Оксидазный тест - Oxidase test

DMPD
TMPD

В оксидазный тест это тест, используемый в микробиология чтобы определить, есть ли бактерия производит определенные цитохром с оксидазы.[1] В нем используются диски, пропитанные реагент Такие как N, N, N ′, N ′-тетраметил-п-фенилендиамин (TMPD) или N, N-диметил-п-фенилендиамин (DMPD ), который также является редокс индикатор. Реагент темно-синий до бордовый цвет при окислении и бесцветный при восстановлении. Оксидаза-положительные бактерии обладают цитохромоксидазой или индофенолоксидазой (железосодержащим гемопротеином).[2] Оба они катализируют перенос электронов от донорных соединений (НАДН) к акцепторам электронов (обычно к кислороду). Тестовый реагент, дигидрохлорид TMPD, действует как искусственный донор электронов для фермента оксидазы. Окисленный реагент образует окрашенное соединение индофеноловый синий. Система цитохрома обычно присутствует только в аэробных организмах, которые способны использовать кислород в качестве конечного акцептора электронов. Конечным продуктом этого метаболизма является вода или перекись водорода (расщепляется на каталаза ).[3]

Классификация

Штаммы могут быть либо оксидазо-положительными (OX +), либо оксидазо-отрицательными (OX-).

OX +

OX + обычно означает, что бактерия содержит цитохром с оксидазу (также известную как. Комплекс IV) и поэтому может использовать кислород для производства энергии путем преобразования O2 к H2О2 или H2O с цепь переноса электронов.

В Pseudomonadaceae обычно OX +[нужна цитата ]

В Грамотрицательный диплококки Neisseria и Moraxella оксидаза-положительные.[4]

Многие грамотрицательные палочки с изогнутой спиралью также являются оксидазоположительными, в том числе Helicobacter pylori, Холерный вибрион, и Campylobacter jejuni.

Переменная оксидазы

Легионелла пневмофила может быть оксидазоположительным [5].

OX−

OX- обычно означает, что бактерия не содержит цитохром с оксидазу и, следовательно, не может использовать кислород для производства энергии с цепь переноса электронов или использует другой цитохром для переноса электронов на кислород.

Энтеробактерии обычно OX−.[6]

Процедуры

  1. Смочите каждый диск примерно четырьмя петлями для посева деионизированной воды.
  2. Используйте петлю для асептического переноса на диск большой массы чистых бактерий.
  3. Наблюдайте за диском до трех минут. Если область инокуляции изменится с темно-синего на темно-бордовый или почти на черный, то результат положительный. Если изменение цвета не происходит в течение трех минут, результат отрицательный.

В качестве альтернативы живые бактерии, культивируемые на триптиказо-соевый агар тарелки могут быть приготовлены с использованием стерильная техника с посевом в одну линию. Засеянные чашки инкубируют при 37 ° C в течение 24–48 часов для образования колоний. Следует использовать свежие бактериальные препараты. После того, как колонии вырастут на среде, на поверхность каждого тестируемого организма добавляют 2-3 капли реагента DMPD.

  • Положительный результат теста (OX +) приведет к изменению цвета с фиолетового на пурпурный в течение 10–30 секунд.
  • Отрицательный тест (OX-) приведет к бледно-розовому цвету или отсутствию окраски.

Рекомендации

  1. ^ «Оксидазный тест и модифицированный оксидазный тест». Архивировано из оригинал на 2018-02-23. Получено 2008-11-07.
  2. ^ . Айзенберг HD, редактор. Справочник по процедурам клинической микробиологии. Американское общество микробиологии; 2004. с. 3.3.2-3.3.2.13
  3. ^ Макфаддин Дж. Ф., редактор. Биохимические тесты для идентификации медицинских бактерий. 3-е изд. Филадельфия: Липпинкотт Уильямс и Уилкинс; 2000. с. 363-7
  4. ^ С. Т., Коуэн; Сталь, К.Дж. (1993). Руководство Коуэна и Стила по идентификации медицинских бактерий (3-е изд.). Кембридж: Издательство Кембриджского университета. ISBN  9780511527104.
  5. ^ "УК СМИ" (PDF).
  6. ^ Фермер Дж. Дж., Фаннинг Г. Р., Хантли-Картер Г. П. и др. (Май 1981 г.). «Kluyvera, новый (переопределенный) род в семействе Enterobacteriaceae: идентификация Kluyvera ascorbata sp. Nov. И Kluyvera cryocrescens sp. Nov. В клинических образцах». J. Clin. Микробиол. 13 (5): 919–33. ЧВК  273917. PMID  7240403.

Больше ссылок:

Американское общество микробиологии, протокол теста на оксидазу. 2013. ASM MicrobeLibrary, 1–9.

Ченг В. Дж., Лин С. В., Ву Т. Г., Су С. С., Се М. С. 2013. Калибровка тест-полосок на основе глюкозооксидазы для измерения капиллярной крови с образцами венозной крови, насыщенной кислородом. Clinica Chimica Acta. 415, 152–157.

Corchia L, Hubault R, Quinquenel B, N'Guyen. 2015. Быстро развивающийся конъюнктивит, вызванный Pasteurella Multocida, возникающий после прямой инокуляции капельками животных на хозяина с ослабленным иммунитетом. BMC Ophthalmology 15.1, 21.

Флок С., Аларкон-Гутьеррес Э., Крике С. 2007. Анализ ABTS активности фенолоксидазы в почве. Журнал микробиологических методов. 71, 319–324.

Габи В. Л., Хэдли С. 1957. Практический лабораторный тест для идентификации синегнойной палочки. Журнал бактериологии. 74, 356–358.

Гилани М., Мунир Т., Латиф М., Гилани М., Рехман С., Ансари М., Хафиз А., Наджиб С., Саад Н. 2015. Эффективность дорипенема in vitro против Pseudomonas Aeruginosa и Acinetobacter Baumannii с помощью E-теста. Журнал Колледжа врачей и хирургов Пакистан 25, 726-729.

Кусс С., Таннер Е. Л., Ордовас-Монтанес М., Комптон Р. Г. 2017. Электрохимическое распознавание и количественная оценка экспрессии цитохрома С в аэробах / анаэробах с использованием ,, ',' - тетраметил - фенилендиамина (TMPD). Химическая наука 8.11, 7682-7688. Интернет.

Иванова Н.В., Землак Т.С., Ханнер Р.Х., Хеберт П.Д. Н. 2007. Универсальные коктейли праймеров для штрих-кодирования ДНК рыб. Заметки о молекулярной экологии. 7, 544–54.

Принц С. 2009. Практическое руководство по медицинской микробиологии (Jaypee Brothers Medical Publishers (P) Ltd.) 112–112.

Шилдс П., Кэткарт Л. 2013. Протокол теста на оксидазу - Библиотека. Американское общество микробиологов, ASM MicrobeLibrary, 1–5.

Стил К. Дж. 1961. Оксидазная реакция как таксономический инструмент. Журнал общей микробиологии. 25, 297–306.

Zanderigo F et al. 2018. [11C] Связывание гармина с моноаминоксидазой A головного мозга: свойства повторного тестирования и неинвазивная количественная оценка. Молекулярная визуализация и биология. 20, 667–681.

внешняя ссылка