Генетический мониторинг - Genetic monitoring

Генетический мониторинг это использование молекулярные маркеры для (i) идентификации особей, видов или популяций, или (ii) для количественной оценки изменений в популяционно-генетический метрики (например, эффективная численность населения, генетическое разнообразие и размер популяции) с течением времени. Таким образом, генетический мониторинг может использоваться для обнаружения изменений в численности и / или разнообразии видов и стал важным инструментом как в сохранение и домашний скот управление. Типы молекулярных маркеров, используемых для мониторинга популяций, чаще всего митохондриальный, микроспутники или же однонуклеотидные полиморфизмы (SNP), в то время как в более ранних исследованиях также использовались аллозим данные. Разнообразие генов видов также признано важным биоразнообразие метрика для реализации Конвенция о биологическом разнообразии.[1]

Типы

Типы популяционных изменений, которые можно обнаружить с помощью генетического мониторинга, включают рост и сокращение популяции, распространение патогенов, адаптацию к изменениям окружающей среды, гибридизацию, интрогрессию и фрагментацию среды обитания. Большинство этих изменений отслеживаются с помощью "нейтрального" генетические маркеры (маркеры, для которых мутационные изменения не изменяют их адаптивные фитнес в популяции). Однако маркеры, показывающие адаптивные реакции на изменение окружающей среды, могут быть «не нейтральными» (например, мутационные изменения влияют на их относительную приспособленность в популяции).

Категории генетического мониторинга, определенные Schwartz et al. 2007 г.[2]

Были определены две широкие категории генетического мониторинга:[2] Категория I включает использование генетических маркеров в качестве идентификаторов отдельных лиц (Категория Ia), популяций и видов (Категория Ib) для традиционного мониторинга популяций. Категория II представляет использование генетических маркеров для мониторинга изменений популяционно-генетический параметры, которые включают оценки эффективная численность населения (Ne), генетическая изменчивость, смешение популяций, структура и миграция.

Примеры

Оценка параметров численности и жизненного цикла - Категория Ia

На индивидуальном уровне генетическая идентификация может позволить оценить численность популяции и темпы прироста популяции в рамках отметка-повторный захват модели. Обилие загадочных или неуловимых видов, за которыми трудно следить, можно оценить путем сбора неинвазивных биологических образцов в полевых условиях (например, перьев, помета или шерсти) и их использования для идентификации людей через микроспутник или же однонуклеотидный полиморфизм (SNP) генотипирование. Затем эту перепись особей можно использовать для оценки численности популяции с помощью анализа метки-повторной поимки. Например, этот метод использовался для мониторинга популяций медведь гризли,[3] кистохвостый рок валлаби,[4] бенгальский тигр[5] и снежный барс.[6] Темпы прироста населения являются продуктом темпов роста населения. набор персонала и выживание, и может быть оценена через открытые отметка-повторный захват модели. Например, ДНК из перьев, сброшенных восточный имперский орел показывает более низкую кумулятивную выживаемость с течением времени, чем у других долгоживущих хищников.[7]

  • Медведь гризли

  • Кистохвостый рок-валлаби

  • Снежный барс

  • Восточный имперский орел

Определение видов - Категория Ib

Использование молекулярно-генетических методов для идентификации видов может быть полезным по ряду причин. Идентификация видов в дикой природе может использоваться для обнаружения изменений в ареалах популяций или занятости участков, темпах гибридизация и появление и распространение патогены и инвазивные виды. Изменения в ареалах популяции были исследованы для Иберийская рысь[8] и Росомаха,[9] при мониторинге головорезная форель Вестслоп показывает широко распространенную текущую гибридизацию с интродуцированными радужная форель [10] (видеть вырезка ) и Канадская рысь -рысь гибриды были обнаружены на южной периферии современного ареала рыси.[11][12] Возникновение и распространение патогены можно отследить с помощью диагностических молекулярных анализов - например, для определения распространения вирус Западного Нила среди комаров на востоке США для определения вероятного географического происхождения инфекции[13] и определение локусов генов, связанных с восприимчивостью к паразитам в снежный баран.[14] Генетический мониторинг инвазивных видов представляет интерес с точки зрения сохранения и экономического развития, поскольку инвазии часто влияют на экологию и диапазон местных видов, а также могут создавать риски гибридизации (например, для копеподы,[15] утки,[16] Пёстрая сова и пятнистая сова,[17] и Лессепсский кролик[18]).

