Антитела - Antibody

Эта статья о классе белков. Для использования в других целях см. Антитело (значения).

Каждое антитело связывается с определенным антиген; взаимодействие, подобное замку и ключу.

An антитело (Ab), также известный как иммуноглобулин (Ig),[1] большой, Y-образный белок производится в основном плазматические клетки что используется иммунная система нейтрализовать патогены Такие как патогенные бактерии и вирусы. Антитело распознает уникальную молекулу патогена, называемую антиген, через фрагмент антигенсвязывающий (Fab) вариабельная область.[2][3] Каждый кончик буквы «Y» антитела содержит паратоп (аналогично замку), специфичному для одного конкретного эпитоп (аналогично ключу) на антигене, позволяя этим двум структурам точно связываться друг с другом. Используя этот механизм связывания, антитело может тег а микроб или инфицированная клетка для атаки других частей иммунной системы, или может нейтрализовать свою мишень напрямую (например, путем ингибирования части микроба, которая необходима для его вторжения и выживания). В зависимости от антигена связывание может препятствовать биологическому процессу, вызывающему заболевание, или может активировать макрофаги уничтожить постороннее вещество. Способность антитела связываться с другими компонентами иммунной системы опосредуется его Fc регион (расположен у основания буквы "Y"), который содержит сохраненный гликозилирование сайт, участвующий в этих взаимодействиях.[4] Производство антител - основная функция гуморальная иммунная система.[5]

Антитела секретируются В-клетки адаптивной иммунной системы, в основном дифференцированными В-клетками, называемыми плазматические клетки. Антитела могут существовать в двух физических формах: растворимая форма, которая секретируется из клетки, чтобы быть свободным в плазма крови, а мембрана -связанная форма, которая прикрепляется к поверхности В-клетки и называется B-клеточный рецептор (BCR). BCR обнаруживается только на поверхности B-клеток и облегчает активацию этих клеток и их последующую дифференцировку в любую из фабрик антител, называемую плазматические клетки или же В-клетки памяти которые выживут в организме и запомнят тот же антиген, чтобы В-клетки могли быстрее реагировать на воздействие в будущем.[6] В большинстве случаев взаимодействие В-клетки с Т-хелперная клетка необходимо для полной активации В-клеток и, следовательно, образования антител после связывания антигена.[7] Растворимые антитела попадают в кровь и тканевые жидкости, а также многие выделения продолжить исследования на предмет проникновения микроорганизмов.

Антитела гликопротеины принадлежащий к суперсемейство иммуноглобулинов.[4] Они составляют большую часть гамма-глобулин доля белки крови. Как правило, они состоят из основных структурных единиц - каждая с двумя большими тяжелые цепи и два маленьких легкие цепи. Существует несколько различных типов тяжелых цепей антител, которые определяют пять различных типов кристаллизующихся фрагментов (Fc), которые могут быть присоединены к антигенсвязывающим фрагментам (Fab). Пять различных типов Fc-областей позволяют сгруппировать антитела в пять изотипы. Каждая область Fc определенного изотипа антитела способна связываться со своим специфическим Fc рецептор (FcR), за исключением IgD, который по сути является BCR, что позволяет комплекс антиген-антитело выполнять различные роли в зависимости от того, с каким FcR он связывается. Способность антитела связываться с соответствующим ему FcR дополнительно модулируется структурой гликана (ов), присутствующего в консервативных сайтах в его Fc-области.[4] Способность антител связываться с FcR помогает направлять соответствующий иммунный ответ на каждый инородный объект, с которым они сталкиваются.[8] Например, IgE несет ответственность за аллергический ответ, состоящий из тучная клетка дегрануляция и гистамин релиз. Fab-паратоп IgE связывается, например, с аллергическим антигеном. клещ домашней пыли частиц, а его Fc-область связывается с Fc-рецептором ε. Взаимодействие аллерген-IgE-FcRε опосредует передачу аллергического сигнала, вызывая такие состояния, как астма.[9]

Хотя общая структура всех антител очень похожа, небольшая область на кончике белка чрезвычайно вариабельна, что позволяет существовать миллионам антител с немного разными структурами кончика или антигенсвязывающими сайтами. Этот регион известен как гипервариабельная область. Каждый из этих вариантов может связываться с разными антигенами.[2] Это огромное разнообразие паратопов антител на антигенсвязывающих фрагментах позволяет иммунной системе распознавать столь же широкий спектр антигенов.[1] Большая и разнообразная популяция паратопа антител генерируется случайными рекомбинационными событиями набора ген сегменты, кодирующие разные антигенсвязывающие сайты (или паратопы), за которым следует случайный мутации в этой области гена антитела, что создает дополнительное разнообразие.[8][10] Этот рекомбинационный процесс, который приводит к разнообразию паратопов клональных антител, называется V (D) J или VJ рекомбинация. Паратоп антитела является полигенным и состоит из трех генов: V, D и J. Каждый паратоп локус также является полиморфным, так что во время продукции антител выбирается один аллель V, один из D и один из J. Затем эти генные сегменты соединяются вместе с использованием случайной генетической рекомбинации для получения паратопа. Области, в которых гены рекомбинируются случайным образом, представляют собой гипервариабельные области, используемые для распознавания различных антигенов на клональной основе.

Гены антител также реорганизуются в процессе, называемом переключение классов который изменяет один тип Fc-фрагмента тяжелой цепи на другой, создавая другой изотип антитела, который сохраняет антиген-специфичную вариабельную область. Это позволяет использовать одно антитело различными типами рецепторов Fc, экспрессируемыми в разных частях иммунной системы.

История

Смотрите также: История иммунологии

Впервые термин «антитело» употребил в тексте Пол Эрлих. Период, термин Antikörper (немецкое слово для антитело) появляется в заключении его статьи «Экспериментальные исследования иммунитета», опубликованной в октябре 1891 г., в которой говорится, что «если два вещества дают начало двум различным Antikörper, значит, они сами должны быть разными ».[11] Однако этот термин не был принят сразу, и было предложено несколько других терминов для обозначения антител; они включали Immunkörper, Амбоцептор, Zwischenkörper, сенсибилизирующее вещество, связка, Десмон, филоцитаза, фиксатор, и Иммунизин.[11] Слово антитело имеет формальную аналогию со словом антитоксин и аналогичная концепция Immunkörper (иммунное тело по-английски).[11] Таким образом, первоначальная конструкция слова содержит логический недостаток; антитоксин - это нечто, направленное против токсина, а антитело - это тело, направленное против чего-то.[11]

Ангел запада (2008) автор Джулиан Восс-Андреэ скульптура, основанная на структуре антитела, опубликованная Э. Падланом.[12] Создан для кампуса Флориды Научно-исследовательский институт Скриппса,[13] антитело помещается в кольцо со ссылкой Леонардо да Винчи Витрувианский человек тем самым подчеркивая сходство антитела и человеческого тела.[14]

Изучение антител началось в 1890 году, когда Эмиль фон Беринг и Китасато Шибасабуро описали активность антител против дифтерия и столбнячные токсины. Фон Беринг и Китасато выдвинули теорию гуморальный иммунитет, предполагая, что медиатор в сыворотке может реагировать с чужеродным антигеном.[15][16] Его идея подтолкнула Пауля Эрлиха к предложению теория боковой цепи для взаимодействия антител и антигенов в 1897 году, когда он предположил, что рецепторы (описанные как «боковые цепи») на поверхности клеток могут специфически связываться с токсины - во взаимодействии «замок и ключ» - и что эта реакция связывания является спусковым механизмом для производства антител.[17] Другие исследователи считали, что антитела свободно существуют в крови, и в 1904 г. Альмрот Райт предположил, что растворимые антитела, покрытые бактерии пометить их для фагоцитоз и убийство; процесс, который он назвал опсонинизация.[18]

Майкл Хайдельбергер

В 1920-е гг. Майкл Хайдельбергер и Освальд Эйвери наблюдали, что антигены могут осаждаться антителами, и продолжили показывать, что антитела состоят из белка.[19] Биохимические свойства взаимодействий связывания антиген-антитело были изучены более подробно в конце 1930-х гг. Джон Маррак.[20] Следующее крупное достижение было в 1940-х годах, когда Линус Полинг подтвердили теорию замка и ключа, предложенную Эрлихом, показав, что взаимодействия между антителами и антигенами зависят больше от их формы, чем от их химического состава.[21] В 1948 г. Астрид Фагрей обнаружил, что В-клетки, в виде плазматические клетки, были ответственны за образование антител.[22]

Дальнейшая работа была сосредоточена на характеристике структур белков антител. Большим достижением в этих структурных исследованиях стало открытие в начале 1960-х гг. Джеральд Эдельман и Джозеф Галли антитела легкая цепь,[23] и их осознание того, что этот белок такой же, как и Протеин Бенс-Джонса описан в 1845 г. Генри Бенс Джонс.[24] Эдельман обнаружил, что антитела состоят из дисульфидная связь -связанные тяжелые и легкие цепи. Примерно в то же время области связывания антитела (Fab) и хвоста антитела (Fc) IgG характеризовались Родни Портер.[25] Вместе эти ученые определили структуру и завершили аминокислота последовательность IgG, подвиг, за который они были совместно награждены премией 1972 г. Нобелевская премия по физиологии и медицине.[25] Фрагмент Fv был получен и охарактеризован Дэвидом Гиволом.[26] В то время как большинство этих ранних исследований было сосредоточено на IgM и IgG, другие изотипы иммуноглобулинов были идентифицированы в 1960-х: Томас Томази открыл секреторные антитела (IgA );[27] Дэвид С. Роу и Джон Л. Фейи открыли IgD;[28] и Кимишиге Ишизака и Теруко Ишизака обнаруженный IgE и показал, что это класс антител, участвующих в аллергических реакциях.[29] В знаменательной серии экспериментов, начавшейся в 1976 году, Сусуму Тонегава показали, что генетический материал может перестраиваться, образуя широкий спектр доступных антител.[30]

Формы

Мембраносвязанную форму антитела можно назвать поверхностный иммуноглобулин (sIg) или мембранный иммуноглобулин (мкг). Это часть Рецептор В-клеток (BCR), который позволяет В-клеткам определять, когда в организме присутствует определенный антиген, и запускает активацию В-клеток.[7] BCR состоит из поверхностно-связанных антител IgD или IgM и связанных Ig-α и Ig-β. гетеродимеры, которые способны преобразование сигнала.[31] Типичная В-клетка человека будет иметь от 50 000 до 100 000 антител, связанных с ее поверхностью.[31] После связывания антигена они группируются в большие участки, диаметр которых может превышать 1 микрометр, на липидных рафтах, которые изолируют BCR от большинства других клеточная сигнализация рецепторы.[31]Эти патчи могут повысить эффективность клеточный иммунный ответ.[32] У людей поверхность клетки вокруг В-клеточных рецепторов оголена на несколько сотен нанометров.[31] что дополнительно изолирует BCR от конкурирующих влияний.

