Проникающий в клетки пептид - Cell-penetrating peptide

Проникающие в клетки пептиды (CPP) короткие пептиды которые облегчают клеточное поглощение и поглощение молекул в диапазоне от наноразмер частицы к мелким химические соединения к большим фрагментам ДНК. «Груз» связан с пептидами либо через химическую связь через ковалентные связи или через нековалентные взаимодействия.

CPP доставляют груз в ячейки, обычно через эндоцитоз, для использования в исследованиях и медицине. Текущее использование ограничено отсутствием клеточной специфичности в доставке грузов, опосредованной CPP, и недостаточным пониманием способов их поглощения. Другие механизмы доставки, которые были разработаны, включают: CellSqueeze и электропорация.[нужна цитата ]

CPP обычно имеют аминокислота состав, который либо содержит большое относительное количество положительно заряженных аминокислот, таких как лизин или же аргинин или имеет последовательности, содержащие чередующийся образец полярный, заряженные аминокислоты и неполярный, гидрофобный аминокислоты. Эти два типа структур называются поликатионный или же амфипатический, соответственно. Третий класс CPP - это гидрофобные пептиды, содержащие только неполярный остатки с низким чистым зарядом или гидрофобные аминокислотные группы, которые имеют решающее значение для клеточного поглощения.[1][2]

Трансактивирующий активатор транскрипции (ТАТ), от вирус иммунодефицита человека 1 (ВИЧ-1), был первым обнаруженным CPP. В 1988 году две лаборатории независимо друг от друга обнаружили, что ТАТ может эффективно поглощаться из окружающей среды многочисленными типами клеток в культура.[3] С тех пор количество известных CPP значительно расширилось, и низкомолекулярные синтетические аналоги с более эффективным белком трансдукция свойства были созданы.[4]

Недавнее открытие показало, что Папилломавирусы, такой как вирус папилломы человека, используйте CPP для проникновения внутриклеточная мембрана для запуска ретроградной доставки вирусной единицы к ядру.[5]

Механизмы мембранной транслокации

Проникающие в клетки пептиды имеют разные размеры, аминокислотные последовательности и заряды, но все CPP имеют одну отличительную характеристику, а именно способность перемещать плазматическую мембрану и облегчать доставку различных молекулярных грузов в цитоплазму или органеллу. Не существует реального консенсуса относительно механизма транслокации CPP, но теории транслокации CPP можно разделить на три основных механизма входа: прямое проникновение в мембрану, вход, опосредованный эндоцитозом, и транслокация посредством образования переходной структуры. Трансдукция CPP - это область постоянных исследований. [6][7]

Проникающие в клетки пептиды (CPP) способны транспортировать различные типы грузовых молекул через плазматическую мембрану; таким образом, они действуют как молекулярные средства доставки. Они находят множество применений в медицине в качестве агентов доставки лекарств при лечении различных заболеваний, включая рак и ингибиторы вирусов, а также в качестве контрастных агентов для мечения клеток. Примеры последних включают в себя роль перевозчика для GFP, Контрастные вещества для МРТ или квантовые точки. [8]

Прямое проникновение

Пример перемещения груза прямым проникновением

Большинство ранних исследований предполагают, что перемещение поликатионных CPP через биологические мембраны происходит посредством энергонезависимого клеточного процесса. Считалось, что транслокация может прогрессировать при 4 ° C и, скорее всего, связана с прямым электростатический взаимодействие с отрицательно заряженными фосфолипиды. Исследователи предложили несколько моделей в попытках выяснить биофизический механизм этого энергонезависимого процесса. Хотя CPP способствуют прямому воздействию на биофизические свойства чистых мембранных систем, идентификация артефактов фиксации при использовании CPP с флуоресцентными метками вызвала переоценку механизмов импорта CPP.[9] Эти исследования способствовали эндоцитозу как пути транслокации. Для ТАТ был предложен пример прямого проникновения. Первым шагом в этой предложенной модели является взаимодействие с развернутым гибридным белком (ТАТ) и мембраной посредством электростатических взаимодействий, которые разрушают мембрану настолько, чтобы позволить гибридному белку пересечь мембрану. После интернализации слитый белок перестраивается благодаря системе шаперонов. Этот механизм не был согласован, и были предложены другие механизмы, включающие клатрин-зависимый эндоцитоз.[10][11]

Было предложено много более подробных методов поглощения CPP, включая временное образование пор.[12][13][14][15][16] Этот механизм включает сильные взаимодействия между проникающими в клетку пептидами и фосфатными группами на обеих сторонах липидного бислоя, вставку положительно заряженных боковых цепей аргинина, которые зародышируют образование временной поры, с последующей транслокацией проникающих в клетку пептидов посредством диффундирует по поверхности поры. Этот механизм объясняет, как ключевые ингредиенты, такие как взаимодействие между пептидами, большой положительный заряд и, в частности, группы гуанидиния, вносят вклад в поглощение. Предлагаемый механизм также иллюстрирует важность мембранных колебаний. Действительно, механизмы, которые включают большие колебания мембранной структуры, такие как переходные поры и встраивание заряженных боковых цепей аминокислот, могут быть общими и, возможно, центральными для функций многих функций мембранных белков.

Эндоцитоз-опосредованная транслокация

Типы эндоцитоза, опосредованного проникающими в клетку пептидами

Эндоцитоз это второй механизм, ответственный за интернализацию клеток. Эндоцитоз - это процесс клеточного проглатывание с помощью которого плазматическая мембрана складывается внутрь, чтобы доставить вещества в клетку. Во время этого процесса клетки поглощают материал снаружи клетки, впитывая его своей клеточной мембраной. Классификация клеточной локализации с использованием флуоресценции или ингибиторов эндоцитоза является основой большинства исследований. Однако процедура, используемая во время подготовки этих образцов, создает сомнительную информацию об эндоцитозе. Более того, исследования показывают, что проникновение пенетратина в клетки путем эндоцитоза является энергозависимым процессом. Этот процесс инициируется полиаргининами, взаимодействующими с гепарансульфаты которые способствуют эндоцитозу. Исследования показали, что ТАТ интернализируется через форму эндоцитоза, называемую макропиноцитозом.[17][18]

Исследования показали, что эндоцитоз участвует в интернализации CPP, но было высказано предположение, что разные механизмы могут происходить одновременно. Это установлено поведением пенетратина и транспортана, при котором транслокация мембраны и эндоцитоз происходят одновременно.[19][20]

Транслокация через образование преходящей структуры

Транслокация, опосредованная образованием перевернутых мицелл

Третий механизм, ответственный за транслокацию, основан на образовании инвертированной мицеллы. Инвертированные мицеллы представляют собой агрегаты коллоидных поверхностно-активных веществ, в которых полярные группы сосредоточены внутри, а липофильные группы выходят наружу в растворитель. Согласно этой модели, димер пенетрата соединяется с отрицательно заряженными фосфолипидами, таким образом вызывая образование перевернутой мицеллы внутри липидного бислоя. Структура перевернутых мицелл позволяет пептиду оставаться в гидрофильной среде.[21][22] [23] Тем не менее, этот механизм все еще является предметом обсуждения, потому что распределение пенетратина между внутренней и внешней мембраной несимметрично. Это несимметричное распределение создает электрическое поле, которое было хорошо установлено. Увеличение количества пептида на внешних створках приводит к тому, что электрическое поле достигает критического значения, которое может вызвать событие, подобное электропорации.

