицериновое желе как заменитель раствора Хойера". www.mobot.org. Получено 29 марта 2018.
  16. ^ Медицинская лабораторная наука: теория и практика Автор: Очей и Колкаткер, стр. 446.
  17. ^ Крепление флуоресцентных образцов, среда для закрепления и агенты против тушения - UCLA Brain Research Institute
  18. ^ Среда для холодного и горячего монтажа, пресс-формы и камера давления - электронная микроскопия
  19. ^ Allied High Tech - Союзные высокотехнологичные продукты | Металлографическое монтажное оборудование