Взаимодействие антитело-антиген

Смотрите также: Гликан-белковые взаимодействия

Паратоп антитела взаимодействует с эпитопом антигена. Антиген обычно содержит различные эпитопы по своей поверхности, расположенные прерывисто, и доминантные эпитопы на данном антигене называются детерминантами.

Антитело и антиген взаимодействуют посредством пространственной комплементарности (замок и ключ). Молекулярные силы, участвующие во взаимодействии Fab-эпитопа, слабые и неспецифические - например, электростатические силы, водородные связи, гидрофобные взаимодействия, и силы Ван дер Ваальса. Это означает, что связывание между антителом и антигеном обратимо, и близость по отношению к антигену скорее относительное, чем абсолютное. Относительно слабое связывание также означает, что антитело может перекрестная реакция с разными антигенами разной относительной аффинности.

Часто, когда антитело и антиген связываются, они становятся иммунный комплекс, который функционирует как единый объект и может действовать как самостоятельный антиген, которому противодействуют другие антитела. По аналогии, гаптены представляют собой небольшие молекулы, которые сами по себе не вызывают иммунного ответа, но как только они связываются с белками, образующийся комплекс или гаптен-носитель аддукт антигенный.

Изотипы

Антитела бывают разных видов, известных как изотипы или классы. В плацентарный У млекопитающих существует пять изотипов антител, известных как IgA, IgD, IgE, IgG и IgM. Каждый из них назван с приставкой «Ig», что означает иммуноглобулин (название, которое иногда используется как синоним антитела), и различаются по своим биологическим свойствам, функциональному расположению и способности иметь дело с разными антигенами, как показано в таблице.[33] Различные суффиксы изотипов антител обозначают различные типы тяжелых цепей, которые содержит антитело, причем каждый класс тяжелых цепей назван в алфавитном порядке: α (альфа), γ (гамма), δ (дельта), ε (эпсилон) и μ (мю ). Это приводит к появлению IgA, IgG, IgD, IgE и IgM соответственно.

Изотипы антител млекопитающих
Учебный классПодклассыОписаниеКомплексы антител
IgA2Нашел в слизистая оболочка области, такие как кишка, дыхательные пути и урогенитальный тракт, и предотвращает колонизацию патогены.[34] Также содержится в слюне, слезах и грудном молоке.Некоторые антитела образуют комплексы, которые связываются с несколькими молекулами антигена.
IgD1Функционирует главным образом как рецептор антигена на В-клетках, которые не подвергались воздействию антигенов.[35] Было показано, что активировать базофилы и тучные клетки производить противомикробный факторы.[36]
IgE1Связывается с аллергены и триггеры гистамин освободить от тучные клетки и базофилы, и участвует в аллергия. Также защищает от паразитические черви.[5]
IgG4В своих четырех формах обеспечивает большую часть иммунитета на основе антител против вторгающихся патогенов.[5] Единственное антитело, способное пересекать плацента дать пассивный иммунитет плод.
IgM1Экспрессируется на поверхности В-клеток (мономер) и в секретируемой форме (пентамер) с очень высокой жадность. Устраняет патогены на ранних стадиях опосредованного В-клетками (гуморального) иммунитета до того, как появится достаточное количество IgG.[5][35]

Изотип антитела В-клетки изменяется во время клеточного разработка и активация. Незрелые В-клетки, которые никогда не подвергались воздействию антигена, экспрессируют только изотип IgM в форме, связанной с клеточной поверхностью. В-лимфоцит в этой готовой к ответной реакции форме известен как "наивный В-лимфоцит «Наивный В-лимфоцит экспрессирует как поверхностный IgM, так и IgD. Совместная экспрессия обоих изотипов иммуноглобулинов делает В-клетки готовыми к ответу на антиген.[37] Активация В-клеток следует за взаимодействием связанной с клеткой молекулы антитела с антигеном, в результате чего клетка делится и различать в производящую антитела клетку, называемую плазматическая ячейка. В этой активированной форме В-клетка начинает вырабатывать антитела в секретный форма, а не мембрана переплетенная форма. Немного дочерние клетки активированных В-клеток подвергаются переключение изотипа, механизм, который вызывает изменение выработки антител с IgM или IgD на другие изотипы антител, IgE, IgA или IgG, которые играют определенную роль в иммунной системе.

Изотипы антител, не обнаруженные у млекопитающих
Учебный классТипыОписание
IgYНашел в птицы и рептилии; относится к IgG млекопитающих.[38]
IgWНашел в акулы и коньки; относится к IgD млекопитающих.[39]

Структура

Антитела тяжелые (~ 150 кДа ) шаровидный белки плазмы. Размер молекулы антитела составляет около 10 нм.[40] У них есть сахарные цепи (гликаны), добавленные к консервированным аминокислота остатки.[4][41] Другими словами, антитела гликопротеины.[4] Присоединенные гликаны критически важны для структуры и функции антитела.[4] Среди прочего, экспрессированные гликаны могут модулировать аффинность антитела к его соответствующему FcR (-ам).[4]

Основная функциональная единица каждого антитела - иммуноглобулин (Ig). мономер (содержащий только одну единицу Ig); секретируемые антитела также могут быть димерный с двумя единицами Ig, как с IgA, тетрамерный с четырьмя единицами Ig, такими как костистая рыба IgM, или пентамерный с пятью единицами Ig, как у млекопитающих IgM.[42]

Несколько иммуноглобулиновых доменов составляют две тяжелые цепи (красную и синюю) и две легкие цепи (зеленую и желтую) антитела. Иммуноглобулиновые домены состоят из 7 (для константных доменов) и 9 (для вариабельных доменов). β-тяжи.

Вариабельные части антитела - это его V-области, а постоянная часть - это его C-область.

Иммуноглобулиновые домены

Мономер Ig представляет собой молекулу Y-образной формы, состоящую из четырех полипептид цепи; два одинаковых тяжелые цепи и два одинаковых легкие цепи связаны дисульфидные связи.[33]Каждая цепочка состоит из структурные области называется иммуноглобулиновые домены. Эти домены содержат около 70–110 аминокислоты и классифицируются по различным категориям (например, вариабельный или IgV, и константный или IgC) в соответствии с их размером и функцией.[43] У них есть характерная иммуноглобулиновая складка в котором два бета-листы создать форму «бутерброда», скрепленную взаимодействием между сохраненными цистеины и другие заряженные аминокислоты.

Тяжелая цепь

Дальнейшая информация: Тяжелая цепь иммуноглобулина

Существует пять типов иммуноглобулина млекопитающих. тяжелая цепь обозначается Греческие буквы: α, δ, ε, γ, и μ.[2] Тип присутствующей тяжелой цепи определяет учебный класс антитела; эти цепи обнаруживаются в антителах IgA, IgD, IgE, IgG и IgM соответственно.[1] Отдельные тяжелые цепи различаются по размеру и составу; α и γ содержат примерно 450 аминокислот, тогда как μ и ε содержат примерно 550 аминокислот. аминокислоты.[2]

  1. Fab регион
  2. Fc регион
  3. Тяжелая цепь (синий) с одной переменной (VЧАС) домен, за которым следует постоянный домен (CЧАС1), шарнирная область и еще две постоянные (CЧАС2 и CЧАС3) домены
  4. Легкая цепь (зеленый) с одной переменной (VL) и одна константа (CL) домен
  5. Сайт связывания антигена (паратоп)
  6. Шарнирные области

Каждая тяжелая цепь имеет две области: постоянная область и переменная область. Константная область идентична у всех антител одного изотипа, но отличается у антител разных изотипов. Тяжелые цепи γ, α и δ имеют постоянную область, состоящую из три тандем (в линию) Ig домены и шарнирная область для дополнительной гибкости;[33] тяжелые цепи μ и ε имеют постоянную область, состоящую из четыре иммуноглобулиновые домены.[2] Вариабельная область тяжелой цепи отличается в антителах, продуцируемых разными В-клетками, но одинакова для всех антител, продуцируемых одной В-клеткой или Клон В-клеток. Вариабельная область каждой тяжелой цепи имеет длину приблизительно 110 аминокислот и состоит из одного домена Ig.

Легкая цепь

Дальнейшая информация: Легкая цепь иммуноглобулина

У млекопитающих есть два типа легкая цепь иммуноглобулина, которые называются лямбда (λ) и каппа (κ).[2] Легкая цепь имеет два последовательных домена: один константный домен и один вариабельный домен. Примерная длина легкой цепи составляет от 211 до 217 аминокислот.[2] Каждое антитело содержит две всегда идентичные легкие цепи; только один тип легкой цепи, κ или λ, присутствует на антитело у млекопитающих. Другие типы легких цепей, такие как йота (ι) цепи, встречаются в других позвоночные как акулы (Chondrichthyes ) и костистые рыбы (Teleostei Не существует известной функциональной разницы между λ- и κ-типами легких цепей, и оба могут встречаться с любым из пяти основных типов тяжелых цепей.[2]

CDR, области Fv, Fab и Fc

Различные части антитела выполняют разные функции. В частности, «плечи» (которые, как правило, идентичны) содержат сайты, которые могут связываться с конкретными молекулами, что позволяет распознавать определенные антигены. Эта область антитела называется Fab (фрагмент, антигенсвязывающая) область. Он состоит из одного константного и одного вариабельного домена каждой тяжелой и легкой цепи антитела.[44]В паратоп на аминоконцевой конец антитела мономер формируется вариабельными доменами тяжелой и легкой цепей. Вариабельный домен также называют FV область и является наиболее важной областью для связывания с антигенами. Чтобы быть конкретным, переменные петли β-тяжей, по три на свету (VL) и тяжелый (VЧАС) цепи отвечают за связывание с антигеном. Эти петли называются регионы, определяющие комплементарность (CDR). Структуры этих CDR были сгруппированы и классифицированы Chothia et al.[45]и совсем недавно North et al.[46]и Николудис и др.[47]В рамках теория иммунных сетей, CDR также называют идиотипами. Согласно теории иммунных сетей, адаптивная иммунная система регулируется взаимодействиями между идиотипами.

Основание Y играет роль в модуляции активности иммунных клеток. Этот регион называется Fc (фрагмент, кристаллизующийся) регион, и состоит из двух тяжелых цепей, которые вносят два или три константных домена в зависимости от класса антитела.[2] Таким образом, область Fc гарантирует, что каждое антитело генерирует соответствующий иммунный ответ для данного антигена путем связывания с определенным классом Рецепторы Fc и другие иммунные молекулы, такие как дополнять белки. Делая это, он опосредует различные физиологический эффекты, включая признание опсонизированный частицы (связывание с FcγR), лизис клеток (связывание с комплементом), и дегрануляция из тучные клетки, базофилы, и эозинофилы (связывание с FcεR).[33][48]

Таким образом, Fab-область антитела определяет антигенную специфичность, тогда как Fc-область антитела определяет эффект класса антитела. Поскольку только константные домены тяжелых цепей составляют Fc-область антитела, классы тяжелых цепей в антителах определяют их классовые эффекты. Возможные классы тяжелых цепей в антителах включают альфа, гамма, дельта, эпсилон и мю, и они определяют изотипы антитела IgA, G, D, E и M соответственно. Это подразумевает, что разные изотипы антител обладают различными классовыми эффектами из-за связывания их разных Fc-областей и активации разных типов рецепторов. Возможные классовые эффекты антител включают: опсонизацию, агглютинацию, гемолиз, активацию комплемента, дегрануляцию тучных клеток и нейтрализацию (хотя эффект этого класса может быть опосредован Fab-областью, а не Fc-областью). Это также означает, что Fab-опосредованные эффекты направлены на микробы или токсины, тогда как опосредованные Fc эффекты направлены на эффекторные клетки или эффекторные молекулы (см. Ниже).