Последний механизм подразумевает, что интернализация происходит пептидами, которые принадлежат к семейству первичных амфипатических пептидов, MPG и Pep-1. На основе физико-химических исследований были предложены две очень похожие модели, состоящие из кругового дихроизма, инфракрасного преобразования Фурье и спектроскопии ядерного магнитного резонанса. Эти модели связаны с электрофизиологическими измерениями и исследованиями, которые могут имитировать модельные мембраны, такие как монослой на границе раздела воздух-вода. Структура, порождающая поры, является основным отличием предлагаемой модели MPG от модели Pep-1. В модели MPG пора образована структурой b-цилиндра, тогда как Pep-1 связан со спиралями. Кроме того, в обеих моделях были обнаружены сильные гидрофобные фосфолипид-пептидные взаимодействия.[24][25] В двух моделях пептидов складчатые части молекулы-носителя коррелируют с гидрофобным доменом, хотя остальная часть молекулы остается неструктурированной.[26]

Транслокация, опосредованная переходной структурой

Транслокация, облегчаемая проникающими в клетки пептидами, является предметом больших дискуссий. Было представлено доказательство того, что транслокация может использовать несколько различных путей для захвата. Кроме того, механизм транслокации может зависеть от того, является ли пептид свободным или прикрепленным к грузу. Количественное поглощение свободного или связанного с грузом СРР может сильно различаться, но исследования не доказали, является ли это изменение результатом эффективности транслокации или различием в путях транслокации. Вероятно, что результаты показывают, что несколько механизмов CPP конкурируют и что несколько путей способствуют интернализации CPP.[27]

Приложения

CPP-опосредованная доставка нуклеиновых кислот

Макромолекулы на основе нуклеиновых кислот, такие как миРНК, антисмысловой олигонуклеотид, ДНК-приманка и плазмида, были реализованы как многообещающие биологические и фармакологические терапевтические средства для регуляции экспрессии генов.[28][29][30] Однако, в отличие от других низкомолекулярных лекарств, их разработка и применение ограничены высокой молекулярной массой и отрицательными зарядами, что приводит к низкой эффективности поглощения и низкому клеточному трафику. Чтобы преодолеть эти проблемы, было разработано несколько различных систем доставки, включая конъюгат СРР-нуклеиновая кислота, который является очень мощным инструментом.

Образование комплексов СРР-нуклеиновая кислота

Ковалентная связь между CPP и нуклеиновой кислотой
Ковалентная связь между CPP и нуклеиновой кислотой

Большинство комплексов СРР-нуклеиновая кислота, которые были предложены до сих пор, образуются посредством ковалентного связывания. Ряд комплексов СРР-нуклеиновая кислота был синтезирован с помощью различных химических процессов, которые являются либо стабильными, либо расщепляемыми связями. И наиболее широко используемый метод в публикации - это расщепление дисульфидных связей посредством полного ступенчатого твердофазного синтеза или связывания фрагментов в растворе или твердой фазе.[31] Также были разработаны некоторые другие стратегии, такие как стабильная амидная, тиазолидиновая, оксимная и гидразиновая связь.[32] Однако эти методы ковалентного связывания ограничены опасением, что синтетическая ковалентная связь между СРР и нуклеиновой кислотой может изменить биологическую активность последней.[33] Таким образом, новая нековалентная стратегия, не требующая химической модификации короткими амфипатическими CPP, такими как MPG и Pep-1 в качестве носителей, была успешно применена для доставки грузов.[34][35] Эти нековалентные конъюгаты образуются посредством электростатических или гидрофобных взаимодействий. С помощью этого метода можно эффективно доставлять грузы, такие как нуклеиновые кислоты и белки, при сохранении полной биологической активности.

Для доставки миРНК

Короткая интерферирующая РНК (siRNA) - это очень мощный новый инструмент, который может мешать экспрессии определенного гена болезни и заставлять его замолчать.[36] Чтобы улучшить клеточное поглощение миРНК, были применены стратегии CPP для облегчения доставки миРНК в клетки через ковалентные или нековалентные связи. В одном исследовании siRNA ковалентно связана с транспортаном и пенетратином посредством дисульфидной связи на 5'-конце смысловых цепей siRNA с целью нацеливания на репортеры мРНК люциферазы или eGFP.[37] В другом исследовании конъюгат ТАТ-миРНК через стабильную тиомалеимидную связь на 3'-конце миРНК был доставлен в клетки HeLa для подавления гена eGFP.[38]

Однако нековалентные стратегии, по-видимому, лучше подходят для доставки siRNA с более значительным биологическим ответом. В одном исследовании комплексы MPG / siRNA, сформированные с помощью стабильной нековалентной стратегии, показали успешное введение siRNA в культивируемые клетки и индуцировали устойчивую регуляцию целевой мРНК.[35] Кроме того, комплексы MPG / siRNA также применялись для доставки siRNA. in vivo в бластоциты мышей для регуляции генов.[39] MPG образует высокостабильные комплексы с siRNA с низкой скоростью разложения и может быть легко функционализирован для специфического нацеливания, что является основным преимуществом по сравнению с технологией ковалентного CPP.

Новый дизайн субстрата для доставки siRNA

Доставка клеток миРНК представляет собой ценный инструмент для лечения онкологических заболеваний, вирусных инфекций и генетических нарушений. Однако классические стратегии включают ковалентное связывание молекул груза и CPP, что не обеспечивает эффективной защиты молекул siRNA. in vivo; таким образом, результаты, представленные в литературе, не соответствуют друг другу. Недавно были успешно описаны нековалентные стратегии. О вторичных амфипатических пептидах на основе ароматических остатков триптофана и аргинина, связанных с лизином в качестве спейсера, сообщалось под названием CADY. CADY содержит короткую пептидную последовательность из 20 аминокислот с последовательностью «Ac-GLWRALWRLLRSLWRLLWRA-цистеамид».[40]Этот пептид способен самособираться в спиральную форму с гидрофильными и гидрофобными остатками на разных сторонах молекулы, он имеет две разные ориентации поверхности, которые представляют самую низкую энергию, и он способен образовывать комплексы с миРНК с различным молярным соотношением. от 1: 1 до 80: 1. CADY способен образовывать щит вокруг молекулы миРНК, защищая ее от биодеградационных процессов, которые могут произойти до проникновения в клетки. Эти типы подложек могут иметь важное применение. in vivo.