  • Иберийская рысь

  • Росомаха

  • Канадская рысь

  • Пятнистая сова

Идентификация видов также очень полезна при мониторинге. рыболовство и торговля дикими животными, где обычная визуальная идентификация разделанных или размороженных продуктов затруднена или невозможна.[19] Мониторинг торговли и потребления видов, представляющих интерес для сохранения, может осуществляться с помощью молекулярной амплификации и идентификации мяса или рыбы, полученных с рынков. Например, исследования генетического рынка использовались для выявления охраняемых видов и популяций китов (например, в северной части Тихого океана). Малый полосатик кит ) и виды дельфинов, появляющиеся на рынке.[20] Другие обзоры рыночной торговли были сосредоточены на ластоногие,[21] морские коньки[22] и акулы.[23] Такие обследования используются для обеспечения постоянного мониторинга количества и перемещения рыбных запасов и продуктов дикой природы через рынки, а также для выявления браконьерство или другая незаконная, несообщаемая или нерегулируемая (ННН) эксплуатация [19] (например. ННН рыбалка ).

Хотя первоначальные приложения были сосредоточены на идентификации видов и оценке популяций, рыночные обзоры также предоставляют возможность для ряда исследований молекулярной экологии, включая отлов-отлов, тесты распределения и моделирование популяций.[19] Эти разработки потенциально имеют отношение к категории II генетического мониторинга.

Мониторинг генетических параметров популяций - Категория II

Мониторинг популяционных изменений с помощью генетических средств может осуществляться ретроспективно, путем анализа "историческая" ДНК восстановлено из музейных архивов видов и сравнение с современной ДНК этого вида. Его также можно использовать в качестве инструмента для оценки текущих изменений статуса и устойчивости текущих популяций. Генетические показатели относительного изменения популяции включают изменения в разнообразии (например, гетерозиготность и аллельное богатство). Мониторинг относительных изменений численности населения с помощью этих показателей был проведен ретроспективно для Берингийский зубр,[24] Галапагосская черепаха,[25] охота,[26] Атлантический лосось,[27] северная щука,[28] Новозеландский окунь,[29] стальная форель,[30] курица из больших прерий,[31] Маврикийская пустельга[32] и Дельфин Гектора[33] и является предметом многих текущих исследований, в том числе датских и шведских форель населения.[34][35] Измерение абсолютных изменений населения (например, эффективная численность населения (Ne)) можно проводить путем измерения изменений частот популяционных аллелей («Ftemporal») или уровней нарушение равновесия по сцеплению с течением времени («LDNe»), в то время как изменение структуры потока генов между популяциями также можно отслеживать, оценивая различия в частотах аллелей между популяциями с течением времени. Предметы таких исследований включают: медведи гризли,[3][36][37] треска,[38] красный олень,[39] Леопардовые лягушки[40] и Баррель Медик.[41][42]

  • Галапагосская гигантская черепаха

  • Атлантический лосось

  • Дельфин Гектора

  • Леопардовая лягушка

Генетический мониторинг также все чаще используется в исследованиях, которые отслеживают изменения окружающей среды посредством изменения частоты адаптивно выбранных маркеров. Например, генетически контролируемая фотопериодическая реакция (время гибернации) москитов-кувшинок (Wyeomyia Smithii ) изменился в связи с более продолжительным вегетационным периодом для кувшинов, вызванным более теплой погодой.[43] Экспериментальный пшеница популяции, выросшие в контрастных средах на протяжении 12 поколений, обнаружили, что изменения в цветение время тесно коррелировали с регуляторными изменениями в одном гене, что указывает на путь генетической адаптации растений к изменению климата.[44][45]

Генетический мониторинг также полезен для наблюдения за текущим состоянием здоровья небольших перемещенных групп населения. Хорошие примеры этого найдены для Птицы Новой Зеландии, многие виды которых сильно пострадали от разрушения среды обитания и появления многочисленных хищников среди млекопитающих в прошлом веке и недавно стали частью программ переселения, которые переводят несколько особей-основателей в прибрежные районы, свободные от хищников. «Экологические» острова. Например. черная малиновка,[46] и какапо.[47]

  • Бочонок-медик

  • Пшеница обыкновенная

  • Комар кувшин

  • Какапо - новозеландский ночной попугай

Статус генетического мониторинга в науке

В феврале 2007 г. в Институте окружающей среды по адресу г. UCLA по теме «Эволюционные изменения в измененной человеком среде: международный саммит по претворению науки в политику». Это привело к выпуску специального выпуска журнала Молекулярная экология[48] организованы вокруг нашего понимания генетических эффектов по трем основным категориям: (i) нарушение среды обитания и изменение климата (ii) эксплуатация и разведение в неволе (iii) инвазивные виды и патогены.