Функция

Дальнейшая информация: Иммунная система

Основные категории действия антител включают следующее:

1) Антитела (A) и патогены (B) свободно перемещаются в крови. 2) Антитела связываются с патогенами и могут делать это в различных формах, таких как опсонизация (2a), нейтрализация (2b) и агглютинация (2c). 3) Фагоцит (C) приближается к патогену, и Fc-область (D) антитела связывается с одним из Fc-рецепторов (E) фагоцита. 4) Фагоцитоз происходит при попадании возбудителя внутрь.

Активированные В-клетки различать в клетки, продуцирующие антитела, называемые плазматические клетки которые секретируют растворимые антитела или ячейки памяти которые сохраняются в организме в течение многих лет после этого, чтобы позволить иммунной системе запомнить антиген и быстрее реагировать на воздействие в будущем.[6]

На пренатальный и неонатальные этапы жизни наличие антител обеспечивается пассивная иммунизация от матери. Ранняя выработка эндогенных антител варьируется для разных типов антител и обычно появляется в течение первых лет жизни. Поскольку антитела свободно существуют в кровотоке, они считаются частью гуморальная иммунная система. Циркулирующие антитела вырабатываются клональными В-клетками, которые специфически реагируют только на один антиген (пример - вирус капсидный белок фрагмент). Антитела способствуют иммунитет тремя способами: они предотвращают проникновение патогенов или повреждение клеток, связываясь с ними; они стимулируют удаление патогенов за счет макрофаги и другие клетки, покрывая патоген; и они запускают уничтожение патогенов, стимулируя другие иммунные ответы такой как путь комплемента.[49] Антитела также будут запускать дегрануляцию вазоактивного амина, чтобы способствовать иммунитету против определенных типов антигенов (гельминтов, аллергенов).

Секретное млекопитающее IgM имеет пять единиц Ig. Каждая единица Ig (обозначенная цифрой 1) связана с двумя эпитопами. Fab регионы, поэтому IgM способен связывать до 10 эпитопов.

Активация комплемента

Антитела, которые связываются с поверхностными антигенами (например, с бактериями), будут привлекать первый компонент каскад дополнений с их Fc регион и инициировать активацию «классической» системы комплемента.[49] Это приводит к уничтожению бактерий двумя способами.[5] Во-первых, связывание антител и молекул комплемента маркирует микроб для проглатывания фагоциты в процессе, называемом опсонизация; эти фагоциты привлекаются определенными молекулами комплемента, генерируемыми в каскаде комплемента. Во-вторых, некоторые компоненты системы дополнения образуют комплекс мембранной атаки чтобы помочь антителам уничтожить бактерии напрямую (бактериолиз).[50]

Активация эффекторных клеток

Для борьбы с патогенами, размножающимися вне клеток, антитела связываются с патогенами, чтобы связать их вместе, заставляя их агглютинировать. Поскольку антитело имеет по крайней мере два паратопа, оно может связывать более одного антигена путем связывания идентичных эпитопов, находящихся на поверхности этих антигенов. Покрывая патоген, антитела стимулируют эффекторные функции против патогена в клетках, которые распознают их Fc-область.[5]

Те клетки, которые распознают патогены с оболочкой, имеют рецепторы Fc, которые, как следует из названия, взаимодействуют с Fc регион антител IgA, IgG и IgE.Взаимодействие конкретного антитела с рецептором Fc на конкретной клетке запускает эффекторную функцию этой клетки; фагоциты будут фагоцитоз, тучные клетки и нейтрофилы буду дегранулировать, естественные клетки-киллеры выпустит цитокины и цитотоксический молекулы; что в конечном итоге приведет к уничтожению вторгшегося микроба. Активация естественных клеток-киллеров антителами запускает цитотоксический механизм, известный как антителозависимая клеточно-опосредованная цитотоксичность (ADCC) - этот процесс может объяснить эффективность моноклональные антитела используется в биологический терапии против рак. Рецепторы Fc являются изотип-специфическими, что дает большую гибкость иммунной системе, вызывая только соответствующие иммунные механизмы для отдельных патогенов.[2]

Природные антитела

Люди и высшие приматы также производят «естественные антитела», которые присутствуют в сыворотке крови до вирусной инфекции. Природные антитела были определены как антитела, вырабатываемые без какой-либо предшествующей инфекции, вакцинация, воздействие других чужеродных антигенов или пассивная иммунизация. Эти антитела могут активировать классический путь комплемента, ведущий к лизису оболочечных вирусных частиц задолго до активации адаптивного иммунного ответа. Многие природные антитела направлены против дисахарида. галактоза α (1,3) -галактоза (α-Gal), которая находится в виде концевого сахара на гликозилированный белки клеточной поверхности и образуются в ответ на производство этого сахара бактериями, содержащимися в кишечнике человека.[51] Отказ от ксенотрансплантированные органы Полагают, что отчасти это результат естественных антител, циркулирующих в сыворотке реципиента, связывания с антигенами α-Gal, экспрессируемыми в донорской ткани.[52]

Разнообразие иммуноглобулинов

Практически все микробы могут вызывать реакцию антител. Успешное распознавание и искоренение множества различных типов микробов требует разнообразия антител; их аминокислотный состав варьируется, что позволяет им взаимодействовать со многими различными антигенами.[53] Было подсчитано, что люди вырабатывают около 10 миллиардов различных антител, каждое из которых способно связывать отдельный эпитоп антигена.[54] Хотя у одного человека вырабатывается огромный репертуар различных антител, количество гены доступность этих белков ограничена размером генома человека. Возникло несколько сложных генетических механизмов, которые позволяют В-клеткам позвоночных генерировать разнообразный пул антител из относительно небольшого числа генов антител.[55]

Вариативность домена

Определяющие комплементарность участки тяжелой цепи показаны красным (PDB: 1IGT​)

Хромосомная область, кодирующая антитело, большая и содержит несколько различных генных локусов для каждого домена антитела - хромосомную область, содержащую гены тяжелой цепи (IGH @ ) находится на хромосома 14, а локусы, содержащие гены легкой цепи лямбда и каппа (IGL @ и IGK @ ) находятся на хромосомах 22 и 2 в людях. Один из этих доменов называется вариабельным доменом, который присутствует в каждой тяжелой и легкой цепи каждого антитела, но может отличаться в разных антителах, генерируемых разными В-клетками. Различия между вариабельными доменами расположены в трех петлях, известных как гипервариабельные области (HV-1, HV-2 и HV-3) или регионы, определяющие комплементарность (CDR1, CDR2 и CDR3). CDR поддерживаются в вариабельных доменах консервативными каркасными областями. Локус тяжелой цепи содержит около 65 различных генов вариабельных доменов, которые все различаются по своим CDR. Комбинирование этих генов с набором генов для других доменов антитела генерирует большое количество антител с высокой степенью вариабельности. Эта комбинация называется рекомбинацией V (D) J и обсуждается ниже.[56]

V (D) J рекомбинация

Дальнейшая информация: V (D) J рекомбинация
Упрощенный обзор V (D) J-рекомбинации тяжелых цепей иммуноглобулина

Соматическая рекомбинация иммуноглобулинов, также известная как V (D) J рекомбинация, включает создание уникальной вариабельной области иммуноглобулина. Вариабельная область каждой тяжелой или легкой цепи иммуноглобулина кодируется несколькими частями, известными как генные сегменты (подгены). Эти сегменты называются сегментами переменного (V), разнесенного (D) и соединяющегося (J).[55] Сегменты V, D и J находятся в Тяжелые цепи Ig, но только сегменты V и J встречаются в Легкие цепи Ig. Существуют множественные копии сегментов гена V, D и J, которые тандемно расположены в геномы из млекопитающие. В костном мозге каждая развивающаяся В-клетка будет собирать вариабельную область иммуноглобулина путем случайного выбора и объединения одного V, одного D и одного J-генного сегментов (или одного V и одного J-сегментов в легкой цепи). Поскольку существует множество копий каждого типа сегмента гена, и для создания каждой вариабельной области иммуноглобулина можно использовать разные комбинации сегментов гена, этот процесс генерирует огромное количество антител, каждое с разными паратопы и, следовательно, разные антигенные специфичности.[8] Перестройка нескольких подгенов (то есть семейства V2) для иммуноглобулина легкой цепи лямбда сочетается с активацией микроРНК miR-650, которая дополнительно влияет на биологию B-клеток.

Тряпка белки играют важную роль в рекомбинации V (D) J в разрезании ДНК в определенной области.[8] Без этих белков рекомбинация V (D) J не произошла бы.[8]

После того, как В-клетка продуцирует функциональный ген иммуноглобулина во время рекомбинации V (D) J, она не может экспрессировать какую-либо другую вариабельную область (процесс, известный как аллельное исключение ), таким образом, каждая В-клетка может продуцировать антитела, содержащие только один вид вариабельной цепи.[2][57]

Соматическая гипермутация и созревание аффинности

Дальнейшая информация: Соматическая гипермутация и Созревание аффинности

После активации антигеном В-клетки начинают размножаться быстро. В этих быстро делящихся клетках гены, кодирующие вариабельные домены тяжелой и легкой цепей, подвергаются высокой скорости точечная мутация, процессом, называемым соматическая гипермутация (SHM). SHM дает примерно один нуклеотид изменение на вариабельный ген, на деление клетки.[10] Как следствие, любые дочерние В-клетки будут приобретать незначительные аминокислота различия в вариабельных доменах их цепей антител.

