RoGFP - RoGFP

Чувствительность к восстановлению-окислению зеленый флуоресцентный белок (roGFP) это редокс чувствительный биосенсор. Два цистеины были введены в структуру бета-ствола GFP. Степень окисления (восстановленный дитиол или окисленный дисульфид ) разработанных тиолов определяет флуоресценция свойства датчика.[1] Первоначально были представлены разные версии roGFP, чтобы позволить in vivo изображение уменьшающих отсеков, таких как цитозоль (roGFP2). В цистеины представленный на аминокислота позиции 147 и 204 дали наиболее надежные результаты.[2] roGFP2 преимущественно взаимодействует с глутаредоксины и поэтому сообщает сотовый глутатион окислительно-восстановительный потенциал.[3] Специфика roGFP2 для глутатион дополнительно увеличивается путем связывания с человеческим глутаредоксином 1 (Grx1).[4]Путем экспрессии сенсоров слияния Grx1-roGFP в интересующем организме и / или нацеливания на белок в сотовый отсек можно измерить глутатион окислительно-восстановительный потенциал в конкретном клеточном отделении в режиме реального времени и, следовательно, обеспечивает значительные преимущества по сравнению с другими инвазивными статическими методами, например ВЭЖХ.

Кроме того, roGFP используются для исследования топологии ER белков или для анализа ROS производственная мощность химикаты.[5][6]

Смотрите также

Рекомендации

  1. ^ Hanson GT; Aggeler R; Оглсби Д; Cannon M; Капальди Р.А.; Цзянь Р.Ю .; Ремингтон SJ (2004). «Исследование окислительно-восстановительного потенциала митохондрий с помощью индикаторов окислительно-восстановительного потенциала зеленых флуоресцентных белков». J Biol Chem. 279 (13): 13044–53. Дои:10.1074 / jbc.M312846200. PMID  14722062.
  2. ^ Schwarzlander M .; Фрикер; Доктор медицины, Мюллер; К., Марти; Л., Брач; Т., Новак; J., Sweetlove; L.J., Hell, R .; и другие. (2008). «Конфокальная визуализация окислительно-восстановительного потенциала глутатиона в живых клетках растений». J Microsc. 231 (2): 299–316. Дои:10.1111 / j.1365-2818.2008.02030.x. PMID  18778428. S2CID  28455264.CS1 maint: несколько имен: список авторов (связь)
  3. ^ Meyer, A.J .; Brach, T .; Марти, L .; Kreye, S .; Rouhier, N .; Жако, Дж. П. и Ад, Р. (2007). «Редокс-чувствительный GFP в Arabidopsis thaliana является количественным биосенсором окислительно-восстановительного потенциала клеточного окислительно-восстановительного буфера глутатиона». Завод J. 52 (5): 973–86. Дои:10.1111 / j.1365-313X.2007.03280.x. PMID  17892447.
  4. ^ Gutscher, M .; Pauleau, A.L .; Марти, L .; Brach, T .; Wabnitz, G.H .; Samstag, Y .; Мейер, А.Дж. И Дик, Т. (2008). «Визуализация внутриклеточного окислительно-восстановительного потенциала глутатиона в реальном времени». Нат методы. 5 (6): 553–559. Дои:10.1038 / NMETH.1212. PMID  18469822. S2CID  8947388.
  5. ^ Brach T; Сойк С; Müller C; Hinz G; Ад R; Brandizzi F; Мейер AJ (2009). «Неинвазивный анализ топологии мембранных белков секреторного пути». Завод J. 57 (3): 534–41. Дои:10.1111 / j.1365-313X.2008.03704.x. PMID  18939964.
  6. ^ Schwarzländer M; Fricker MD; Sweetlove LJ (2009). «Мониторинг окислительно-восстановительного состояния митохондрий растений in vivo: влияние ингибиторов дыхания, абиотический стресс и оценка восстановления после окислительного воздействия». Biochim Biophys Acta. 1787 (5): 468–75. Дои:10.1016 / j.bbabio.2009.01.020. PMID  19366606.