Пятно Циля – Нильсена - Ziehl–Neelsen stain

Микобактерии туберкулеза визуализация с помощью красителя Циля – Нильсена
Окрашивание по Цилю – Нильсену (кислотостойкое) - схема основных этапов

Окрашивание по Цилю-Нильсену это разновидность кислотостойких красителей, впервые представленная Полем Эрлихом. Окрашивание по Цилю – Нильсену бактериологический краситель, используемый для идентификации кислотоустойчивый организмов, в основном Микобактерии. Он назван в честь двух немецких врачей, которые изменили пятно: бактериолога. Франц Циль (1859–1926) и патолог Фридрих Нильсен (1854–1898).

Микобактерии

Род Mycobacterium - это медленно растущие бактерии, состоящие из небольших палочек, слегка изогнутых или прямых, и считаются грамположительными. Некоторые виды микобактерий образуют ветви или нити. Некоторые микобактерии являются свободноживущими сапрофитами, но многие из них являются патогенами, вызывающими заболевания у животных и людей. Mycobacterium bovis вызывает туберкулез крупного рогатого скота. Поскольку туберкулез может передаваться людям, молоко пастеризуется, чтобы убить любые бактерии.[1]Некоторые виды микобактерий, вызывающие заболевания у людей, включают: Mycobacterium leprae, Mycobacterium kansasii, Mycobacterium marinum, Mycobacterium bovis, Mycobacterium africanum и члены Mycobacterium avium сложный. Микобактерии туберкулеза это вид Mycobacterium, вызывающий туберкулез (ТБ). Mycobacterium tuberculosis - это бактерия, передающаяся по воздуху, которая обычно поражает легкие человека.[2][3] Симптомы ТБ включают сильный кашель, боль в груди, усталость, потерю веса, отсутствие аппетита, озноб, лихорадку и ночную потливость.[4] Типичная схема лечения латентной инфекции ТБ включает использование изониазида, рифапентина и рифампицина. Режим изменен для тех, у кого развился штамм туберкулеза с лекарственной устойчивостью.[5] Обследование на туберкулез включает анализ крови, кожные пробы и рентген грудной клетки.[6] При просмотре мазков на туберкулез он окрашивается кислотостойким красителем. Эти кислотоустойчивые организмы, такие как Mycobacterium, содержат большое количество липидных веществ в стенках своих клеток, называемых миколиновыми кислотами. Эти кислоты устойчивы к окрашиванию обычными методами, такими как Окраска по Граму.[7] Его также можно использовать для окрашивания некоторых других бактерий, таких как Нокардия. Реагенты, используемые для окрашивания по Цилю – Нильсену: карбол фуксин, кислый спирт и метиленовый синий. Кислотоустойчивые бациллы после окрашивания становятся ярко-красными.

Грибы

Окрашивание по Цилю-Нильсену представляет собой разновидность пятен от грибка узкого спектра действия. Пятна от грибка с узким спектром действия являются избирательными и могут помочь дифференцировать и идентифицировать грибки.[8] Результаты окрашивания по Цилю-Нильсену различны, поскольку многие клеточные стенки грибов не обладают кислотостойкостью.[9] Пример распространенного типа кислотоустойчивого грибка, который обычно окрашивают с помощью окрашивания по Цилю-Нильсену, называется Histoplasma (HP).[10] Гистоплазма содержится в почве и фекалиях птиц и летучих мышей.[11] Люди могут заразиться гистоплазмозом при вдыхании спор грибов. Гистоплазма попадает в организм и попадает в легкие, где споры превращаются в дрожжи.[12] Дрожжи попадают в кровоток и поражают лимфатические узлы и другие части тела. Обычно люди не заболевают от вдыхания спор, но в этом случае у них обычно появляются симптомы гриппа.[13] Другой вариант этого метода окрашивания используется в микология для дифференцированного окрашивания кислотоустойчивых отложений на кутикуле гифы некоторых видов грибы в роду Russula.[14][15] Некоторые свободные эндоспоры можно спутать с небольшими дрожжами, поэтому окрашивание используется для идентификации неизвестных грибов.[16] Это также полезно для идентификации некоторых простейших, а именно Криптоспоридиум и Изоспора. Окраска по Цилю – Нильсену также может затруднить диагностику в случае парагонимоз потому что яйца в образце мокроты на яйцеклетку и паразиты (O&P) могут быть растворены пятном, и часто используется в этих клинических условиях, поскольку признаки и симптомы парагонимоза очень похожи на симптомы туберкулеза.