В 2007 г. Рабочая группа по генетическому мониторингу был запущен при совместной поддержке NCEAS[49] и NESCent[50] для дальнейшего развития задействованных методов и предоставления общего руководства по мониторингу для политиков и менеджеров.[51]

В настоящее время эта тема освещена в нескольких хорошо известных учебниках, включая McComb et al. (2010) и Allendorf et al. (2013)

Генетический мониторинг в агентствах природных ресурсов

Много природное ископаемое агентства рассматривают генетический мониторинг как рентабельный и оправданный способ мониторинга популяций рыб и диких животных. Как таковые ученые в Геологическая служба США, Лесная служба США,[52] Служба национальных парков, и Национальная служба морского рыболовства разрабатывают новые методы и инструменты для использования генетического мониторинга и применяют такие инструменты в широком географическом масштабе.[2][36] В настоящее время у USFWS есть веб-сайт, который информирует менеджеров о том, как лучше всего использовать генетические инструменты для мониторинга (см. Ниже).

Смотрите также

Рекомендации

  1. ^ Веб-сайт Конвенции о биологическом разнообразии
  2. ^ а б c Schwartz, M.K .; и другие. (2007). «Генетический мониторинг как перспективный инструмент сохранения и управления» (PDF). Trends Ecol. Evol. 22 (1): 25–33. Дои:10.1016 / j.tree.2006.08.009. PMID  16962204.
  3. ^ а б Boulanger, J .; и другие. (2004). «Мониторинг популяционных тенденций и демографии медведей гризли с использованием методов повторной поимки ДНК в районе озера Оуикено в Британской Колумбии». Канадский журнал зоологии. 82 (8): 1267–1277. Дои:10.1139 / Z04-100.
  4. ^ Piggott, M.P .; и другие. (2006). «Оценка размера популяции находящихся под угрозой исчезновения колоний щеткохвостого каменного валлаби (Petrogale penicillata) с использованием фекальной ДНК». Мол. Ecol. 15 (1): 81–91. Дои:10.1111 / j.1365-294X.2005.02783.x. PMID  16367832.
  5. ^ Bhagavatula, J .; Сингх, Л. (2006). «Генотипирование образцов фекалий бенгальского тигра Panthera tigris tigris для оценки популяции: пилотное исследование». BMC Genet. 7: 48. Дои:10.1186/1471-2156-7-48. ЧВК  1636336. PMID  17044939.
  6. ^ Jaňecka, J.E .; и другие. (2008). «Мониторинг популяции снежного барса с использованием неинвазивного сбора образцов помета: пилотное исследование». Anim. Консервировать. 11 (5): 401–411. Дои:10.1111 / j.1469-1795.2008.00195.x.
  7. ^ Rudnick, J.A .; и другие. (2005). «Использование перьев естественного происхождения для индивидуальной идентификации, генетического анализа отцовства и мониторинга популяции находящейся под угрозой исчезновения популяции восточного имперского орла (Aquila heliaca) из Казахстана». Мол. Ecol. 14 (10): 2959–2967. Дои:10.1111 / j.1365-294X.2005.02641.x. PMID  16101766.
  8. ^ Fernández, N .; и другие. (2006). «Оценка ландшафта в области сохранения: молекулярный отбор проб и моделирование среды обитания иберийской рыси». Ecol. Приложение. 16 (3): 1037–1049. Дои:10.1890 / 1051-0761 (2006) 016 [1037: LEICMS] 2.0.CO; 2. PMID  16827001.
  9. ^ Schwartz, M.K .; и другие. (2007). «Выявление географической изоляции росомахи в Калифорнии с использованием исторической ДНК» (PDF). J. Wildl. Управлять. 71 (7): 2170–2179. Дои:10.2193/2007-026. S2CID  35396299.