Это способствует увеличению разнообразия пула антител и влияет на связывание антител с антигеном. близость.[58] Некоторые точечные мутации приводят к выработке антител, которые имеют более слабое взаимодействие (низкое сродство) со своим антигеном, чем исходное антитело, а некоторые мутации будут генерировать антитела с более сильным взаимодействием (высокое сродство).[59] В-клетки, которые экспрессируют на своей поверхности антитела с высокой аффинностью, получат сильный сигнал о выживании во время взаимодействия с другими клетками, тогда как клетки с антителами с низким сродством не будут и умрут от апоптоз.[59] Таким образом, B-клетки, экспрессирующие антитела с более высоким сродством к антигену, будут превосходить те, которые обладают более слабым сродством по функции и выживанию, позволяя средней аффинности антител со временем увеличиваться. Процесс генерации антител с повышенной аффинностью связывания называется созревание аффинности. Созревание аффинности происходит в зрелых В-клетках после рекомбинации V (D) J и зависит от помощи хелперные Т-клетки.[60]

Механизм рекомбинации переключения классов, который позволяет переключать изотип в активированных В-клетках

Смена класса

Переключение изотипа или класса это биологический процесс происходит после активации B-клетки, что позволяет клетке производить различные классы антител (IgA, IgE или IgG).[8] Различные классы антител и, следовательно, эффекторные функции определяются константными (С) участками тяжелой цепи иммуноглобулина. Первоначально наивные В-клетки экспрессируют только IgM и IgD на клеточной поверхности с идентичными антигенсвязывающими областями. Каждый изотип адаптирован для определенной функции; следовательно, после активации может потребоваться антитело с эффекторной функцией IgG, IgA или IgE для эффективного устранения антигена. Переключение классов позволяет различным дочерним клеткам одной и той же активированной В-клетки производить антитела разных изотипов. При смене класса изменяется только константная область тяжелой цепи антитела; вариабельные области и, следовательно, антигенная специфичность остаются неизменными. Таким образом, потомство одной В-клетки может продуцировать антитела, все специфичные для одного и того же антигена, но со способностью вызывать эффекторную функцию, подходящую для каждой антигенной нагрузки. Переключение классов запускается цитокинами; генерируемый изотип зависит от того, какие цитокины присутствуют в среде В-клеток.[61]

Переключение классов происходит в гене тяжелой цепи локус с помощью механизма, называемого рекомбинацией переключения классов (CSR). Этот механизм основан на сохранении нуклеотид мотивы, называемые переключить (S) регионы, нашел в ДНК выше каждого гена константной области (кроме δ-цепи). Нить ДНК разорвана под действием ряда ферменты в двух выбранных S-регионах.[62][63] Вариабельный домен экзон воссоединяется через процесс, называемый негомологичное соединение концов (NHEJ) в желаемую постоянную область (γ, α или ε). В результате этого процесса образуется ген иммуноглобулина, который кодирует антитело другого изотипа.[64]

Обозначения специфичности

Антитело можно назвать моноспецифический если он имеет специфичность к тому же антигену или эпитопу,[65] или биспецифические, если они обладают сродством к двум разным антигенам или двум разным эпитопам одного и того же антигена.[66] Группу антител можно назвать поливалентный (или же неспецифический) если они имеют сродство к различным антигенам[67] или микроорганизмы.[67] Внутривенный иммуноглобулин, если не указано иное, состоит из множества различных IgG (поликлональных IgG). В отличие, моноклональные антитела идентичные антитела, продуцируемые одной В-клеткой.

Асимметричные антитела

Гетеродимерные антитела, которые также являются асимметричными антителами, обеспечивают большую гибкость и новые форматы для присоединения различных лекарств к плечам антител. Одним из общих форматов гетеродимерного антитела является формат «шишек в отверстия». Этот формат специфичен для части тяжелой цепи константной области в антителах. «Ручки» созданы путем замены маленькой аминокислоты на большую. Он укладывается в «дыру», которая создается путем замены большой аминокислоты на меньшую. То, что соединяет «выступы» с «отверстиями», - это дисульфидные связи между каждой цепью. Форма «шишек в отверстия» способствует антителозависимой клеточной цитотоксичности. Одноцепочечные вариабельные фрагменты (scFv ) связаны с вариабельным доменом тяжелой и легкой цепи через короткий линкерный пептид. Линкер богат глицином, что придает ему большую гибкость, и серином / треонином, что придает ему специфичность. Два разных фрагмента scFv могут быть соединены вместе через шарнирную область с константным доменом тяжелой цепи или константным доменом легкой цепи.[68] Это придает антителу биспецифичность, учитывая специфичность связывания двух разных антигенов.[69] Формат «ручки в отверстия» усиливает образование гетеродимеров, но не подавляет образование гомодимеров.

Чтобы еще больше улучшить функцию гетеродимерных антител, многие ученые ищут искусственные конструкции. Искусственные антитела представляют собой в значительной степени разнообразные белковые мотивы, которые используют функциональную стратегию молекулы антитела, но не ограничиваются структурными ограничениями петли и каркаса природного антитела.[70] Возможность управлять комбинационным дизайном последовательности и трехмерным пространством может превзойти естественный дизайн и позволить прикреплять различные комбинации лекарств к рукам.

Гетеродимерные антитела имеют более широкий диапазон форм, которые они могут принимать, и лекарства, прикрепленные к рукам, не обязательно должны быть одинаковыми на каждой руке, что позволяет использовать различные комбинации лекарств при лечении рака. Фармацевтические препараты способны производить высокофункциональные биспецифические и даже мультиспецифические антитела. Степень, в которой они могут функционировать, впечатляет, учитывая, что такое изменение формы от естественной формы должно привести к снижению функциональности.

Медицинские приложения

Диагностика заболеваний

Обнаружение определенных антител - очень распространенная форма медицинского диагностика, и такие приложения, как серология зависят от этих методов.[71] Например, в биохимических анализах для диагностики заболеваний[72] а титр антител, направленных против Вирус Эпштейна-Барра или же Болезнь Лайма оценивается по крови. Если этих антител нет, либо человек не инфицирован, либо инфекция произошла. очень давным-давно, и B-клетки, вырабатывающие эти специфические антитела, естественным образом распались.

В клиническая иммунология, уровни отдельных классов иммуноглобулинов измеряются нефелометрия (или турбидиметрия) для характеристики профиля антител пациента.[73] Повышение уровня различных классов иммуноглобулинов иногда полезно для определения причины печень повреждение у пациентов, для которых диагноз неясен.[1] Например, повышенный уровень IgA указывает на алкогольную цирроз, повышенный IgM указывает вирусный гепатит и первичный билиарный цирроз, в то время как IgG повышен при вирусном гепатите, аутоиммунный гепатит и цирроз печени.

Аутоиммунные расстройства часто можно отнести к антителам, которые связывают собственные эпитопы; многие могут быть обнаружены через анализы крови. Антитела, направленные против эритроцит поверхностные антигены в иммуноопосредованном гемолитическая анемия обнаруживаются с Тест Кумбса.[74] Тест Кумбса также используется для скрининга антител в переливание крови подготовка, а также для скрининга антител в дородовой женщины.[74]

Практически для диагностики инфекционных заболеваний используют несколько иммунодиагностических методов, основанных на обнаружении комплекса антиген-антитело, например ELISA, иммунофлуоресценция, Вестерн-блоттинг, иммунодиффузия, иммуноэлектрофорез, и магнитный иммуноанализ. Антитела против хорионического гонадотропина человека используются в безрецептурных тестах на беременность.

Новый химический состав диоксаборолана делает возможным радиоактивное фторид (18F ) маркировка антител, позволяющая позитронно-эмиссионная томография (ПЭТ) визуализация рак.[75]

Лечение болезней

Целевые терапия моноклональными антителами используется для лечения таких заболеваний, как ревматоидный артрит,[76] рассеянный склероз,[77] псориаз,[78] и многие формы рак включая неходжкинской лимфомы,[79] колоректальный рак, рак головы и шеи и рак молочной железы.[80]

Некоторые иммунодефицитные состояния, такие как Х-сцепленная агаммаглобулинемия и гипогаммаглобулинемия, приводят к частичному или полному отсутствию антител.[81] Эти заболевания часто лечат, вызывая краткосрочную форму иммунитет называется пассивный иммунитет. Пассивный иммунитет достигается за счет передачи готовых антител в форме человека или животного. сыворотка, объединенный иммуноглобулин или моноклональные антитела в пораженного человека.[82]

Пренатальная терапия

Резус-фактор, также известный как антиген Rh D, представляет собой антиген, обнаруженный на красные кровяные тельца; у резус-положительных (Rh +) людей этот антиген присутствует в красных кровяных тельцах, а у резус-отрицательных (Rh–) нет. Во время нормального роды, родовая травма или осложнения во время беременности, кровь из плод может войти в систему матери. В случае резус-несовместимых матери и ребенка последующее смешивание крови может повысить чувствительность резус-матери к резус-антигену в клетках крови ребенка с резус-фактором +, в результате чего оставшаяся часть беременность, и любые последующие беременности с риском гемолитическая болезнь новорожденного.[83]

Rho (D) иммунный глобулин антитела специфичны к антигену RhD человека.[84] Антитела против RhD вводятся как часть схема дородового лечения для предотвращения сенсибилизации, которая может возникнуть, если у резус-отрицательной матери есть резус-положительный плод. Лечение матери антителами против RhD до и сразу после травмы и родов разрушает антиген Rh в организме матери у плода. Важно отметить, что это происходит до того, как антиген сможет стимулировать материнские В-клетки «запоминать» резус-антиген путем генерации В-клеток памяти. Следовательно, ее гуморальная иммунная система не будет вырабатывать анти-резус-антитела и не будет атаковать резус-антигены нынешних или последующих детей. Лечение иммуноглобулином Rho (D) предотвращает сенсибилизацию, которая может привести к Резус-болезнь, но не предотвращает и не лечит основное заболевание.[84]

Приложения для исследований

Иммунофлуоресценция изображение эукариот цитоскелет. Микротрубочки как показано зеленым, помечены антителом, конъюгированным с зеленой флуоресцирующей молекулой, FITC.

Специфические антитела производятся путем инъекции антиген в млекопитающее, например мышь, крыса, кролик, козел, овца, или же лошадь для больших количеств антител. Кровь, выделенная от этих животных, содержит поликлональные антитела - множественные антитела, которые связываются с одним и тем же антигеном - в сыворотка, который теперь можно назвать антисыворотка. Антигены также вводятся в куры для генерации поликлональных антител в яичный желток.[85] Чтобы получить антитело, специфичное к одному эпитопу антигена, секретирующее антитело лимфоциты изолированы от животного и увековеченный путем слияния их с линией раковых клеток. Слитые клетки называются гибридомы, и будет постоянно расти и выделять антитела в культуре. Единичные клетки гибридомы выделяют клонирование с разбавлением чтобы генерировать клоны клеток все производят одно и то же антитело; эти антитела называются моноклональные антитела.[86] Поликлональные и моноклональные антитела часто очищают с использованием Белок A / G или же антиген-аффинная хроматография.[87]

В исследованиях очищенные антитела используются во многих областях. Антитела для исследовательских целей можно найти непосредственно у поставщиков антител или с помощью специальной поисковой системы. Исследовательские антитела чаще всего используются для выявления и обнаружения внутриклеточный и внеклеточный белки. Антитела используются в проточной цитометрии дифференцировать типы клеток по экспрессируемым ими белкам; разные типы клеток выражают разные комбинации кластер дифференциации молекулы на своей поверхности и продуцируют различные внутриклеточные и секретируемые белки.[88] Они также используются в иммунопреципитация для отделения белков и всего, что с ними связано (коиммунопреципитация) от других молекул в клеточный лизат,[89] в Вестерн-блоттинг анализы для идентификации белков, разделенных электрофорез,[90] И в иммуногистохимия или же иммунофлуоресценция для изучения экспрессии белков в срезах тканей или для определения местонахождения белков внутри клеток с помощью микроскоп.[88][91] Белки также могут быть обнаружены и количественно определены с помощью антител, используя ELISA и ELISpot техники.[92][93]

Антитела, используемые в исследованиях, являются одними из самых мощных, но наиболее проблематичных реагентов с огромным количеством факторов, которые необходимо контролировать в любом эксперименте, включая перекрестную реактивность или антитело, распознающее несколько эпитопов и аффинность, которые могут широко варьироваться в зависимости от экспериментальных условий, таких как pH, растворитель, состояние тканей и т. д. Было предпринято множество попыток улучшить оба способа, которыми исследователи проверяют антитела.[94][95] и способы, которыми они сообщают об антителах. Исследователи, использующие антитела в своей работе, должны правильно регистрировать их, чтобы их исследования были воспроизводимы (и, следовательно, протестированы и квалифицированы другими исследователями). Менее половины исследовательских антител, упомянутых в научных статьях, можно легко идентифицировать.[96] Статьи, опубликованные в F1000 в 2014 и 2015 годах предоставить исследователям руководство по отчетности об использовании антител в исследованиях.[97][98] Документ RRID опубликован совместно в 4 журналах, которые реализовали RRID Стандарт цитирования исследовательских ресурсов, который использует данные с сайта antibodyregistry.org в качестве источника идентификаторов антител.[99] (см. также группу в Force11[100]).