История

В 1882 году Роберт Кох открыл этиологию туберкулеза.[17] Вскоре после открытия Коха Пол Эрлих разработал краситель для микобактерий туберкулеза, названный окраской квасцов гематоксилином.[18] Затем Франц Циль изменил технику окрашивания Эрлиха, применив в качестве протравы карболовую кислоту. Фридрих Нильсен оставил протраву, выбранную Ziehl, но заменил первичную окраску на карбол-фуксин. Совместные модификации Циля и Нильсена разработали пятно Циля-Нильсена. Другой кислотоупорный атлас был разработан Джозефом Киньюном с использованием техники окрашивания по Цилю-Нильсену, но с исключением стадии нагрева из процедуры. Это новое пятно от киньюна было названо пятном киньюна.

Процедура

Типичная процедура окрашивания AFB включает падение клеток в суспензии на предметное стекло, затем сушку жидкости на воздухе и фиксацию клеток нагреванием. [19]

Резюме кислотоустойчивого красителя (окраска Циля – Нильсена)[20]
ПрименениеРеагентЦвет ячейки
Кислотный быстроНекислотное быстрое
Первичный красительКарбол фуксинкрасныйкрасный
Обесцвечивающее средствоКислый спирткрасныйБесцветный
Счетчик пятенМетиленовый синий /малахитовый зеленыйкрасныйСиний

Исследования показали, что окрашивание AFB без посева имеет плохую прогностическую ценность. Культивирование КУБ необходимо проводить вместе с окрашиванием КУБ; это имеет гораздо более высокую отрицательную прогностическую ценность.

Механизм кислотостойкого окрашивания в кислотоустойчивых клетках и некислотных клетках.[21][22][23]

Объяснение механизма

Первоначально карбол-фуксин окрашивает каждую клетку. Когда они очищаются кислотно-спиртовым раствором, окрашиваются только некислотные бактерии, так как у них нет толстого воскового липидного слоя, как у кислотоустойчивых бактерий. Когда наносится контркрашивание, некислотные бактерии захватывают его и становятся синими (метиленовый синий) или зеленым (малахитовый зеленый) при просмотре под микроскопом. Кислотоустойчивые бактерии удерживают карбол-фуксин, поэтому они кажутся красными.