  10. ^ Hitt, N.P .; и другие. (2003). «Распространение гибридизации между аборигенной головорезой форели западных склонов, Oncorhynchus clarki lewisi, и неродной радужной форелью, Oncorhynchus mykiss». Может. J. Fish. Акват. Наука. 60 (12): 1440–1451. Дои:10.1139 / F03-125.
  11. ^ Homyack, J.A .; и другие. (2008). «Гибриды канадской рыси и рыси (Lynx canadensis x L.rufus) на южной периферии ареала рыси в штатах Мэн, Миннесота и Нью-Брансуик» (PDF). Являюсь. Midl. Нат. 159: 504–508. Дои:10.1674 / 0003-0031 (2008) 159 [504: CLLCLR] 2.0.CO; 2.
  12. ^ Schwartz, M.K .; и другие. (2004). «Гибридизация канадской рыси и рыси: генетические результаты и последствия для управления» (PDF). Консерв. Genet. 5 (3): 349–355. Дои:10.1023 / B: COGE.0000031141.47148.8b. S2CID  16786563.
  13. ^ Килпатрик, A.M .; и другие. (2006). «Эпидемии вируса Западного Нила в Северной Америке вызваны изменениями в поведении комаров при кормлении». ПЛОС Биол. 4 (4): 606–610. Дои:10.1371 / journal.pbio.0040082. ЧВК  1382011. PMID  16494532.
  14. ^ Luikart, G .; и другие. (2008). «Вариации микросателлитных генов-кандидатов связаны с паразитизмом у диких снежных баранов» (PDF). Биол. Латыш. 4 (2): 228–231. Дои:10.1098 / rsbl.2007.0633. ЧВК  2429941. PMID  18270161.
  15. ^ Ли, C.E. (1999). «Быстрые и неоднократные вторжения рачка Eurytemora affinis в пресную воду» (PDF). Эволюция. 53 (5): 1423–1434. Дои:10.1111 / j.1558-5646.1999.tb05407.x. PMID  28565555.
  16. ^ Сейюм, S; Трингали, Мэриленд; Билефельд, Р.Р .; Feddersen, JC; Бенедикт-младший, RJ; Fanning, AT; Бартель, B; Curtis, C; Puchulutegui, C; Робертс, ACM; Вилланова-младший, ВЛ; Такер, EC (2012). «Пятьдесят девять микросателлитных маркеров для исследований гибридной классификации с участием эндемичной флоридской пятнистой утки (Anas fulvigula fulvigula) и инвазивных крякв (A. platyrhynchos)». Ресурсы по сохранению генетики. 4 (3): 681–687. Дои:10.1007 / s12686-012-9622-9. S2CID  16072813.
  17. ^ Haig, S.M .; и другие. (2004). «Генетическая идентификация пятнистых сов, полосатых сов и их гибридов: юридические последствия гибридной идентичности». Консерв. Биол. 18 (5): 1347–1357. Дои:10.1111 / j.1523-1739.2004.00206.x.
  18. ^ Azzurro, E .; и другие. (2006). «Генетика ранних стадий инвазии лесепсского зайца Siganus luridus» (PDF). J. Exp. Mar. Biol. Ecol. 333 (2): 190–201. Дои:10.1016 / j.jembe.2005.12.002.
  19. ^ а б c Бейкер, К.С. (2008). «Более точная мера рынка: молекулярная экология рыболовства и торговли дикими животными». Мол. Ecol. 17 (18): 3985–3998. Дои:10.1111 / j.1365-294X.2008.03867.x. PMID  18643915.
  20. ^ Baker, C.S .; и другие. (2007). «Оценка количества китов, вступающих в промысел, с использованием анализа ДНК и анализа рыночных продуктов». Мол. Ecol. 16 (13): 2617–2626. Дои:10.1111 / j.1365-294X.2007.03317.x. PMID  17594434.
  21. ^ Малик, С .; и другие. (1997). «Пенисы ластоногих в торговле: молекулярно-генетическое исследование». Консерв. Биол. 11 (6): 1365–1374. Дои:10.1046 / j.1523-1739.1997.96125.x.
  22. ^ Sanders, J.G .; и другие. (2008). «Кончик хвоста: молекулярная идентификация морских коньков для продажи в аптечных и сувенирных магазинах Калифорнии». Консерв. Genet. 9: 65–71. Дои:10.1007 / s10592-007-9308-0. S2CID  15874239.