Нормативно-правовые акты

Производство и тестирование

Традиционно большинство антител вырабатывается гибридомой. клетка линий путем иммортализации продуцирующих антитела клеток путем химически индуцированного слияния с клетками миеломы. В некоторых случаях дополнительные слияния с другими линиями создают «триомы» и «квадромы». Процесс производства должен быть соответствующим образом описан и утвержден. Валидационные исследования должны как минимум включать:

  • Демонстрация того, что процесс может производить хорошее качество (процесс должен быть валидирован)
  • В эффективность очистки антител (все примеси и вирус необходимо устранить)
  • Характеристика очищенного антитела (физико-химический характеристика, иммунологический характеристики, биологический деятельность, загрязняющие вещества, ...)
  • Определение исследований по очищению от вирусов

Перед клиническими испытаниями

  • Тестирование безопасности продукта: стерильность (бактерии и грибки), тестирование in vitro и in vivo на случайные вирусы, тестирование на мышиные ретровирусы ... Данные о безопасности продукта, необходимые до начала технико-экономических испытаний в серьезных или непосредственно угрожающих жизни условиях, они служат для оценки опасный потенциал продукта.
  • Технико-экономическое обоснование: это пилотные исследования, цели которых включают, среди прочего, раннюю характеристику безопасности и первоначальное подтверждение концепции на небольшой конкретной популяции пациентов (тестирование in vitro или in vivo).

Доклинические исследования

  • Тестирование перекрестная реактивность антитела: для выявления нежелательных взаимодействий (токсичности) антител с ранее охарактеризованными тканями. Это исследование можно проводить in vitro (реактивность антитела или иммуноконъюгата следует определять с помощью быстрозамороженных тканей взрослого человека) или in vivo (с соответствующими моделями животных).
  • Доклинические фармакология и токсичность тестирование: доклинический Тестирование безопасности антител предназначено для выявления возможной токсичности для людей, оценки вероятности и серьезности потенциальных нежелательных явлений у людей, а также для определения безопасной начальной дозы и повышения дозы, когда это возможно.
  • Исследования токсичности на животных: испытание на острую токсичность, испытание на токсичность при повторных дозах, испытание на долгосрочную токсичность.
  • Фармакокинетические и фармакодинамические испытания: использование для определения клинических дозировок, активности антител, оценки потенциальных клинических эффектов.

Прогнозирование структуры и расчетный дизайн антител

Важность антител в здравоохранении и биотехнология промышленность требует знания их структуры на высокое разрешение. Эта информация используется для белковая инженерия, изменение аффинности связывания антигена и идентификация эпитопа данного антитела. Рентгеновская кристаллография - один из широко используемых методов определения структур антител. Однако кристаллизация антитела часто трудоемка и занимает много времени. Вычислительные подходы обеспечивают более дешевую и быструю альтернативу кристаллографии, но их результаты более неоднозначны, поскольку они не дают эмпирических структур. Интернет-серверы, такие как Веб-моделирование антител (WAM)[101] и Прогнозирование структуры иммуноглобулинов (СВИНЬИ)[102] позволяет компьютерное моделирование вариабельных областей антител. Rosetta Antibody - это новое антитело FV прогноз структуры региона сервер, который включает сложные методы для минимизации петель CDR и оптимизации относительной ориентации легкой и тяжелой цепей, а также гомология модели, которые предсказывают успешную стыковку антител с их уникальным антигеном.[103]

Способность описывать антитело через аффинность связывания с антигеном дополняется информацией о структуре антитела и аминокислотных последовательностях для целей патентной формулы.[104] Было представлено несколько методов компьютерного дизайна антител на основе структурных биоинформатических исследований CDR антител.[105][106][107]

Существует множество методов, используемых для секвенирования антитела, включая Эдман деградация, кДНК, так далее.; хотя одно из наиболее распространенных современных применений для идентификации пептидов / белков - жидкость хроматография в сочетании с тандемная масс-спектрометрия (ЖХ-МС / МС).[108] Методы секвенирования большого объема антител требуют вычислительных подходов для анализа данных, в том числе: de novo секвенирование непосредственно из тандемных масс-спектров[109] и методы поиска в базе данных, использующие существующие белковая последовательность базы данных.[110][111] Многие версии секвенирования белка дробовика могут увеличить охват за счет использования CID / HCD / ETD[112] методы фрагментации и другие методы, и они достигли значительного прогресса в попытке полностью секвенировать белки, особенно антитела. Другие методы предполагали существование подобных белков,[113] известный последовательность генома,[114] или комбинированные подходы сверху вниз и снизу вверх.[115] Современные технологии позволяют собирать белковые последовательности с высокой точностью за счет интеграции de novo секвенирование пептиды, интенсивности и позиционной достоверности из базы данных и гомология поиски.[116]

Миметик антител

Миметики антител представляют собой органические соединения, такие как антитела, которые могут специфически связывать антигены. Обычно это искусственные пептиды или белки с молярной массой от 3 до 20 кДа. Нуклеиновые кислоты и небольшие молекулы иногда считаются миметиками антител, но из них не состоят искусственные антитела, фрагменты антител и слитые белки. Общие преимущества перед антителами - лучшая растворимость, проникновение в ткани, устойчивость к нагреванию и ферментам, а также сравнительно низкие производственные затраты. Миметики антител, такие как Аффимер и DARPin были разработаны и коммерциализированы как исследовательские, диагностические и терапевтические средства.[117]