Для доставки антисмысловых олигомеров

Антисмысловые олигонуклеотиды (asON) использовались в фундаментальных исследованиях и разрабатываются в качестве возможных медицинских методов лечения. Стратегии CPP были разработаны для доставки антисмысловых олигомеров, таких как PNA и PMO, в клетки. Преодолевая отталкивание клеточной мембраной отрицательно заряженных ON и деградацию asON ферментами, CPP повышают биодоступность asON. Два типа нейтральных аналогов ON, пептидная нуклеиновая кислота (PNA ) и фосфородиамидат-морфолиноолигомеры (PMO или Морфолино ) становятся доминирующими в этой области. ПНК конъюгирована с различными CPP либо через дисульфидные связи, либо через стабильные амидные связи.[41] Например, антисмысловая активность внутри клеток, которая блокирует экспрессию рецептора галанина, наблюдалась, когда 21-мерная ПНК была связана с пенетратином.[42] Также сообщалось о результатах противовирусной активности ПНК, нацеленной на ВИЧ-1, посредством дисульфидной связи с ТАТ.[43] Конъюгаты CPP-PMO также успешно используются для подавления репликации нескольких вирусов, таких как SARS.[44] и грипп[45] и присоединение CPP повысило эффективность разрабатываемых морфолино, модифицирующих сплайсинг, для лечения Мышечная дистрофия Дюшенна[46]

Для доставки ложной ДНК

ДНК-приманка - это экзогенная двухцепочечная ДНК (дцДНК), которая может имитировать промоторную последовательность, которая может ингибировать активность определенного фактора транскрипции.[47] Но дцДНК имеет ту же проблему, что и другие терапевтические препараты, - плохая биодоступность. В одном исследовании CPP TP и TP10 были связаны с ДНК-приманкой NFкB, которая блокировала эффект индуцированной интерлейкином-1 активации NFkB и экспрессии гена IL-6.[48] В другом исследовании ДНК-ловушка Myc, связанная с TP10, уменьшала пролиферативную способность клеток N2a.[49]

Для доставки плазмиды

Отдельные гены можно вставлять в определенные сайты плазмид, а рекомбинантные плазмиды можно вводить в живые клетки. Метод, использующий макроразветвленную ТАТ, был предложен для доставки плазмидной ДНК в различные клеточные линии и показал значительные возможности трансфекции.[50] Было обнаружено, что мультимеры TAT увеличивают эффективность трансфекции плазмидной ДНК в 6-8 раз больше, чем поли-L-аргинин или мутантный TAT2-M1, и в 390 раз по сравнению со стандартными векторами.[51]

CPP-опосредованная доставка белков

Разработка терапевтических белков, представляющих ценный метод лечения заболеваний, ограничена низкой эффективностью традиционных способов доставки. Было обнаружено, что оценка цитозольной доставки белков, связанных с СРР, подвержена артефактам.[52] и, следовательно, требует использования методов оценки, которые отличают истинную цитозольную доставку от прикрепленных к клеточной поверхности или захваченных эндосомами СРР-белков.[53][54] Недавно появились сообщения о нескольких методах, использующих CPPS в качестве носителей для доставки биологически активных полноразмерных белков в живые клетки и животных.

Несколько групп успешно доставили слитые белки CPP. in vitro. ТАТ был способен доставлять различные белки, такие как пероксидаза хрена и РНКаза А, через клеточную мембрану в цитоплазму различных клеточных линий. in vitro. Диапазон размеров белков с эффективной доставкой составляет от 30 кДа до 120-150 кДа. В одном исследовании слитые с ТАТ белки быстро интернализуются за счет зависимого от липидного рафта макропиноцитоза с использованием трансдуцибельного анализа репортерной рекомбиназы ТАТ-Cre на живых клетках.[55] В другом исследовании слитый с ТАТ белок был доставлен в митохондрии клеток рака молочной железы и снизил выживаемость клеток рака молочной железы, что показало способность слитых с ТАТ белков модулировать функцию митохондрий и выживаемость клеток. Более того, cR10, циклический полиаргинин СРР, обеспечивает независимую от эндоцитоза трансдукцию антигенсвязывающих белков через клеточную мембрану с немедленной биодоступностью. Таким образом, авторы исследования смогли доставить флуоресцентные антигенсвязывающие белки в клетки, облегчая иммуноокрашивание живых клеток.[56] Однако очень немногие исследования in vivo оказались успешными. В одном исследовании доставка in vivo Fab-фрагментов, сшитых с ТАТ или пенетратином, дала различное распределение органов и общее увеличение удерживания в органах, что показало локализацию в ткани.[57]

Нековалентный метод, который формирует комплексы СРР / белок, также был разработан для устранения ограничений ковалентных методов, таких как химическая модификация перед сшиванием и денатурация белков перед доставкой. В одном исследовании короткий амфипатический пептидный носитель, Pep-1 и белковые комплексы доказали свою эффективность для доставки. Было показано, что Pep-1 может способствовать быстрому поглощению клетками различных пептидов, белков и даже полноразмерных антител с высокой эффективностью и меньшей токсичностью. Такой подход значительно упростил составление реагентов.[58]

Как переносчики контрастных веществ

Улучшенный субстрат для CPP, который сводит к минимуму эффекты протеолиза
Сворачивание контроля CPP с использованием неприродных β, δ циклических аминокислот

CPP нашли применение в качестве переносчиков контрастных веществ через плазматические мембраны. Эти контрастные вещества способны маркировать опухолевые клетки, что делает их важными инструментами в диагностике рака; они также используются в in vivo и in vitro клеточные эксперименты. Наиболее важные классы CPP выделены из вирусов, таких как TAT (трансактивированная транскрипция), полученная из ВИЧ-1, пенетратин и транспортан. Наиболее широко используемые CPP основаны на производных TAT. ТАТ - это CPP, богатый аргинином. Некоторые улучшения этого субстрата включают использование неприродных β- или γ-аминокислот. Эта стратегия предлагает множество преимуществ, такую ​​как устойчивость к протеолитической деградации, естественный процесс деградации, посредством которого пептидные связи гидролизуются до аминокислот. Включение неприродной кислоты в пептидную цепь имеет множество преимуществ. Он способствует образованию стабильных фолдамеров с отчетливой вторичной структурой.[59][60][61] β-Пептиды конформационно более стабильны в водном растворе, чем природные пептиды, особенно для небольших цепей. Вторичная структура усиливается наличием жесткой β-аминокислоты, содержащей циклогексановые или циклопентановые фрагменты. Эти фрагменты создают более жесткую структуру и влияют на угол раскрытия фолдамера. Эти особенности очень важны для дизайна новых пептидов. Спиральные β-пептиды имитируют антимикробную активность пептидов защиты хозяина.[62][63][64] Эта особенность требует ориентации катионно-гидрофильных с одной стороны и гидрофобных остатков с другой стороны спирали. Присоединение флуоресцентной группы к одной головке молекулы придает контрастные свойства. Новая стратегия повышения клеточной способности захвата СРР основана на ассоциации поликатионных и полианионных доменов, разделенных линкером. Клеточная ассоциация поликатионных остатков (полиаргинин) с отрицательно заряженными мембранными клетками эффективно блокируется наличием полианионного остатка (полиглутаминовая кислота) и линкера, который обеспечивает правильное расстояние между этими двумя заряженными остатками, чтобы максимизировать их взаимодействие. Эти пептиды имеют шпилечную структуру, что подтверждается корреляцией эффекта Оверхаузера для протон-протонной близости двух заряженных фрагментов. На этой стадии только линкер подвергается гидролизу протеазой. in vivo Приложения. Происходит линкерный гидролиз, и два заряженных фрагмента испытывают большую конформационную свободу. В отсутствие линкера катионный пептид может более эффективно взаимодействовать с клеткой-мишенью, и клеточное поглощение происходит до протеолиза. Эта стратегия нашла применение в маркировке опухолевых клеток. in vivo. Опухолевые клетки маркируют за минуты. Деградацию линкера можно предсказать по количеству D-аминокислот (неприродный изомер), включенных в пептидную цепь, что ограничивает in vivo протеолиз к центральному линкеру.[65][66][67][68]