  23. ^ Clarke, S.C .; и другие. (2006). «Определение видового состава и доли акул на рынке акульих плавников в Гонконге на основе молекулярной генетики и торговых записей». Консерв. Биол. 20 (1): 201–211. Дои:10.1111 / j.1523-1739.2005.00247.x. PMID  16909673.
  24. ^ Шапиро, Б .; и другие. (2004). «Взлет и падение берингийского степного зубра». Наука. 306 (5701): 1561–1565. Bibcode:2004Научный ... 306.1561S. Дои:10.1126 / science.1101074. PMID  15567864. S2CID  27134675.
  25. ^ Poulakakis, N .; и другие. (2008). «Исторический анализ ДНК показывает живых потомков вымершего вида галапагосских черепах» (PDF). Proc. Natl. Акад. Sci. Соединенные Штаты Америки. 105 (40): 15464–15469. Дои:10.1073 / pnas.0805340105. ЧВК  2563078. PMID  18809928.
  26. ^ Hansen, M.M .; и другие. (2006). «Под водой, но не из поля зрения: генетический мониторинг эффективной численности популяции находящихся под угрозой исчезновения в Северном море охотников (Coregonus oxyrhynchus)». Может. J. Fish. Акват. Наука. 63 (4): 780–787. Дои:10.1139 / F05-260.
  27. ^ Nielsen, E.E .; и другие. (1999). «Генетическая изменчивость во времени и пространстве: микросателлитный анализ вымерших и современных популяций атлантического лосося». Эволюция. 53 (1): 261–268. Дои:10.1111 / j.1558-5646.1999.tb05351.x. PMID  28565198.
  28. ^ Miller, L.M .; Капусцинский, А. (1997). «Исторический анализ генетической изменчивости показывает низкий эффективный размер популяции северной щуки (Esox lucius)» (PDF). Генетика. 147 (3): 1249–1258. ЧВК  1208248. PMID  9383067.
  29. ^ Hauser, L .; и другие. (2002). «Утрата микросателлитного разнообразия и низкий эффективный размер популяции в чрезмерно эксплуатируемой популяции новозеландского луциана (Pagrus auratus)». Proc. Natl. Акад. Sci. Соединенные Штаты Америки. 99 (18): 11742–11747. Bibcode:2002PNAS ... 9911742H. Дои:10.1073 / pnas.172242899. ЧВК  129339. PMID  12185245.
  30. ^ Heath, D.D .; и другие. (2002). «Временные изменения в генетической структуре и эффективный размер популяции стальной форели (Oncorhynchus mykiss)». Мол. Ecol. 11 (2): 197–214. Дои:10.1046 / j.1365-294X.2002.01434.x. PMID  11856422.
  31. ^ Беллинджер, М.Р. (2003). «Потеря генетической изменчивости у цыплят больших прерий после сокращения популяции в Висконсине, США». Консерв. Биол. 17 (3): 717–724. Дои:10.1046 / j.1523-1739.2003.01581.x.
  32. ^ Грумбридж, Дж. Дж .; и другие. (2000). "'Призрачные аллели маврикийской пустельги ». Природа. 403 (6770): 616. Дои:10.1038/35001148. PMID  10688188. S2CID  4336347.
  33. ^ Pichler, F.B .; Бейкер, К.С. (2000). «Утрата генетического разнообразия эндемичного дельфина Гектора из-за смертности, связанной с рыболовством». Proc. R. Soc. Лондон. B. 267 (1438): 97–102. Дои:10.1098 / rspb.2000.0972. ЧВК  1690489. PMID  10670959.
  34. ^ Østergaard, S .; и другие. (2003). «Долгосрочные временные изменения генетического состава в популяциях кумжи (Salmo trutta L.), обитающих в нестабильной среде». Мол. Ecol. 12 (11): 3123–3135. Дои:10.1046 / j.1365-294X.2003.01976.x. PMID  14629391.
  35. ^ Ладони.; и другие. (2003). «Эффективный размер популяции и временные генетические изменения у водной кумжи (Salmo trutta, L.)». Консерв. Genet. 4 (3): 249–264. Дои:10.1023 / А: 1024064913094. S2CID  22607075.
  36. ^ а б Kendall, K.C .; и другие. (2009). «Демография и генетическая структура выздоравливающей популяции медведя гризли». J. Wildl. Управлять. 73: 3–17. Дои:10.2193/2008-330. S2CID  52249993.