Смотрите также

Рекомендации

  1. ^ а б c d Роадс Р.А., Пфланцер Р.Г. (2002). Физиология человека (5-е изд.). Томсон обучения. п.584. ISBN  978-0-534-42174-8.
  2. ^ а б c d е ж грамм час я j k Джейнвей C (2001). Иммунобиология (5-е изд.). Издательство Гарленд. ISBN  978-0-8153-3642-6.
  3. ^ Litman GW, Rast JP, Shamblott MJ, Haire RN, Hulst M, Roess W., Litman RT, Hinds-Frey KR, Zilch A, Amemiya CT (январь 1993 г.). «Филогенетическая диверсификация генов иммуноглобулинов и репертуар антител». Молекулярная биология и эволюция. 10 (1): 60–72. Дои:10.1093 / oxfordjournals.molbev.a040000. PMID  8450761.
  4. ^ а б c d е ж грамм Маверакис Э., Ким К., Шимода М., Гершвин М.Э., Патель Ф., Уилкен Р., Райчаудхури С., Рухак Л. Р., Лебрилла CB (февраль 2015 г.). «Гликаны в иммунной системе и теория аутоиммунитета с измененными гликанами: критический обзор». Журнал аутоиммунитета. 57 (6): 1–13. Дои:10.1016 / j.jaut.2014.12.002. ЧВК  4340844. PMID  25578468.
  5. ^ а б c d е ж Pier GB, Lyczak JB, Wetzler LM (2004). Иммунология, инфекции и иммунитет. ASM Press. ISBN  978-1-55581-246-1.
  6. ^ а б Боргези Л., Милкарек С. (2006). «От В-клетки к плазматической клетке: регуляция рекомбинации V (D) J и секреции антител». Иммунологические исследования. 36 (1–3): 27–32. Дои:10.1385 / ИК: 36: 1: 27. PMID  17337763.
  7. ^ а б Паркер, округ Колумбия (1993). «Т-клеточно-зависимая активация В-клеток». Ежегодный обзор иммунологии. 11 (1): 331–60. Дои:10.1146 / annurev.iy.11.040193.001555. PMID  8476565.
  8. ^ а б c d е ж Рынок E, Papavasiliou FN (октябрь 2003 г.). «V (D) J-рекомбинация и эволюция адаптивной иммунной системы». PLOS Биология. 1 (1): E16. Дои:10.1371 / journal.pbio.0000016. ЧВК  212695. PMID  14551913.
  9. ^ Уильямс CM, Галли SJ (май 2000 г.). «Различные потенциальные эффекторные и иммунорегуляторные роли тучных клеток при аллергических заболеваниях». Журнал аллергии и клинической иммунологии. 105 (5): 847–59. Дои:10.1067 / mai.2000.106485. PMID  10808163.
  10. ^ а б Диаз М., Касали П. (апрель 2002 г.). «Соматическая гипермутация иммуноглобулина». Текущее мнение в иммунологии. 14 (2): 235–40. Дои:10.1016 / S0952-7915 (02) 00327-8. ЧВК  4621002. PMID  11869898.
  11. ^ а б c d Линденманн Дж (апрель 1984 г.). "Происхождение терминов" антитело "и" антиген "'". Скандинавский журнал иммунологии. 19 (4): 281–5. Дои:10.1111 / j.1365-3083.1984.tb00931.x. PMID  6374880.
  12. ^ Падлан Э.А. (февраль 1994 г.). «Анатомия молекулы антитела». Молекулярная иммунология. 31 (3): 169–217. Дои:10.1016/0161-5890(94)90001-9. PMID  8114766.
  13. ^ Заутер, Эрик (10 ноября 2018 г.). «Новая скульптура, изображающая человеческое антитело как защитный ангел, установлена ​​в кампусе Скриппса во Флориде». Новости и обзоры. Vol. 8 нет. 34. Исследовательский институт Скриппса. В архиве из оригинала 10 января 2011 г.. Получено 12 декабря 2008.
  14. ^ Песковиц, Дэвид (22 октября 2008 г.). «Белковая скульптура, вдохновленная Витрувианским человеком». боингбоинг (Блог). В архиве из оригинала от 4 ноября 2010 г.. Получено 12 декабря 2008.
  15. ^ Эмиль фон Беринг - Биографический. NobelPrize.org. Nobel Media AB 2020. Пн. 20 января 2020. <https://www.nobelprize.org/prizes/medicine/1901/behring/biographic/ >
  16. ^ AGN (август 1931 г.). "Покойный барон Шибасабуро Китасато". Журнал Канадской медицинской ассоциации. 25 (2): 206. ЧВК  382621. PMID  20318414.
  17. ^ Винау Ф, Вестфаль О, Винау Р (июль 2004 г.). «Пауль Эрлих - в поисках волшебной пули». Микробы и инфекции. 6 (8): 786–9. Дои:10.1016 / j.micinf.2004.04.003. PMID  15207826.
  18. ^ Сильверштейн AM (май 2003 г.). «Клеточная иммунология против гуморальной: вековой спор». Иммунология природы. 4 (5): 425–8. Дои:10.1038 / ni0503-425. PMID  12719732.
  19. ^ Van Epps HL (январь 2006 г.). «Майкл Хайдельбергер и демистификация антител». Журнал экспериментальной медицины. 203 (1): 5. Дои:10.1084 / jem.2031fta. ЧВК  2118068. PMID  16523537.
  20. ^ Маррак-младший (1938). Химия антигенов и антител (2-е изд.). Лондон: Канцелярия Его Величества. OCLC  3220539.
  21. ^ «Документы Лайнуса Полинга: как работают антитела и ферменты». В архиве из оригинала 5 декабря 2010 г.. Получено 5 июн 2007.
  22. ^ Сильверштейн AM (декабрь 2004 г.). «Меченые антигены и антитела: эволюция волшебных маркеров и волшебных пуль» (PDF). Иммунология природы. 5 (12): 1211–7. Дои:10.1038 / ni1140. PMID  15549122. Архивировано из оригинал (PDF) 25 марта 2009 г.
  23. ^ Эдельман GM, Галли Дж. А. (август 1962 г.). «Природа белков Бенс-Джонса. Химическое сходство с полипептидными цепями миеломных глобулинов и нормальных гамма-глобулинов». Журнал экспериментальной медицины. 116 (2): 207–27. Дои:10.1084 / jem.116.2.207. ЧВК  2137388. PMID  13889153.
  24. ^ Стивенс Ф.Дж., Соломон А., Шиффер М. (июль 1991 г.). «Белки Бенс Джонса: мощный инструмент для фундаментального изучения химии белков и патофизиологии». Биохимия. 30 (28): 6803–5. Дои:10.1021 / bi00242a001. PMID  2069946.
  25. ^ а б Раджу Т.Н. (сентябрь 1999 г.). «Нобелевские хроники. 1972: Джеральд М. Эдельман (р. 1929) и Родни Р. Портер (1917–85)». Ланцет. 354 (9183): 1040. Дои:10.1016 / S0140-6736 (05) 76658-7. PMID  10501404.
  26. ^ Хохман Дж., Инбар Д., Гивол Д. (март 1973 г.). «Активный фрагмент антитела (Fv), состоящий из вариабельных частей тяжелой и легкой цепей». Биохимия. 12 (6): 1130–5. Дои:10.1021 / bi00730a018. PMID  4569769.
  27. ^ Томаси ТБ (октябрь 1992 г.). «Открытие секреторного IgA и иммунной системы слизистой оболочки». Иммунология сегодня. 13 (10): 416–8. Дои:10.1016 / 0167-5699 (92) 90093-М. PMID  1343085.
  28. ^ Preud'homme JL, Petit I, Barra A, Morel F, Lecron JC, Lelièvre E (октябрь 2000 г.). «Структурные и функциональные свойства мембран и секретируемых IgD». Молекулярная иммунология. 37 (15): 871–87. Дои:10.1016 / S0161-5890 (01) 00006-2. PMID  11282392.
  29. ^ Йоханссон С.Г. (2006). «Открытие иммуноглобулина Е». Аллергия и астма. 27 (2 Дополнение 1): S3–6. PMID  16722325.
  30. ^ Ходзуми Н., Тонегава С. (октябрь 1976 г.). «Доказательства соматической перестройки генов иммуноглобулинов, кодирующих вариабельные и константные области». Труды Национальной академии наук Соединенных Штатов Америки. 73 (10): 3628–32. Bibcode:1976PNAS ... 73.3628H. Дои:10.1073 / pnas.73.10.3628. ЧВК  431171. PMID  824647.
  31. ^ а б c d Максвелл Майер (W) (2004). Грир Дж. Г., Ферстер Дж., Люкенс Дж. Н., Роджерс Дж. М., Параскевас Ф. (ред.). Клиническая гематология Винтроба (11-е изд.). Хагерстаун, Мэриленд: Липпинкотт Уильямс и Уилкинс. С. 453–456. ISBN  978-0-7817-3650-3.
  32. ^ Толар П., Сон Х.В., Пирс С.К. (февраль 2008 г.). «Просмотр антиген-индуцированной инициации активации В-клеток в живых клетках». Иммунологические обзоры. 221 (1): 64–76. Дои:10.1111 / j.1600-065X.2008.00583.x. PMID  18275475.
  33. ^ а б c d Гав Дж. М., Бертон Д. Р. (февраль 2004 г.). «Взаимодействия человеческого антитела-рецептора Fc, освещенные кристаллическими структурами». Обзоры природы. Иммунология. 4 (2): 89–99. Дои:10.1038 / nri1266. PMID  15040582.
  34. ^ Underdown BJ, Шифф JM (1986). «Иммуноглобулин А: стратегическая инициатива защиты на поверхности слизистой оболочки». Ежегодный обзор иммунологии. 4 (1): 389–417. Дои:10.1146 / annurev.iy.04.040186.002133. PMID  3518747.
  35. ^ а б Гейсбергер Р., Ламерс М., Ахатц Г. (август 2006 г.). «Загадка двойного выражения IgM и IgD». Иммунология. 118 (4): 429–37. Дои:10.1111 / j.1365-2567.2006.02386.x. ЧВК  1782314. PMID  16895553.
  36. ^ Chen K, Xu W., Wilson M, He B, Miller NW, Bengtén E, Edholm ES, Santini PA, Rath P, Chiu A, Cattalini M, Litzman J, B Bussel J, Huang B, Meini A, Riesbeck K, Cunningham -Rundles C, Plebani A, Cerutti A (август 2009 г.). «Иммуноглобулин D усиливает иммунный надзор за счет активации антимикробных, провоспалительных и стимулирующих В-клеток программ в базофилах». Иммунология природы. 10 (8): 889–98. Дои:10.1038 / ni.1748. ЧВК  2785232. PMID  19561614.
  37. ^ Годинг JW (1978). Аллотипы рецепторов IgM и IgD у мышей: зонд для дифференцировки лимфоцитов. Современные темы иммунобиологии. 8. С. 203–43. Дои:10.1007/978-1-4684-0922-2_7. ISBN  978-1-4684-0924-6. PMID  357078.
  38. ^ Лундквист М.Л., Миддлтон Д.Л., Рэдфорд С., Варр Г.В., Магор К.Э. (2006). «Иммуноглобулины не галлиформных птиц: экспрессия и репертуар антител у утки». Развитие и сравнительная иммунология. 30 (1–2): 93–100. Дои:10.1016 / j.dci.2005.06.019. ЧВК  1317265. PMID  16150486.
  39. ^ Берштейн Р.М., Шлютер С.Ф., Шен С., Марчалонис Дж. Дж. (Апрель 1996 г.). «Новый класс высокомолекулярных иммуноглобулинов кархариновой акулы: влияние на свойства первичного иммуноглобулина». Труды Национальной академии наук Соединенных Штатов Америки. 93 (8): 3289–93. Bibcode:1996PNAS ... 93.3289B. Дои:10.1073 / пнас.93.8.3289. ЧВК  39599. PMID  8622930.
  40. ^ Рет М (2013). «Согласование размеров клеток с размерами молекул» (PDF). Иммунология природы. 14 (8): 765–7. Дои:10.1038 / ni.2621. PMID  23867923.
  41. ^ Матту Т.С., Пласс Р.Дж., Уиллис А.С., Килиан М., Вормальд М.Р., Леллуш А.С., Радд П.М., Гав Дж. М., Двек Р. А. (январь 1998 г.). «Гликозилирование и структура областей человеческого сывороточного IgA1, Fab и Fc и роль N-гликозилирования на взаимодействиях с рецептором Fcα». Журнал биологической химии. 273 (4): 2260–72. Дои:10.1074 / jbc.273.4.2260. PMID  9442070.