Контрастные вещества как молекулы груза

Квантовые точки
Применение квантовых точек для маркировки клеток

Квантовые точки (QD) представляют собой относительно новый класс флуоресцентных зондов, которые обладают лучшими оптическими свойствами, чем классические органические красители на основе флуоресцентных групп. Основные преимущества КТ включают высокий квантовый выход, широкий спектр поглощения, перестраиваемый по размеру спектр излучения и хорошую устойчивость к химическому и фотохимическому разрушению. Тесты in vivo показали, что несколько положительно заряженных пептидов (на основе остатков гуанидина) способны проникать через клеточные мембраны и способствовать поглощению клетками прикрепленных молекул, включая квантовые точки. Свойства QD можно легко изменить, изменив связанные с ними органические субстраты. универсальный биологический инструмент в качестве маркеров клеток. В настоящее время ведутся исследования по оптимизации методологий внутриклеточной доставки биоконъюгатов QD и QD, а также по характеристике долгосрочных фотофизических свойств in vivo.[69][70][71][72][73]

Квантовые точки - это коллоидные нанокристаллы на основе кадмиево-селенового ядра (CdSe), покрытого слоем цинк-сера (ZnS). Этот субстрат интенсивно использовался в качестве клеточного маркера, поскольку CdSe излучает в видимой области и является отличным контрастным агентом, в то время как слой ZnS защищает ядро ​​от окисления, а также от попадания CdSe в окружающий раствор. Эта стратегия также улучшает выход фотолюминесценции. Свойства можно регулировать толщиной защитных слоев ZnS. Коллоидное излучение квантовых точек можно модулировать от УФ-видимого до инфракрасного с помощью различных типов покрывающих агентов, таких как ZnS, CdS, ZnSe, CdTe и PbSe. Свойства квантовых точек также могут быть настроены с помощью синтетической схемы, высокотемпературных смесей растворитель / лиганд, которые влияют на свойства нанокристаллов. Высококачественные контрастные вещества QD получаются при повышенных температурах; однако, поскольку они обладают меньшей растворимостью в воде, их использование в качестве маркеров клеток ограничено. Требуется дополнительная функционализация гидрофильными лигандами.[74][71]

Преимущества QD заключаются в их быстром действии; они могут маркировать ткань или клетку-мишень за секунды. Исследования in vivo показывают, что QD способны избирательно метить раковые клетки и накапливаться в опухолевых участках. Опухолевые клетки, меченные QD, можно отслеживать с помощью многофотонной микроскопии, поскольку они проникают в ткань легких. В обоих исследованиях спектральная визуализация и автофлуоресцентное вычитание позволили получить многоцветную визуализацию in vivo клеток и тканей. Главный недостаток QD - их относительно высокая токсичность. В стадии разработки находятся различные субстраты, повышающие биоаффинность и снижающие токсичность. Например, сера из оболочки КТ способна образовывать обратимые дисульфидные связи с широким классом органических соединений.[75]

Магнитно-резонансная томография

Примеры хелатов металлов, успешно доставленных в клетки

Магнитно-резонансная томография (МРТ) - мощный инструмент для диагностики таких заболеваний, как метастазы рака и воспаление, с использованием различных хелатов металлов. Хелаты металлов увеличивают контрастный сигнал между нормальными и больными тканями, катализируя релаксацию протонов воды в их непосредственной близости. Типичными примерами являются низкомолекулярные хелаты Gd3 + и суперпарамагнитный оксид железа (SPIO). В естественных условиях введение этих агентов позволяет маркировать опухолевые клетки; или клетки могут быть помечены in vitro с контрастными веществами, а затем их можно вводить и контролировать in vivo с помощью методов МРТ.[76][77][78]

Наночастицы SPIO придают высокую чувствительность при МРТ, но имеют более низкое сродство к клеткам; они работают при высоких концентрациях. Функционализация этих соединений с использованием дендримерных гуанидинов показала активность, аналогичную СРР на основе ТАТ, но более высокую токсичность. Новые субстраты на основе дендронов с гидроксильной или аминной периферией обладают низкой токсичностью. Приложения SPIO включают маркировку ячеек in vivo; из-за низкой токсичности они клинически одобрены для использования при визуализации печени, селезенки и желудочно-кишечного тракта.[79]

Присутствие остатков октамера аргинина позволяет трансдукции через клеточную мембрану различных грузовых молекул, включая пептиды, ДНК, миРНК и контрастные вещества. Однако способность поперечной мембраны не является однонаправленной; CPP на основе аргинина способны входить-выходить из клеточной мембраны, демонстрируя общее снижение концентрации контрастного вещества и уменьшение сигнала магнитного резонанса (МР) во времени. Это ограничивает их применение in vivo. Чтобы решить эту проблему, контрастные вещества с дисульфидом, обратимой связью между хелатом металла и трансдукционным фрагментом усиливают удерживание, связанное с клеткой. Дисульфидная связь снижается за счет окружающей среды клетки-мишени, и хелат металла остается захваченным в цитоплазме, увеличивая время удерживания хелата в клетке-мишени.[80][81][82][83]

