Псевдотипирование - Pseudotyping

Псевдотипирование это процесс производства вирусы или же вирусные векторы в сочетании с зарубежными белки вирусной оболочки. В результате получается псевдотипированная вирусная частица, также называемая псевдовирусом.[1] С помощью этого метода белки оболочки чужеродного вируса могут быть использованы для изменения тропизм хозяина или увеличить или уменьшить стабильность вирусных частиц. Псевдотипированные частицы не несут генетический материал для производства дополнительных белков оболочки вируса, поэтому фенотипический изменения не могут быть переданы потомству вирусных частиц. В некоторых случаях невозможность продуцировать белки оболочки вируса приводит к тому, что псевдовирус некомпетентная репликация. Таким образом, свойства опасные вирусы могут быть изучены в условиях более низкого риска.[2]

Псевдотипирование позволяет контролировать экспрессию белков оболочки. Часто используемый белок - это гликопротеин G (VSV-G) из Вирус везикулярного стоматита (VSV), который обеспечивает вход через Рецептор ЛПНП. Белки оболочки, включенные в псевдовирус, позволяют вирусу легко войти разные типы клеток с соответствующим хостом рецептор.

Разработка вакцины

Псевдотипический вирус можно использовать для вакцинации животных против белков, экспрессируемых на оболочке вириона.[3] Этот подход был использован для получения вакцин-кандидатов против ВИЧ,[3] Нипах генипавирус,[2] Лиссавирус бешенства,[4] SARS-CoV,[5] и Заир эболавирус.[6] Рекомбинантный вирус везикулярного стоматита - вирус Заирской лихорадки Эбола (rVSV-ZEBOV) был создан Агентство общественного здравоохранения Канады (PHAC) и в настоящее время имеет лицензию в Европейском Союзе и США для предотвращения Эболавирусная болезнь (EVD) вызвано Заир эболавирус.

Серологическое тестирование

Псевдотипные вирусы, особенно псевдотипные вирусы, несущие рекомбинантный люцифераза ген (rLuc), можно использовать для проверки того, может ли лечение защитить от инфекции клеток-хозяев.[7] Например, кровь, взятая у животного с серологический иммунитет к вирусу. Отдельная частица псевдотипа генерируется с белком оболочки, к которому у животного есть иммунитет. Когда кровь, взятая у животного, смешивается с псевдотипной частицей, защитные антитела связать и нейтрализовать введенный белок оболочки. В культура клеток, нейтрализованные псевдотипные вирусы будут предотвращено заражение клеток и получение продукта люминесцентного репортерного гена. При анализе образцы культур клеток, в которых присутствует эффективный ингибитор вируса, будут иметь пониженную люминесценцию.[4]

Рекомендации

  1. ^ Пример разработки ретровирусных векторов псевдотипа в рабочей группе MHH В архиве 2009-11-08 на Wayback Machine
  2. ^ а б Не, Цзяньхуэй; Лю, Линь; Ван, Цин; Чен, Жуйфэн; Нин, Тингтин; Лю, Цян; Хуан, Вэйцзинь; Ван Ючунь (19.02.2019). «Псевдовирусная система Nipah позволяет проводить оценку вакцин in vitro и in vivo с использованием средств, отличных от BSL-4». Новые микробы и инфекции. 8 (1): 272–281. Дои:10.1080/22221751.2019.1571871. ISSN  2222-1751. ЧВК  6455126. PMID  30866781.
  3. ^ а б Расин, Трина; Кобингер, Гэри П .; Искусство, Эрик Дж. (2017-09-12). «Разработка вакцины против ВИЧ с использованием вектора вируса везикулярного стоматита, экспрессирующего дизайнерские гликопротеины оболочки ВИЧ-1 для усиления гуморальных реакций». Исследования и терапия СПИДа. 14 (1): 55. Дои:10.1186 / s12981-017-0179-2. ISSN  1742-6405. ЧВК  5594459. PMID  28893277.
  4. ^ а б Мешлер, Сара; Лочер, Самира; Конзельманн, Карл-Клаус; Кремер, Беате; Циммер, Герт (2016-09-16). «Количественная оценка нейтрализующих лиссавирус антител с использованием частиц псевдотипа вируса везикулярного стоматита». Вирусы. 8 (9): 254. Дои:10.3390 / v8090254. ISSN  1999-4915. ЧВК  5035968. PMID  27649230.
  5. ^ Kapadia, Sagar U .; Саймон, Ян Д.; Роуз, Джон К. (20.06.2008). «Вакцина против SARS на основе рекомбинантного вируса везикулярного стоматита с дефектом репликации более эффективна, чем вакцина на основе компетентного к репликации вектора». Вирусология. 376 (1): 165–172. Дои:10.1016 / j.virol.2008.03.002. ISSN  0042-6822. ЧВК  7103385. PMID  18396306.
  6. ^ Салата, Криштиану; Калистри, Арианна; Альвиси, Гуальтьеро; Селестино, Микеле; Паролин, Кристина; Палу, Джорджио (2019-03-19). «Вхождение вируса Эбола: от молекулярной характеристики до открытия лекарств». Вирусы. 11 (3): 274. Дои:10.3390 / v11030274. ISSN  1999-4915. ЧВК  6466262. PMID  30893774.
  7. ^ Карнелл, Джордж Уильям; Феррара, Франческа; Грехан, Кейт; Томпсон, Крейг Питер; Темпертон, Найджел Джеймс (2015-04-29). «Анализы нейтрализации гриппа на основе псевдотипов: систематический анализ». Границы иммунологии. 6: 161. Дои:10.3389 / fimmu.2015.00161. ISSN  1664-3224. ЧВК  4413832. PMID  25972865.