  42. ^ Ру К.Х. (октябрь 1999 г.). «Структура и функция иммуноглобулинов, выявленные с помощью электронной микроскопии». Международный архив аллергии и иммунологии. 120 (2): 85–99. Дои:10.1159/000024226. PMID  10545762.
  43. ^ Барклай А.Н. (август 2003 г.). «Мембранные белки с иммуноглобулиноподобными доменами - главное суперсемейство молекул взаимодействия». Семинары по иммунологии. 15 (4): 215–23. Дои:10.1016 / S1044-5323 (03) 00047-2. PMID  14690046.
  44. ^ Putnam FW, Лю Ю.С., Low TL (апрель 1979 г.). «Первичная структура иммуноглобулина IgA1 человека. IV. Протеаза IgA1 стрептококка, расщепление, фрагменты Fab и Fc, и полная аминокислотная последовательность тяжелой цепи альфа 1». Журнал биологической химии. 254 (8): 2865–74. PMID  107164.
  45. ^ Аль-Лазикани Б., Леск А.М., Чотия С. (ноябрь 1997 г.). «Стандартные конформации канонических структур иммуноглобулинов». Журнал молекулярной биологии. 273 (4): 927–48. Дои:10.1006 / jmbi.1997.1354. PMID  9367782.
  46. ^ North B, Lehmann A, Dunbrack RL (февраль 2011 г.). «Новая кластеризация конформаций петли CDR антитела». Журнал молекулярной биологии. 406 (2): 228–56. Дои:10.1016 / j.jmb.2010.10.030. ЧВК  3065967. PMID  21035459.
  47. ^ Николудис Д., Питтс Дж. Э., Салдана Дж. В. (2014). «Полная, многоуровневая конформационная кластеризация областей, определяющих комплементарность антител». PeerJ. 2 (e456): e456. Дои:10.7717 / peerj.456. ЧВК  4103072. PMID  25071986.
  48. ^ Хейман Б. (декабрь 1996 г.). «Комплемент и Fc-рецепторы в регуляции ответа антител». Письма иммунологии. 54 (2–3): 195–9. Дои:10.1016 / S0165-2478 (96) 02672-7. PMID  9052877.
  49. ^ а б Раветч СП, Болланд С (2001). «Рецепторы IgG Fc». Ежегодный обзор иммунологии. 19 (1): 275–90. Дои:10.1146 / annurev.immunol.19.1.275. PMID  11244038.
  50. ^ Рус Х., Кудричи Ц., Никулеску Ф. (2005). «Роль системы комплемента в врожденном иммунитете». Иммунологические исследования. 33 (2): 103–12. Дои:10.1385 / ИК: 33: 2: 103. PMID  16234578.
  51. ^ Раканиелло, Винсент (6 октября 2009 г.). «Природные антитела защищают от вирусной инфекции». Блог о вирусологии. В архиве из оригинала 20 февраля 2010 г.. Получено 22 января 2010.
  52. ^ Милланд Дж., Сандрин М.С. (декабрь 2006 г.). «Группа крови ABO и родственные антигены, естественные антитела и трансплантация». Тканевые антигены. 68 (6): 459–66. Дои:10.1111 / j.1399-0039.2006.00721.x. PMID  17176435.
  53. ^ Миан И.С., Брэдвелл А.Р., Олсон А.Дж. (январь 1991 г.). «Структура, функция и свойства сайтов связывания антител». Журнал молекулярной биологии. 217 (1): 133–51. Дои:10.1016 / 0022-2836 (91) 90617-Ф. PMID  1988675.
  54. ^ Фаннинг Л.Дж., Коннор А.М., Ву Г.Э. (апрель 1996 г.). «Развитие репертуара иммуноглобулинов». Клиническая иммунология и иммунопатология. 79 (1): 1–14. Дои:10.1006 / клин.1996.0044. PMID  8612345.
  55. ^ а б Немази Д. (октябрь 2006 г.). «Редактирование рецепторов в развитии лимфоцитов и центральной толерантности». Обзоры природы. Иммунология. 6 (10): 728–40. Дои:10.1038 / nri1939. PMID  16998507.
  56. ^ Питер Пархэм. Иммунная система. 2-е изд. Garland Science: New York, 2005. стр.47–62.
  57. ^ Бергман Ю., Кедр Х (октябрь 2004 г.). «Поэтапный эпигенетический процесс контролирует исключение аллелей иммуноглобулинов». Обзоры природы. Иммунология. 4 (10): 753–61. Дои:10.1038 / nri1458. PMID  15459667.
  58. ^ Хондзё Т., Хабу С. (1985). «Происхождение иммунного разнообразия: генетическая изменчивость и отбор». Ежегодный обзор биохимии. 54 (1): 803–30. Дои:10.1146 / annurev.bi.54.070185.004103. PMID  3927822.
  59. ^ а б Ор-Гиль М., Виттенбринк Н., Вайзер А.А., Шуххардт Дж. (Апрель 2007 г.). «Рециркуляция В-клеток зародышевого центра: многоуровневая стратегия отбора для созревания антител». Иммунологические обзоры. 216: 130–41. Дои:10.1111 / j.1600-065X.2007.00507.x. PMID  17367339.
  60. ^ Neuberger MS, Ehrenstein MR, Rada C, Sale J, Batista FD, Williams G, Milstein C (март 2000 г.). «Память в компартменте В-клеток: созревание аффинности антитела». Философские труды Лондонского королевского общества. Серия B, Биологические науки. 355 (1395): 357–60. Дои:10.1098 / rstb.2000.0573. ЧВК  1692737. PMID  10794054.
  61. ^ Ставнезер Дж., Амемия СТ (август 2004 г.). «Эволюция переключения изотипов». Семинары по иммунологии. 16 (4): 257–75. Дои:10.1016 / j.smim.2004.08.005. PMID  15522624.
  62. ^ Дюранди А. (август 2003 г.). «Активация цитидиндезаминазы: двойная роль в рекомбинации с переключением классов и соматической гипермутации». Европейский журнал иммунологии. 33 (8): 2069–73. Дои:10.1002 / eji.200324133. PMID  12884279.
  63. ^ Казали П., Зан Х (ноябрь 2004 г.). «Переключение классов и транслокация Myc: как разрушается ДНК?». Иммунология природы. 5 (11): 1101–3. Дои:10.1038 / ni1104-1101. ЧВК  4625794. PMID  15496946.
  64. ^ Либер М.Р., Ю.К., Рагхаван СК (сентябрь 2006 г.). «Роли негомологичного соединения концов ДНК, рекомбинации V (D) J и рекомбинации переключения классов в хромосомных транслокациях». Ремонт ДНК. 5 (9–10): 1234–45. Дои:10.1016 / j.dnarep.2006.05.013. PMID  16793349.
  65. ^ п. 22 в: Шенфельд Y, Мерони P, Гершвин ME (2007). Автоантибоди. Амстердам; Бостон: Эльзевир. ISBN  978-0-444-52763-9.
  66. ^ Spiess C, Zhai Q, Carter PJ (октябрь 2015 г.). «Альтернативные молекулярные форматы и терапевтическое применение биспецифических антител». Молекулярная иммунология. 67 (2 Pt A): 95–106. Дои:10.1016 / j.molimm.2015.01.003. PMID  25637431.
  67. ^ а б Словарь Farlex> поливалентный Цитирование: Медицинский словарь американского наследия. 2004 г.
  68. ^ Gunasekaran K, Pentony M, Shen M, Garrett L, Forte C, Woodward A, Ng SB, Born T, Retter M, Manchulenko K, Sweet H, Foltz IN, Wittekind M, Yan W (июнь 2010 г.). «Усиление образования гетеродимера Fc антитела за счет электростатических управляющих эффектов: приложения к биспецифическим молекулам и моновалентным IgG». Журнал биологической химии. 285 (25): 19637–46. Дои:10.1074 / jbc.M110.117382. ЧВК  2885242. PMID  20400508.
  69. ^ Мюллер К.М. (1998). «Первый константный домен (CH1 и CL) антитела, используемый в качестве домена гетеродимеризации для биспецифических миниантител». Письма FEBS. 422 (2): 259–264. Дои:10.1016 / s0014-5793 (98) 00021-0. PMID  9490020.
  70. ^ Гао С., Мао С., Ло С.Х., Виршинг П., Лернер Р.А., Янда К.Д. (май 1999 г.). «Изготовление искусственных антител: формат для фагового дисплея комбинаторных гетеродимерных массивов». Труды Национальной академии наук Соединенных Штатов Америки. 96 (11): 6025–30. Bibcode:1999PNAS ... 96.6025G. Дои:10.1073 / пнас.96.11.6025. ЧВК  26829. PMID  10339535.
  71. ^ «Анимированные изображения того, как антитела используются в анализах ELISA». Cellular Technology Ltd. - Европа. Архивировано из оригинал 14 июня 2011 г.. Получено 8 мая 2007.
  72. ^ «Анимированные изображения того, как антитела используются в анализах ELISPOT». Cellular Technology Ltd. - Европа. Архивировано из оригинал 16 мая 2011 г.. Получено 8 мая 2007.
  73. ^ Стерн П. (2006). «Современные возможности турбидиметрии и нефелометрии» (PDF). Клин Биохим Метаб. 14 (3): 146–151. Архивировано из оригинал (PDF) 10 апреля 2008 г.
  74. ^ а б Дин Л. (2005). «Глава 4: Гемолитическая болезнь новорожденного». Группы крови и антигены эритроцитов. NCBI Bethesda (MD): Национальная медицинская библиотека (США).
  75. ^ Родригес Е.А., Ван И, Крисп Дж. Л., Вера Д. Р., Цзянь Р., Тинг Р. (май 2016 г.). «Новая химия диоксаборолана делает возможным [(18) F] -излучающий позитрон, флуоресцентный [(18) F] -многодальный синтез биомолекул из твердой фазы». Биоконъюгат Химия. 27 (5): 1390–1399. Дои:10.1021 / acs.bioconjchem.6b00164. ЧВК  4916912. PMID  27064381.
  76. ^ Фельдманн М., Майни Р.Н. (2001). «Анти-TNF альфа-терапия ревматоидного артрита: что мы узнали?». Ежегодный обзор иммунологии. 19 (1): 163–96. Дои:10.1146 / annurev.immunol.19.1.163. PMID  11244034.
  77. ^ Доггрелл С.А. (июнь 2003 г.). «Натализумаб - это прорыв в лечении рассеянного склероза?». Мнение эксперта по фармакотерапии. 4 (6): 999–1001. Дои:10.1517/14656566.4.6.999. PMID  12783595.
  78. ^ Крюгер Г.Г., Лэнгли Р.Г., Леонарди К., Йилдинг Н., Гуццо С., Ван И, Дули Л.Т., Лебволь М. (февраль 2007 г.). «Человеческое моноклональное антитело к интерлейкину-12/23 для лечения псориаза». Медицинский журнал Новой Англии. 356 (6): 580–92. Дои:10.1056 / NEJMoa062382. PMID  17287478.
  79. ^ Плоскер Г.Л., Фиггитт Д.П. (2003). «Ритуксимаб: обзор его использования при неходжкинской лимфоме и хроническом лимфолейкозе». Наркотики. 63 (8): 803–43. Дои:10.2165/00003495-200363080-00005. PMID  12662126.
  80. ^ Фогель С.Л., Кобли М.А., Трипати Д., Гутейл Дж. К., Харрис Л. Н., Ференбахер Л., Слэмон Д. Д., Мерфи М., Новотны В. Ф., Берчмор М., Шак С., Стюарт С. Дж. (2001). «Монотерапия Герцептином первой линии при метастатическом раке груди». Онкология. 61. 61 Дополнение 2 (Дополнение 2): 37–42. Дои:10.1159/000055400. PMID  11694786.
  81. ^ LeBien TW (июль 2000 г.). «Судьбы предшественников В-клеток человека». Кровь. 96 (1): 9–23. Дои:10.1182 / кровь.V96.1.9. PMID  10891425. Архивировано из оригинал 29 апреля 2010 г.. Получено 31 марта 2007.