Рекомендации

  1. ^ Миллетти Ф (август 2012 г.). «Проникающие в клетки пептиды: классы, происхождение и современный ландшафт». Открытие наркотиков сегодня. 17 (15–16): 850–60. Дои:10.1016 / j.drudis.2012.03.002. PMID  22465171.
  2. ^ Стальманс С., Винендал Э., Брак Н., Геверт Б., Д'Хондт М., Переманс К., Бурвенич С., Де Шпигелер Б. (2013). «Химико-функциональное разнообразие проникающих в клетки пептидов». PLOS ONE. 8 (8): e71752. Bibcode:2013PLoSO ... 871752S. Дои:10.1371 / journal.pone.0071752. ЧВК  3739727. PMID  23951237.
  3. ^ Вагстафф К.М., Янс Д.А. (2006). «Белковая трансдукция: проникающие в клетки пептиды и их терапевтическое применение». Современная лекарственная химия. 13 (12): 1371–87. Дои:10.2174/092986706776872871. PMID  16719783.
  4. ^ Окуяма М., Ламан Х., Кингсбери С.Р., Визинтин С., Лео Э., Эвард К.Л., Штобер К., Бошофф К., Уильямс Г.Х., Селвуд Д.Л. (февраль 2007 г.).«Низкомолекулярный имитатор альфа-спирали для эффективного транспорта белков в клетки». Методы природы. 4 (2): 153–9. Дои:10.1038 / nmeth997. PMID  17220893.
  5. ^ Чжан П., Монтейру да Силва Дж., Деатераж С., Бурд С., ДиМайо Д. (сентябрь 2018 г.). «Проникающий в клетки пептид опосредует прохождение белка L2 вируса папилломы человека через межклеточную мембрану и запускает ретроградный трафик». Клетка. 174 (6): 1465–1476.e13. Дои:10.1016 / j.cell.2018.07.031. ЧВК  6128760. PMID  30122350.
  6. ^ Opalinska JB, Gewirtz AM (июль 2002 г.). «Терапия нуклеиновой кислотой: основные принципы и недавнее применение». Обзоры природы. Открытие наркотиков. 1 (7): 503–14. Дои:10.1038 / nrd837. PMID  12120257.
  7. ^ Экштейн Ф (июль 2007 г.). «Универсальность олигонуклеотидов в качестве потенциальных терапевтических средств». Мнение эксперта по биологической терапии. 7 (7): 1021–34. Дои:10.1517/14712598.7.7.1021. PMID  17665991.
  8. ^ Стюарт К.М., Хортон К.Л., Келли С.О. (июль 2008 г.). «Проникающие в клетки пептиды как средства доставки для биологии и медицины». Органическая и биомолекулярная химия. 6 (13): 2242–55. Дои:10.1039 / b719950c. PMID  18563254.
  9. ^ Луо Д., Зальцман В.М. (январь 2000 г.). «Системы доставки синтетической ДНК». Природа Биотехнологии. 18 (1): 33–7. Дои:10.1038/71889. PMID  10625387.
  10. ^ Вивес Э, Броден П., Лебле Б. (июнь 1997 г.). «Усеченный основной домен белка Tat ВИЧ-1 быстро перемещается через плазматическую мембрану и накапливается в ядре клетки». Журнал биологической химии. 272 (25): 16010–7. Дои:10.1074 / jbc.272.25.16010. PMID  9188504.
  11. ^ Зельфати О, Сока ФК (сентябрь 1996 г.). «Внутриклеточное распределение и механизм доставки олигонуклеотидов, опосредованный катионными липидами». Фармацевтические исследования. 13 (9): 1367–72. Дои:10.1023 / а: 1016026101195. PMID  8893276.
  12. ^ Herce HD, Garcia AE (декабрь 2007 г.). «Моделирование молекулярной динамики предлагает механизм транслокации пептида ТАТ ВИЧ-1 через липидные мембраны». Труды Национальной академии наук Соединенных Штатов Америки. 104 (52): 20805–10. Bibcode:2007PNAS..10420805H. Дои:10.1073 / pnas.0706574105. ЧВК  2409222. PMID  18093956.
  13. ^ Herce HD, Garcia AE (декабрь 2007 г.). "Проникающие в клетки пептиды: как они это делают?". Журнал биологической физики. 33 (5–6): 345–56. Дои:10.1007 / s10867-008-9074-3. ЧВК  2565759. PMID  19669523.
  14. ^ Ху Y, Синха СК, Патель С. (июнь 2015 г.). «Исследование гидрофильных пор в модельных липидных бислоях с использованием молекулярного моделирования: корреляция свойств двухслойных слоев с термодинамикой порообразования». Langmuir. 31 (24): 6615–31. Дои:10.1021 / la504049q. ЧВК  4934177. PMID  25614183.
  15. ^ Ху И, Лю Х, Синха СК, Патель С. (март 2014 г.). «Транслокационная термодинамика линейного и циклического нонааргинина в модельный бислой DPPC с помощью крупномасштабного молекулярно-динамического моделирования: последствия образования пор и неаддитивности». Журнал физической химии B. 118 (10): 2670–82. Дои:10.1021 / jp412600e. ЧВК  3983342. PMID  24506488.
  16. ^ Ху Y, Патель С. (август 2016 г.). «Термодинамика внедрения проникающего в клетки ТАТ-пептида ВИЧ1 в бислои модели PC / PS / CHOL через трансмембранные поры: роль холестерина и анионных липидов». Мягкая материя. 12 (32): 6716–27. Bibcode:2016SMat ... 12.6716H. Дои:10.1039 / C5SM01696G. PMID  27435187.
  17. ^ Франкель А.Д., Пабо, Колорадо (декабрь 1988 г.). «Поглощение клетками белка tat вируса иммунодефицита человека». Клетка. 55 (6): 1189–93. Дои:10.1016/0092-8674(88)90263-2. PMID  2849510.
  18. ^ Лундберг М., Йоханссон М. (август 2001 г.). «Ядерное самонаведение VP22 - артефакт?». Природа Биотехнологии. 19 (8): 713–4. Дои:10.1038/90741. PMID  11479552.
  19. ^ Лундберг М., Викстрём С., Йоханссон М. (июль 2003 г.). «Адгезия клеточной поверхности и эндоцитоз доменов трансдукции белка». Молекулярная терапия. 8 (1): 143–50. Дои:10.1016 / с1525-0016 (03) 00135-7. PMID  12842437.
  20. ^ Вой Дж., Николл И. Д., Джонс С. (август 2007 г.). «Многочисленные варианты будущего для проникающих в клетки пептидов: как скоро?». Сделки Биохимического Общества. 35 (Pt 4): 767–9. Дои:10.1042 / bst0350767. HDL:2436/29794. PMID  17635144.
  21. ^ Plénat T, Deshayes S, Boichot S, Milhiet PE, Cole RB, Heitz F, Le Grimellec C (октябрь 2004 г.). «Взаимодействие первичных амфипатических пептидов, проникающих в клетки, с монослоями, поддерживаемыми фосфолипидами». Langmuir. 20 (21): 9255–61. Дои:10.1021 / la048622b. PMID  15461515.
  22. ^ Deshayes S, Gerbal-Chaloin S, Morris MC, Aldrian-Herrada G, Charnet P, Divita G, Heitz F (декабрь 2004 г.). «О механизме неэндосомальной пептид-опосредованной клеточной доставки нуклеиновых кислот». Biochimica et Biophysica Acta (BBA) - Биомембраны. 1667 (2): 141–7. Дои:10.1016 / j.bbamem.2004.09.010. PMID  15581849.
  23. ^ Deshayes S, Heitz A, Morris MC, Charnet P, Divita G, Heitz F (февраль 2004 г.). «Понимание механизма интернализации проникающего в клетки пептида-носителя Pep-1 посредством конформационного анализа». Биохимия. 43 (6): 1449–57. Дои:10.1021 / bi035682s. PMID  14769021.