  37. ^ Проктор, М.Ф .; и другие. (2005). «Генетический анализ показывает демографическую фрагментацию медведей гризли, дающую уязвимо небольшие популяции». Proc. R. Soc. Лондон. B. 272 (1579): 2409–2416. Дои:10.1098 / rspb.2005.3246. ЧВК  1559960. PMID  16243699.
  38. ^ Poulsen, N.A .; и другие. (2006). «Долгосрочная стабильность и эффективная численность популяции трески (Gadus morhua) в Северном и Балтийском море». Мол. Ecol. 15 (2): 321–331. Дои:10.1111 / j.1365-294X.2005.02777.x. PMID  16448403.
  39. ^ Nussey, D.H .; и другие. (2005). «Быстро уменьшающаяся мелкомасштабная пространственная генетическая структура самок благородных оленей» (PDF). Мол. Ecol. 14 (11): 3395–3405. Дои:10.1111 / j.1365-294X.2005.02692.x. PMID  16156811.
  40. ^ Hoffman, E.A .; Блуэн, М. (2004). «Исторические данные опровергают недавнее сокращение ареала как причину низкого генетического разнообразия в изолированных популяциях лягушек» (PDF). Мол. Ecol. 13 (2): 271–276. Дои:10.1046 / j.1365-294X.2003.02057.x. PMID  14717886.
  41. ^ Боннин, I .; и другие. (2001). «Пространственные эффекты и редкие случаи ауткроссинга в Medicago truncatula (Fabaceae)». Мол. Ecol. 10 (6): 1371–1383. Дои:10.1046 / j.1365-294X.2001.01278.x. PMID  11412361.
  42. ^ Siol, M .; и другие. (2007). «Эффективный размер популяции, связанный с самооплодотворением: уроки из временных изменений частот аллелей в самоопыляющемся однолетнем Medicago truncatula». J. Evol. Биол. 20 (6): 2349–2360. Дои:10.1111 / j.1420-9101.2007.01409.x. PMID  17956396.
  43. ^ Bradshaw, W.E .; Хольцапфель, К. (2001). «Генетический сдвиг фотопериодической реакции коррелирует с глобальным потеплением». Proc. Natl. Акад. Sci. Соединенные Штаты Америки. 98 (25): 14509–14511. Дои:10.1073 / pnas.241391498. ЧВК  64712. PMID  11698659.
  44. ^ Rhoné, B .; и другие. (2008). «Понимание генетических основ климатической адаптации в экспериментально развивающихся популяциях пшеницы». Мол. Ecol. 17 (3): 930–943. Дои:10.1111 / j.1365-294X.2007.03619.x. PMID  18194164.
  45. ^ Страсбург, J.L .; Гросс, Б. (2008). «Адаптация к озимой пшенице: долгосрочное исследование отслеживает параллельные фенотипические и генетические изменения в трех экспериментальных популяциях пшеницы». Мол. Ecol. 17 (3): 716–718. Дои:10.1111 / j.1365-294X.2007.03639.x. PMID  18194165.
  46. ^ Ardern, S.L .; Ламберт, Д. (1997). «Является ли черная малиновка генетической опасностью?». Мол. Ecol. 6 (1): 21–28. Дои:10.1046 / j.1365-294X.1997.00147.x.
  47. ^ Miller, H.C .; и другие. (2003). «Профилирование минисателлитной ДНК позволяет выявить клоны и происхождение у исчезающих видов какапо (Strigops habroptilus), несмотря на низкую вариабельность микросателлитной ДНК». Консерв. Genet. 4 (3): 265–274. Дои:10.1023 / А: 1024037601708. S2CID  8877634.
  48. ^ Отчет о результатах и ​​рекомендациях Международного саммита по эволюционным изменениям в среде, измененной человеком
  49. ^ Национальный центр экологического анализа и синтеза
  50. ^ Национальный центр эволюционного синтеза
  51. ^ Генетический мониторинг: разработка инструментов для сохранения и управления
  52. ^ Лаборатория генетики дикой природы Исследовательской станции Скалистых гор

внешняя ссылка