  82. ^ Гаффер А. (26 марта 2006 г.). «Иммунизация». Иммунология - Глава 14. Школа медицины Университета Южной Каролины. В архиве из оригинала 18 октября 2010 г.. Получено 6 июн 2007.
  83. ^ Urbaniak SJ, Greiss MA (март 2000 г.). «RhD гемолитическая болезнь плода и новорожденного». Отзывы о крови. 14 (1): 44–61. Дои:10.1054 / blre.1999.0123. PMID  10805260.
  84. ^ а б Фунг Ки Фунг К., Исон Э., Крейн Дж., Армсон А., Де Ла Ронд С., Фарин Д., Кинан-Линдсей Л., Ледук Л., Рид Дж. Дж., Аэрде СП, Уилсон Р. Д., Дэвис Дж., Десилетс В. А., Саммерс А., Уайатт П. , Молодой округ Колумбия (сентябрь 2003 г.). «Профилактика аллоиммунизации Rh». Журнал акушерства и гинекологии Канады. 25 (9): 765–73. Дои:10.1016 / S1701-2163 (16) 31006-4. PMID  12970812.
  85. ^ Тини М., Джуэлл У.Р., Камениш Г., Чилов Д., Гассманн М. (март 2002 г.). «Получение и применение антител к куриному яичному желтку». Сравнительная биохимия и физиология. Часть A, Молекулярная и интегративная физиология. 131 (3): 569–74. Дои:10.1016 / S1095-6433 (01) 00508-6. PMID  11867282.
  86. ^ Коул С.П., Кэмплинг Б.Г., Атлав Т., Козбор Д., Родер Дж.С. (июнь 1984 г.). «Моноклональные антитела человека». Молекулярная и клеточная биохимия. 62 (2): 109–20. Дои:10.1007 / BF00223301. PMID  6087121.
  87. ^ Кабир С (2002). «Очистка иммуноглобулинов с помощью аффинной хроматографии с использованием лигандов-миметиков протеина А, полученных комбинаторным химическим синтезом». Иммунологические исследования. 31 (3–4): 263–78. Дои:10.1081 / IMM-120016245. PMID  12472184.
  88. ^ а б Brehm-Stecher BF, Johnson EA (сентябрь 2004 г.). «Одноклеточная микробиология: инструменты, технологии и приложения». Обзоры микробиологии и молекулярной биологии. 68 (3): 538–59, содержание. Дои:10.1128 / MMBR.68.3.538-559.2004. ЧВК  515252. PMID  15353569.
  89. ^ Уильямс NE (2000). Процедуры иммунопреципитации. Методы клеточной биологии. 62. Сан-Диего, Калифорния: Academic Press. стр.449–53. Дои:10.1016 / S0091-679X (08) 61549-6. ISBN  978-0-12-544164-3. PMID  10503210.
  90. ^ Куриен Б.Т., Скофилд Р.Х. (апрель 2006 г.). «Вестерн-блоттинг». Методы. 38 (4): 283–93. Дои:10.1016 / j.ymeth.2005.11.007. PMID  16483794.
  91. ^ Сканциани Э. (1998). «Иммуногистохимическое окрашивание фиксированных тканей». Протоколы микоплазмы. Методы молекулярной биологии. 104. Тотова, Нью-Джерси: Humana Press. стр.133–40. Дои:10.1385/0-89603-525-5:133. ISBN  978-0-89603-525-6. PMID  9711649.
  92. ^ Рин DJ (1994). «Иммуноферментный анализ (ELISA)». Основные протоколы белков и пептидов. Методы молекулярной биологии. 32. С. 461–6. Дои:10.1385 / 0-89603-268-X: 461. ISBN  978-0-89603-268-2. ЧВК  2366430. PMID  7951745.
  93. ^ Калюжный А.Е. (2005). «Химия и биология анализа ELISPOT». Справочник ELISPOT. Методы молекулярной биологии. 302. С. 15–31. Дои:10.1385/1-59259-903-6:015. ISBN  978-1-59259-903-5. PMID  15937343.
  94. ^ Saper CB (декабрь 2005 г.). «Открытое письмо нашим читателям об использовании антител». Журнал сравнительной неврологии. 493 (4): 477–8. Дои:10.1002 / cne.20839. PMID  16304632.
  95. ^ «NOT-OD-16-011: Обеспечение строгости и прозрачности в заявках на исследовательские гранты NIH и AHRQ». grants.nih.gov.
  96. ^ Василевский, Николь А .; Brush, Matthew H .; Паддок, Холли; Понтинг, Лаура; Трипати, Шриджой Дж .; Ларокка, Грегори М .; Хендель, Мелисса А. (2 сентября 2013 г.). «О воспроизводимости науки: уникальное определение исследовательских ресурсов в биомедицинской литературе». PeerJ. 1: e148. Дои:10.7717 / peerj.148. ЧВК  3771067. PMID  24032093.
  97. ^ Bandrowski A, Brush M, Grethe JS, Haendel MA, Kennedy DN, Hill S, Hof PR, Martone ME, Pols M, Tan S, Washington N, Zudilova-Seinstra E, Vasilevsky N (2015). «Инициатива идентификации ресурсов: культурный сдвиг в издательском деле». F1000 Исследования. 4: 134. Дои:10.12688 / f1000research.6555.2. ЧВК  4648211. PMID  26594330.
  98. ^ Helsby, Matthew A .; Фенн, Джо Р .; Чалмерс, Эндрю Д. (23 августа 2013 г.). «Отчет об использовании антител в исследованиях: как повысить воспроизводимость экспериментов». F1000 Исследования. 2: 153. Дои:10.12688 / f1000research.2-153.v2. ЧВК  3829129. PMID  24358895.
  99. ^ «Реестр антител». antibodyregistry.org.
  100. ^ «Инициатива по идентификации ресурсов». FORCE11. 14 августа 2013 г.. Получено 18 апреля 2016.
  101. ^ В архиве 17 июля 2011 г. Wayback Machine
    WAM
  102. ^ Маркатили П., Рози А., Трамонтано А. (сентябрь 2008 г.). «СВИНЬИ: автоматическое предсказание структур антител». Биоинформатика. 24 (17): 1953–4. Дои:10.1093 / биоинформатика / btn341. PMID  18641403. В архиве из оригинала 26 ноября 2010 г.
    Прогнозирование структуры иммуноглобулинов (PIGS)
  103. ^ В архиве 19 июля 2011 г. Wayback Machine
    Розетта
  104. ^ Пак, Хёнсу. «Письменное описание проблем патентов на моноклональные антитела после Centocor v. Abbott». jolt.law.harvard.edu. Архивировано из оригинал 13 декабря 2014 г.. Получено 12 декабря 2014.
  105. ^ Adolf-Bryfogle, J; Калюжный, О; Кубиц, М; Weitzner, BD; Hu, X; Адачи, Й; Schief, WR; Данбрак, Р.Л. (апрель 2018 г.). «RosettaAntibodyDesign (RAbD): общая основа для вычислительного дизайна антител». PLOS вычислительная биология. 14 (4): e1006112. Bibcode:2018PLSCB..14E6112A. Дои:10.1371 / journal.pcbi.1006112. ЧВК  5942852. PMID  29702641.
  106. ^ Лапидот, GD; Баран, Д; Пшолла, GM; Норн, С; Алон, А; Тыка, доктор медицины; Флейшман, SJ (август 2015 г.). «AbDesign: алгоритм комбинаторного проектирования основной цепи, основанный на естественных конформациях и последовательностях». Белки. 83 (8): 1385–406. Дои:10.1002 / prot.24779. ЧВК  4881815. PMID  25670500.
  107. ^ Ли, Т; Pantazes, RJ; Маранас, CD (2014). «OptMAVEn - новая основа для разработки de novo моделей вариабельной области антитела, нацеленных на специфические антигенные эпитопы». PLOS ONE. 9 (8): e105954. Bibcode:2014PLoSO ... 9j5954L. Дои:10.1371 / journal.pone.0105954. ЧВК  4143332. PMID  25153121.
  108. ^ Фам, Виктория; Хензель, Уильям Дж .; Арнотт, Дэвид; Химовиц, Сара; Сандовал, Венди Н .; Чыонг, Бао-Тран; Лоуман, Генри; Лилль, Дженни Р. (2006). «De novo протеомное секвенирование моноклонального антитела против лиганда OX40». Аналитическая биохимия. 352 (1): 77–86. Дои:10.1016 / j.ab.2006.02.001. PMID  16545334.
  109. ^ Ма, Бин; Чжан, Кайчжун; Хендри, Кристофер; Лян, Чэнчжи; Ли, Мин; Доэрти-Кирби, Аманда; Лажуа, Жиль (2003). "PEAKS: Мощное программное обеспечение для секвенирования пептидов novo методом тандемной масс-спектрометрии". Быстрые коммуникации в масс-спектрометрии. 17 (20): 2337–2342. Bibcode:2003RCMS ... 17.2337M. Дои:10.1002 / RCM.1196. PMID  14558135.
  110. ^ Чжан, Цзин; Синь, Лэй; Шань, Баочжэнь; Чен, Вэйу; Се, Минцзе; Юэнь, Денис; Чжан, Веймин; Чжан, Цзефэн; Lajoie, Gilles A .; Ма, Бин (2012). "ПИКС ДБ: Де Ново Последовательность действий Поиск в базе данных для чувствительной и точной идентификации пептидов ». Молекулярная и клеточная протеомика. 11 (4): M111.010587. Дои:10.1074 / mcp.M111.010587. ЧВК  3322562. PMID  22186715.
  111. ^ Перкинс, Дэвид Н .; Паппин, Дэррил Дж. С .; Кризи, Дэвид М .; Коттрелл, Джон С. (1999). «Идентификация белков на основе вероятности путем поиска в базах данных последовательностей с использованием данных масс-спектрометрии». Электрофорез. 20 (18): 3551–3567. Дои:10.1002 / (SICI) 1522-2683 (19991201) 20:18 <3551 :: AID-ELPS3551> 3.0.CO; 2-2. PMID  10612281.
  112. ^ Бандейра, Нуно; Тан, Хайсю; Бафна, Винит; Певзнер, Павел (2004). «Секвенирование белка дробовиком с помощью сборки тандемных масс-спектров». Аналитическая химия. 76 (24): 7221–7233. Дои:10.1021 / ac0489162. PMID  15595863.
  113. ^ Лю, Сяовэнь; Хан, Юнхуа; Юэнь, Денис; Ма, Бин (2009). «Автоматическое секвенирование белков (Re) с помощью МС / МС и базы данных гомологов обеспечивает почти полный охват и точность». Биоинформатика. 25 (17): 2174–2180. Дои:10.1093 / биоинформатика / btp366. PMID  19535534.
  114. ^ Castellana, Natalie E .; Фам, Виктория; Арнотт, Дэвид; Лилль, Дженни Р .; Бафна, Винит (2010). «Шаблонная протеогеномика: секвенирование целых белков с использованием несовершенной базы данных». Молекулярная и клеточная протеомика. 9 (6): 1260–1270. Дои:10.1074 / mcp.M900504-MCP200. ЧВК  2877985. PMID  20164058.
  115. ^ Лю, Сяовэнь; Деккер, Леннард Дж. М .; Ву, Си; Vanduijn, Martijn M .; Луидер, Тео М .; Толич, Никола; Коу, Цян; Дворкин Михаил; Александрова, Соня; Вяткина Кира; Паша-Толич, Лиляна; Певзнер, Павел А. (2014). "De Novo Protein Sequencing путем комбинирования нисходящих и восходящих тандемных масс-спектров". Журнал протеомных исследований. 13 (7): 3241–3248. Дои:10.1021 / пр401300м. PMID  24874765.
  116. ^ Тран, Нгок Хиеу; Рахман, М. Зиаур; Он, Линь; Синь, Лэй; Шань, Баочжэнь; Ли, Мин (2016). «Полная сборка последовательностей моноклональных антител de Novo». Научные отчеты. 6: 31730. Bibcode:2016НатСР ... 631730Т. Дои:10.1038 / srep31730. ЧВК  4999880. PMID  27562653.
  117. ^ Гебауэр М., Скерра А. (июнь 2009 г.). «Сконструированные белковые каркасы в качестве терапевтических средств на основе антител нового поколения». Современное мнение в области химической биологии. 13 (3): 245–55. Дои:10.1016 / j.cbpa.2009.04.627. PMID  19501012.

внешняя ссылка