  24. ^ Magzoub M, Kilk K, Eriksson LE, Langel U, Gräslund A (май 2001 г.). «Взаимодействие и структурная индукция проникающих в клетки пептидов в присутствии фосфолипидных везикул». Biochimica et Biophysica Acta (BBA) - Биомембраны. 1512 (1): 77–89. Дои:10.1016 / с0005-2736 (01) 00304-2. PMID  11334626.
  25. ^ Deshayes S, Plénat T, Aldrian-Herrada G, Divita G, Le Grimellec C, Heitz F (июнь 2004 г.). «Первичные амфипатические пептиды, проникающие в клетки: структурные требования и взаимодействия с модельными мембранами». Биохимия. 43 (24): 7698–706. Дои:10.1021 / bi049298m. PMID  15196012.
  26. ^ Derossi D, Calvet S, Trembleau A, Brunissen A, Chassaing G, Prochiantz A (июль 1996 г.). «Интернализация клетки третьей спирали гомеодомена Antennapedia не зависит от рецептора». Журнал биологической химии. 271 (30): 18188–93. Дои:10.1074 / jbc.271.30.18188. PMID  8663410.
  27. ^ Тилстра Дж., Рехман К.К., Хеннон Т., Плеви С.Е., Клеменс П., Роббинс П.Д. (август 2007 г.). «Белковая трансдукция: идентификация, характеристика и оптимизация». Сделки Биохимического Общества. 35 (Пт 4): 811–5. Дои:10.1042 / bst0350811. PMID  17635154.
  28. ^ Моррис М., Дешайес С., Симеони Ф., Алдриан-Херрада Дж., Хейтц Ф., Дивита Дж. (2006). «Стратегия на основе нековалентных пептидов для доставки пептидов и коротких интерферирующих РНК». Справочник по пептидам, проникающим в клетки, второе издание. Фармакология и токсикология: основные и клинические аспекты. 20061339. С. 387–408. Дои:10.1201 / 9781420006087.ch22. ISBN  978-0-8493-5090-0.
  29. ^ Эль-Андалуси С., Холм Т., Лангель Ю. (2005). «Проникающие в клетки пептиды: механизмы и применения». Текущий фармацевтический дизайн. 11 (28): 3597–611. Дои:10.2174/138161205774580796. PMID  16305497.
  30. ^ Гариепи Дж., Кавамура К. (январь 2001 г.). «Векторная доставка макромолекул в клетки с использованием носителей на основе пептидов». Тенденции в биотехнологии. 19 (1): 21–8. Дои:10.1016 / s0167-7799 (00) 01520-1. PMID  11146099.
  31. ^ Тернер Дж., Арзуманов А., Иванова Г., Фабани М., Походка М. (2006). «Пептидные конъюгаты аналогов олигонуклеотидов и миРНК для модуляции экспрессии генов». Справочник по пептидам, проникающим в клетки, второе издание. Фармакология и токсикология: основные и клинические аспекты. 20061339. С. 313–328. Дои:10.1201 / 9781420006087.ch18. ISBN  978-0-8493-5090-0.
  32. ^ Стеценко Д.А., Походка М.Ю. (август 2000 г.). «Эффективное конъюгирование пептидов с олигонуклеотидами путем« нативного лигирования »"". Журнал органической химии. 65 (16): 4900–8. Дои:10.1021 / jo000214z. PMID  10956469.
  33. ^ Мид BR, Дауди SF (март 2007 г.). «Доставка экзогенной миРНК с использованием доменов пептидной трансдукции / проникающих в клетку пептидов». Расширенные обзоры доставки лекарств. 59 (2–3): 134–40. Дои:10.1016 / j.addr.2007.03.004. PMID  17451840.
  34. ^ Моррис М.С., Видал П., Чалоин Л., Хейтц Ф., Дивита Г. (июль 1997 г.). «Новый пептидный вектор для эффективной доставки олигонуклеотидов в клетки млекопитающих». Исследования нуклеиновых кислот. 25 (14): 2730–6. Дои:10.1093 / nar / 25.14.2730. ЧВК  146800. PMID  9207018.
  35. ^ а б Симеони Ф., Моррис М.С., Хайц Ф., Дивита Г. (июнь 2003 г.). «Понимание механизма системы доставки генов на основе пептидов MPG: значение для доставки миРНК в клетки млекопитающих». Исследования нуклеиновых кислот. 31 (11): 2717–24. Дои:10.1093 / нар / gkg385. ЧВК  156720. PMID  12771197.
  36. ^ de Fougerolles A, Vornlocher HP, Maraganore J, Lieberman J (июнь 2007 г.). «Вмешательство в болезнь: отчет о прогрессе в области терапии на основе siRNA». Обзоры природы. Открытие наркотиков. 6 (6): 443–53. Дои:10.1038 / nrd2310. ЧВК  7098199. PMID  17541417.
  37. ^ Муратовская А., Экклс М.Р. (январь 2004 г.). «Конъюгат для эффективной доставки короткой интерферирующей РНК (миРНК) в клетки млекопитающих». Письма FEBS. 558 (1–3): 63–8. Дои:10.1016 / s0014-5793 (03) 01505-9. PMID  14759517.
  38. ^ Чиу Ю.Л., Али А., Чу С.Й., Цао Х., Рана Т.М. (август 2004 г.). «Визуализация корреляции между локализацией миРНК, клеточным захватом и РНКи в живых клетках». Химия и биология. 11 (8): 1165–75. Дои:10.1016 / j.chembiol.2004.06.006. PMID  15324818.
  39. ^ Зайнеддин Д., Пападиму Э., Чебли К., Жинест М., Лю Дж., Грей С., Туриг С., Бехфар А., Уоллес В.А., Скерянц И.С., Пусеат М. (октябрь 2006 г.). «Oct-3/4 дозозависимо регулирует спецификацию эмбриональных стволовых клеток в направлении сердечного происхождения и раннего развития сердца». Клетка развития. 11 (4): 535–46. Дои:10.1016 / j.devcel.2006.07.013. PMID  17011492.
  40. ^ Crombez L, Aldrian-Herrada G, Konate K, Nguyen QN, McMaster GK, Brasseur R, Heitz F, Divita G (январь 2009 г.). «Новый мощный вторичный амфипатический проникающий в клетки пептид для доставки миРНК в клетки млекопитающих». Молекулярная терапия. 17 (1): 95–103. Дои:10.1038 / мт.2008.215. ЧВК  2834975. PMID  18957965.
  41. ^ Зацепин TS, Тернер JJ, Орецкая TS, Gait MJ (2005). «Конъюгаты олигонуклеотидов и аналогов с проникающими в клетку пептидами в качестве агентов подавления генов». Текущий фармацевтический дизайн. 11 (28): 3639–54. Дои:10.2174/138161205774580769. PMID  16305500.
  42. ^ Пуга М., Сометс Ю., Хеллбринк М., Валкна А., Саар К., Резаей К., Каль Ю., Хао Дж. Х., Сюй С. Дж., Визенфельд-Халлин З., Хёкфельт Т., Бартфай Т., Лангель Ю. (сентябрь 1998 г.). «Проникающие в клетки конструкции ПНК регулируют уровни рецепторов галанина и изменяют передачу боли in vivo». Природа Биотехнологии. 16 (9): 857–61. Дои:10.1038 / nbt0998-857. PMID  9743120.
  43. ^ Трипати С., Чауби Б., Бартон Б.Е., Панди В.Н. (июнь 2007 г.). «Вирулицидная активность полиамидной нуклеиновой кислоты и мембранных трансдуцирующих пептидных конъюгатов против ВИЧ-1, направленная на сайт связывания праймера генома ВИЧ-1». Вирусология. 363 (1): 91–103. Дои:10.1016 / j.virol.2007.01.016. ЧВК  2038983. PMID  17320140.