Модификации

Смотрите также

Примеры онлайн-протокола

Рекомендации

  1. ^ Песочный человек, Кэтлин, Джоан Уилли и Дороти Вуд. Микробиология Прескотта. 11 изд. Нью-Йорк, Нью-Йорк: Высшее образование Макгроу-Хилла, 2020. Печать. п. 541
  2. ^ Центры по контролю и профилактике заболеваний. Основные факты о туберкулезе. 11 марта 2016 г. https://www.cdc.gov/tb/topic/basics/default.htm
  3. ^ Центры по контролю и профилактике заболеваний. Как распространяется туберкулез. 11 марта 2016 г. https://www.cdc.gov/tb/topic/basics/howtbspreads.htm
  4. ^ Центры по контролю и профилактике заболеваний. Признаки и симптомы. 11 марта 2016 г. https://www.cdc.gov/tb/topic/basics/signsandsymptoms.htm
  5. ^ Центры по контролю и профилактике заболеваний. Схемы лечения латентной туберкулезной инфекции (ЛТИ). 11 марта 2016 г. https://www.cdc.gov/tb/topic/treatment/ltbi.htm
  6. ^ Центры по контролю и профилактике заболеваний. Тестирование и диагностика. 11 марта 2016 г. https://www.cdc.gov/tb/topic/testing/default.htm
  7. ^ Морелло, Жозефина А., Пол А. Гранато, Марион Э. Уилсон и Верна Мортон. Лабораторное руководство и рабочая тетрадь по микробиологии: приложения для ухода за пациентами. 10-е изд. Бостон: Высшее образование Макгроу-Хилла, 2006. Печать.[страница нужна ]
  8. ^ Veerappan, R., Miller, L.E., Sosinski, C., & Youngberg, G.A. (2006) Узкий спектр окрашивания Pityrosporum. Журнал кожной патологии: ноябрь 2006 г., Vol. 33, No. 11, pp. 731-734.
  9. ^ Хак, А. (2010). Использование специальных красителей при грибковых инфекциях. Подключение: 187-194
  10. ^ Раджешвари М., Зесс И., Шарма М. К. и Джайн Д. (2017). Кислотостойкость гистоплазмы в практике хирургической патологии. Журнал патологии и трансляционной медицины, 51 (5), 482–487. DOI: 10.4132 / jptm.2017.07.11
  11. ^ Центры по контролю и профилактике заболеваний. Гистоплазмоз. 13 августа 2018. https://www.cdc.gov/fungal/diseases/histoplasmosis/index.html.
  12. ^ Центры по контролю и профилактике заболеваний. Источники гистоплазмоза. 11 февраля 2019. https://www.cdc.gov/fungal/diseases/histoplasmosis/causes.html
  13. ^ Центры по контролю и профилактике заболеваний. Симптомы гистоплазмоза. 13 августа 2018. https://www.cdc.gov/fungal/diseases/histoplasmosis/symptoms.html
  14. ^ Романьези, Х. (1967). Les Russules d'Europe et d'Afrique du Nord. Бордас. ISBN  0-934454-87-6.[страница нужна ]
  15. ^ Ларджент, Д; Д Джонсон; Р. Уотлинг (1977). Как отнести грибы к III роду: микроскопические особенности. Mad River Press. п. 25. ISBN  0-916422-09-7.
  16. ^ Янгберг, Джордж А .; Валлен, Эллен Д. Б.; Гиоргадзе, Тамар А. (ноябрь 2003 г.). «Узкоспектральное гистохимическое окрашивание грибов». Архив патологии и лабораторной медицины. 127 (11): 1529–30. Дои:10.1043 / 1543-2165 (2003) 127 <1529: NHSOF> 2.0.CO; 2 (неактивно 21.10.2020). PMID  14567744.CS1 maint: DOI неактивен по состоянию на октябрь 2020 г. (связь)
  17. ^ ДиНардо, Эндрю Р .; Ланге, Кристоф; Мандалакас, Анна М. (1 мая 2016 г.). «Редакционный комментарий: 1, 2, 3 (года)… и ты ушел: конец 123-летней исторической эры». Клинические инфекционные болезни. 62 (9): 1089–1091. Дои:10.1093 / cid / ciw041. PMID  26839384.
  18. ^ Сингхал, Риту; Myneedu, Vithal Prasad (март 2015 г.). «Микроскопия как средство диагностики при туберкулезе легких». Международный журнал микобактериологии. 4 (1): 1–6. Дои:10.1016 / j.ijmyco.2014.12.006. PMID  26655191.
  19. ^ Лебоффе, Майкл Дж. И Бертон Э. Пирс. Теория и основы применения микробиологической лаборатории. Morton Publishing, 2019. Печать. п. 179.[страница нужна ]
  20. ^ Кислотно-устойчивое окрашивание - принцип, процедура, интерпретация и примеры. Сагар Арьял, 8 мая 2015 г.
  21. ^ «Онлайн-микробиологические заметки». Онлайн-микробиологические заметки. Получено 2017-11-29.
  22. ^ «Дом - микробеонлайн». microbeonline.com. Получено 2017-11-29.
  23. ^ Кумар, Суриндер (2012). Учебник микробиологии. п. 315.
  24. ^ Эллис, RC; Л.А. Заброварный. (1993). «Более безопасный метод окрашивания кислотоустойчивых бацилл». Журнал клинической патологии. 46 (6): 559–560. Дои:10.1136 / jcp.46.6.559. ЧВК  501296. PMID  7687254.

Библиография

  • «Микробиология с заболеваниями по системам организма», Роберт В. Бауман, 2009 г., Pearson Education, Inc.

внешняя ссылка