Суправитальное окрашивание - Supravital staining

Суправитальное окрашивание мазка крови человека пациента с гемолитическая анемия. Ретикулоциты - это клетки с темно-синими точками и изогнутыми линейными структурами (ретикулум) в цитоплазме.

Суправитальное окрашивание это метод окрашивание используется в микроскопия для исследования живых клеток, которые были удалены из организма. Он отличается от прижизненное окрашивание, что делается путем инъекции или иного введения пятна в организм. Таким образом, суправитальное пятно может иметь большую токсичность, так как лишь нескольким клеткам необходимо пережить это короткое время. Период, термин "витальное пятно "используется некоторыми авторами для обозначения прижизненного окрашивания, а другими - для обозначения суправитального окрашивания, основная концепция заключается в том, что исследуемая клетка все еще жива. Поскольку клетки живые и нефиксированные, вне тела, суправитальные пятна носят временный характер.[1][2]

Чаще всего суправитальное окрашивание выполняется на ретикулоциты с помощью новый метиленовый синий или же блестящий крезиловый синий, что позволяет увидеть ретикулофиламентный рисунок рибосомы характерно осаждение этих живых незрелых красные кровяные тельца по наджизненным пятнам. Подсчитывая количество таких клеток, можно определить скорость образования эритроцитов, что дает представление о Костный мозг деятельность и анемия.[3] Это в отличие от витальное окрашивание, когда используется краситель, не входит от живых клеток, так что только мертвые клетки окрашиваются положительно. (К жизненно важным пятнам относятся такие красители, как трипановый синий и иодид пропидия, которые либо слишком громоздки, либо слишком заряжены, чтобы пересекать клеточную мембрану, либо активно быстро откачиваются живыми клетками.)

Суправитальное окрашивание можно сочетать с клеточной поверхностью антитело окрашивание (иммунофлуоресценция ) для таких приложений, как FACS анализ.[4] Иммунофлуоресценция также может осуществляться внутри живых клеток с помощью обратимого проницаемость клеток используя моющее средство Тритон Х-100. Тщательно отрегулированная до концентрации, соответствующей количеству клеток, предварительная обработка может обеспечить доступ молекул от 1 до 150. килодальтон внутрь камеры.[5] Хотя в этом контексте аналогичным образом можно использовать антитела, термин «суправитальное пятно» обычно используется для более мелких химических веществ, которые обладают подходящими свойствами.

Примеры распространенных суправитальных красителей

Суправитальные красители для эритроцитов:[6]

Рекомендации

  1. ^ «Английский медицинский словарь».
  2. ^ Н. Чендлер Фут (1954). «Жизненное окрашивание». Летопись Нью-Йоркской академии наук. 59 (2): 259–267. Дои:10.1111 / j.1749-6632.1954.tb45936.x.
  3. ^ Джон П. Грир; Максвелл Майер Винтроб (2008). Клиническая гематология Винтроба. ISBN  9780781765077.
  4. ^ Тина Карлсен; Ричард Ланглуа; Эрин Бисселл. «Заключительный отчет о подтверждении концепции иммуноанализа / системы жизненных пятен (IVSS)» (PDF). Ливерморская национальная лаборатория Лоуренса.
  5. ^ Энн Л. ван де Вен, Карен Адлер-Сторц и Ребекка Ричардс-Кортум (2009). «Доставка оптических контрастных агентов с использованием Triton-X100, часть 1: обратимая пермеабилизация живых клеток для внутриклеточного мечения». J Biomed Opt. 14 (2): 021012. Дои:10.1117/1.3090448. ЧВК  2748244. PMID  19405725.CS1 maint: несколько имен: список авторов (связь)
  6. ^ Гематология, клиническая микроскопия и глоссарий биологических жидкостей, 2011 г., CAP