  44. ^ Neuman, Benjamin W .; Stein, David A .; Kroeker, Andrew D .; Bestwick, Ричард К .; Иверсен, Патрик Л .; Moulton, Hong M .; Бухмайер, Майкл Дж. (2006). «Ингибирование и уход от SARS-CoV, обработанного антисмысловыми морфолино-олигомерами». Нидовирусы. Успехи экспериментальной медицины и биологии. 581. стр.567–571. Дои:10.1007/978-0-387-33012-9_103. ISBN  978-0-387-26202-4. ЧВК  7123819. PMID  17037599.
  45. ^ Гэ К., Пастей М., Кобаса Д., Путхаватана П., Лупфер С., Бествик Р.К., Иверсен П.Л., Чен Дж., Штейн Д.А. (ноябрь 2006 г.). «Ингибирование нескольких подтипов вируса гриппа А в клеточных культурах с морфолиноолигомерами». Противомикробные препараты и химиотерапия. 50 (11): 3724–33. Дои:10.1128 / aac.00644-06. ЧВК  1635187. PMID  16966399.
  46. ^ Ву Б., Моултон Х.М., Иверсен П.Л., Цзян Дж., Ли Дж., Ли Дж., Сперни С.Ф., Сали А., Геррон А.Д., Нагараджу К., Доран Т., Лу П, Сяо Х, Лу QL (сентябрь 2008 г.). «Эффективное восстановление дистрофина улучшает сердечную функцию у мышей с дефицитом дистрофина с помощью модифицированного олигомера морфолино». Труды Национальной академии наук Соединенных Штатов Америки. 105 (39): 14814–9. Bibcode:2008PNAS..10514814W. Дои:10.1073 / pnas.0805676105. ЧВК  2546441. PMID  18806224.
  47. ^ Моришита Р., Гиббонс Г. Х., Хориучи М., Эллисон К. Э., Накама М., Чжан Л., Канеда И., Огихара Т., Дзау В. Дж. (Июнь 1995 г.). «Стратегия генной терапии с использованием приманки фактора транскрипции сайта связывания E2F подавляет пролиферацию гладких мышц in vivo». Труды Национальной академии наук Соединенных Штатов Америки. 92 (13): 5855–9. Bibcode:1995ПНАС ... 92.5855М. Дои:10.1073 / пнас.92.13.5855. ЧВК  41600. PMID  7597041.
  48. ^ Фишер Л., Суметс Ю., Кортес Торо В., Чилтон Л., Цзян И., Лангель Ю., Иверфельд К. (август 2004 г.). «Клеточная доставка двухцепочечного олигонуклеотида-приманки NFkappaB путем гибридизации с комплементарной ПНК, связанной с проникающим в клетки пептидом». Генная терапия. 11 (16): 1264–72. Дои:10.1038 / sj.gt.3302291. PMID  15292915.
  49. ^ Эль-Андалуси С., Йоханссон Х., Магнусдоттир А., Ярвер П., Лундберг П., Лангель Ю. (декабрь 2005 г.). «TP10, вектор для доставки олигонуклеотидов-ловушек, нацеленных на белок Myc». Журнал контролируемого выпуска. 110 (1): 189–201. Дои:10.1016 / j.jconrel.2005.09.012. PMID  16253378.
  50. ^ Лю З., Ли М., Цуй Д., Фей Дж. (Февраль 2005 г.). «Макро-разветвленный дизайн проникающего в клетки пептида для доставки генов». Журнал контролируемого выпуска. 102 (3): 699–710. Дои:10.1016 / j.jconrel.2004.10.013. PMID  15681091.
  51. ^ Рудольф С., Планка С, Лозье Дж., Шиллингер Ю., Мюллер Р. Х., Розенекер Дж. (Март 2003 г.). «Олигомеры богатого аргинином мотива белка ТАТ ВИЧ-1 способны переносить плазмидную ДНК в клетки». Журнал биологической химии. 278 (13): 11411–8. Дои:10.1074 / jbc.m211891200. PMID  12519756.
  52. ^ Ричард Дж. П., Меликов К., Вивес Е., Рамос С., Вербер Б., Гейт М. Дж., Черномордик Л. В., Лебле Б. (январь 2003 г.). «Проникающие в клетки пептиды. Переоценка механизма клеточного поглощения». Журнал биологической химии. 278 (1): 585–90. Дои:10.1074 / jbc.M209548200. PMID  12411431.
  53. ^ Маршалл А.Л., Чжан С., Френцель А., Ширрманн Т., Хуст М., Перес Ф., Дюбель С. (2014). «Доставка антител в цитозоль: развенчание мифов». mAbs. 6 (4): 943–56. Дои:10.4161 / mabs.29268. ЧВК  4171028. PMID  24848507.
  54. ^ Маршалл А.Л., Чжан С., Дюбель С. (2017). «Оценка доставки белков в цитозоль клеток млекопитающих». Сети генов рака. Методы молекулярной биологии. 1513. С. 201–208. Дои:10.1007/978-1-4939-6539-7_14. ISBN  978-1-4939-6537-3. PMID  27807839.
  55. ^ Вадиа Дж.С., Стэн Р.В., Дауди С.Ф. (март 2004 г.). «Трансдуцибельный слитый пептид ТАТ-НА усиливает ускользание слитых белков ТАТ после макропиноцитоза липидного рафта». Природа Медицина. 10 (3): 310–5. Дои:10,1038 / нм996. PMID  14770178.
  56. ^ Герц HD, Шумахер Д., Шнайдер А.Ф., Людвиг А.К., Манн Ф.А., Филлис М., Каспер М.А., Рейнке С., Краузе Э., Леонхардт Х., Кардосо М.С., Хакенбергер С.П. (август 2017 г.). «Проницаемые для клеток нанотела для направленного иммуно-мечения и манипуляции с антигенами в живых клетках». Химия природы. 9 (8): 762–771. Bibcode:2017НатЧ ... 9..762Ч. Дои:10.1038 / nchem.2811. PMID  28754949.
  57. ^ Камеяма С., Хорие М., Кикучи Т., Омура Т., Такеучи Т., Накасе И., Сугиура Ю., Футаки С. (2006). «Эффекты связывания проникающего в клетки пептида на распределение 125I-меченного Fab-фрагмента у крыс». Биоконъюгат Химия. 17 (3): 597–602. Дои:10.1021 / bc050258k. PMID  16704196.
  58. ^ Моррис М.С., Деполье Дж., Мери Дж., Хейтц Ф., Дивита Дж. (Декабрь 2001 г.). «Пептидный носитель для доставки биологически активных белков в клетки млекопитающих». Природа Биотехнологии. 19 (12): 1173–6. Дои:10.1038 / nbt1201-1173. PMID  11731788.
  59. ^ Ченг Р.П., Геллман С.Х., ДеГрадо В.Ф. (октябрь 2001 г.). «Бета-пептиды: от структуры к функции». Химические обзоры. 101 (10): 3219–32. Дои:10.1021 / cr000045i. PMID  11710070.
  60. ^ Зеебах Д., Абеле С., Шрайбер Дж. В., Мартинони Б., Нуссбаум А. К., Шильд Х, Шульц Х., Хеннеке Х., Весснер Р., Битч Ф. (декабрь 1998 г.). «Биологические и фармакокинетические исследования с β-пептидами». Международный химический журнал CHIMIA. 52 (12): 734–9.
  61. ^ Akkarawongsa R, Potocky TB, English EP, Gellman SH, Brandt CR (июнь 2008 г.). «Ингибирование инфекции вируса простого герпеса типа 1 катионными бета-пептидами». Противомикробные препараты и химиотерапия. 52 (6): 2120–9. Дои:10.1128 / AAC.01424-07. ЧВК  2415802. PMID  18391029.
  62. ^ Тью Г.Н., Лю Д., Чен Б., Дёрксен Р.Дж., Каплан Дж., Кэрролл П.Дж., Кляйн М.Л., ДеГрадо В.Ф. (апрель 2002 г.). «Дизайн de novo биомиметических антимикробных полимеров». Труды Национальной академии наук Соединенных Штатов Америки. 99 (8): 5110–4. Дои:10.1073 / pnas.082046199. ЧВК  122730. PMID  11959961.
  63. ^ Портер Э.А., Вайсблюм Б., Геллман С.Х. (июнь 2002 г.). «Мимикрия пептидов защиты хозяина с помощью неестественных олигомеров: антимикробные бета-пептиды». Журнал Американского химического общества. 124 (25): 7324–30. Дои:10.1021 / ja0260871. PMID  12071741.
  64. ^ Рагуз Т.Л., Портер Э.А., Вайсблюм Б., Геллман С.Х. (октябрь 2002 г.). «Исследования структуры-активности 14-спиральных антимикробных бета-пептидов: исследование взаимосвязи между конформационной стабильностью и антимикробной активностью». Журнал Американского химического общества. 124 (43): 12774–85. Дои:10.1021 / ja0270423. PMID  12392424.
  65. ^ Грдиса М (2011). «Доставка в клетки биологически активных (терапевтических) пептидов и белков». Современная лекарственная химия. 18 (9): 1373–9. Дои:10.2174/092986711795029591. PMID  21366527.
  66. ^ Гаммон С.Т., Вильялобос В.М., Прайор Дж.Л., Шарма В., Пивница-Вормс Д. (2003). «Количественный анализ комплексов проницаемых пептидов, меченных технецием-99m: хиральные и специфичные для последовательности эффекты на чистое поглощение клетками». Биоконъюгат Химия. 14 (2): 368–76. Дои:10.1021 / bc0256291. PMID  12643747.
  67. ^ Поляков В., Шарма В., Дальхаймер Дж. Л., Пика С. М., Люкер Г. Д., Пивница-Вормс Д. (2000). «Новые хелаты Tat-пептида для прямой трансдукции технеция-99m и рения в клетки человека для визуализации и лучевой терапии». Биоконъюгат Химия. 11 (6): 762–71. Дои:10.1021 / bc000008y. PMID  11087323.
  68. ^ Цзян Т., Олсон Э.С., Нгуен К.Т., Рой М., Дженнингс П.А., Цзянь Р.Й. (декабрь 2004 г.). «Визуализация опухоли с помощью протеолитической активации проникающих в клетки пептидов». Труды Национальной академии наук Соединенных Штатов Америки. 101 (51): 17867–72. Bibcode:2004PNAS..10117867J. Дои:10.1073 / pnas.0408191101. ЧВК  539314. PMID  15601762.
  69. ^ Делеханти Дж. Б., Мединц И. Л., Понс Т., Брунель Ф. М., Доусон П. Е., Маттусси Х (2006). «Самособирающиеся биоконъюгаты квантовых точек и пептидов для селективной внутриклеточной доставки». Биоконъюгат Химия. 17 (4): 920–7. Дои:10.1021 / bc060044i. ЧВК  2519024. PMID  16848398.
  70. ^ Аливисатос А.П., Гу В., Ларабелл С. (2005). «Квантовые точки как клеточные зонды». Ежегодный обзор биомедицинской инженерии. 7: 55–76. Дои:10.1146 / annurev.bioeng.7.060804.100432. PMID  16004566.
  71. ^ а б Мединц ИЛ, Уеда Х.Т., Голдман Э.Р., Маттусси Х. (июнь 2005 г.). «Биоконъюгаты с квантовыми точками для визуализации, маркировки и зондирования». Материалы Природы. 4 (6): 435–46. Bibcode:2005НатМа ... 4..435М. Дои:10.1038 / nmat1390. PMID  15928695.
  72. ^ Парак В.Дж., Герион Д., Пеллегрино Т., Занше Д., Мишель С., Уильямс С.К., Будро Р., Ле Гро М.А., Ларабелл, Калифорния, Аливисатос А.П. (июнь 2003 г.). «Биологические применения коллоидных нанокристаллов». Нанотехнологии. 14 (7): R15 – R27. Дои:10.1088/0957-4484/14/7/201.
  73. ^ Парак В.Дж., Пеллегрино Т., Доска C (февраль 2005 г.). «Маркировка клеток квантовыми точками». Нанотехнологии. 16 (2): R9 – R25. Дои:10.1088 / 0957-4484 / 16/2 / R01. PMID  21727419.
  74. ^ Даббоуси Б.О., Родригес-Вьехо Дж., Микулек Ф.В., Хайне Дж. Р., Маттусси Х., Обер Р., Дженсен К. Ф., Бавенди М. Г. (ноябрь 1997 г.). «(CdSe) ZnS ядро-оболочка квантовых точек: синтез и характеристика размерного ряда высоколюминесцентных нанокристаллитов». Журнал физической химии B. 101 (46): 9463–75. Дои:10.1021 / jp971091y.
  75. ^ Гао X, Цуй Y, Левенсон Р.М., Чунг Л.В., Ни С. (август 2004 г.). «Нацеливание на рак in vivo и визуализация с помощью полупроводниковых квантовых точек». Природа Биотехнологии. 22 (8): 969–76. Дои:10.1038 / nbt994. PMID  15258594.
  76. ^ Булте Дж. У., Дуглас Т., Витвер Б., Чжан С. К., Стрэбл Э, Льюис Б. К., Цивик Х., Миллер Б., ван Гельдерен П., Московиц Б. М., Дункан И. Д., Франк Дж. А. (декабрь 2001 г.). «Магнитодендримеры позволяют эндосомной магнитной маркировке и отслеживанию стволовых клеток in vivo». Природа Биотехнологии. 19 (12): 1141–7. Дои:10.1038 / nbt1201-1141. PMID  11731783.
  77. ^ Pittet MJ, Swirski FK, Reynolds F, Josephson L, Weissleder R (2006). «Маркировка иммунных клеток для визуализации in vivo с использованием магнитофлуоресцентных наночастиц». Протоколы природы. 1 (1): 73–9. Дои:10.1038 / nprot.2006.11. PMID  17406214.
  78. ^ Фостер П.Дж., Данн Э.А., Карл К.Э., Снир Дж.А., Ньюч К.М., Харви А.Дж., Петтис Р.Дж. (март 2008 г.). «Клеточная магнитно-резонансная томография: визуализация in vivo клеток меланомы в лимфатических узлах мышей». Неоплазия (Нью-Йорк, Нью-Йорк). 10 (3): 207–16. Дои:10.1593 / neo.07937. ЧВК  2259450. PMID  18320065.
  79. ^ Мартин А.Л., Бернас Л.М., Ратт Б.К., Фостер П.Дж., Гиллис ER (декабрь 2008 г.). «Повышенное поглощение клетками суперпарамагнитных наночастиц оксида железа, функционализированных дендритными гуанидинами». Биоконъюгат Химия. 19 (12): 2375–84. Дои:10.1021 / bc800209u. PMID  19053308.
  80. ^ Аллен MJ, MacRenaris KW, Venkatasubramanian PN, Meade TJ (март 2004 г.). «Клеточная доставка контрастных веществ для МРТ». Химия и биология. 11 (3): 301–7. Дои:10.1016 / j.chembiol.2004.03.003. PMID  15123259.
  81. ^ Futaki S (февраль 2005 г.). «Мембраннопроницаемые пептиды, богатые аргинином и механизмы транслокации». Расширенные обзоры доставки лекарств. 57 (4): 547–58. Дои:10.1016 / j.addr.2004.10.009. PMID  15722163.
  82. ^ Футаки С., Сузуки Т., Охаши В., Ягами Т., Танака С., Уэда К., Сугиура Ю. (февраль 2001 г.). «Пептиды, богатые аргинином. Обильный источник мембранопроницаемых пептидов, имеющих потенциал в качестве носителей для внутриклеточной доставки белка». Журнал биологической химии. 276 (8): 5836–40. Дои:10.1074 / jbc.M007540200. PMID  11084031.
  83. ^ Эндрес П.Дж., МакРенарис К.В., Фогт С., Мид Т.Дж. (октябрь 2008 г.). «Проницаемые для клеток MR контрастные вещества с повышенной внутриклеточной задержкой». Биоконъюгат Химия. 19 (10): 2049–59. Дои:10.1021 / bc8002919. ЧВК  2650427. PMID  18803414.