Гистопатология - Histopathology - Wikipedia

Микрофотография показывая некроз полосы сокращения, гистопатологическое открытие инфаркт миокарда (острое сердечно-сосудистое заболевание).

Гистопатология (соединение трех Греческий слова: ἱστός histos "ткань", πάθος пафос "страдание" и -λογία -логия "изучение") относится к микроскопический экспертиза ткань с целью изучения проявлений болезнь. В частности, в клинической медицине гистопатология относится к исследованию биопсия или хирургический образец по патолог, после того, как образец был обработан и гистологические срезы были помещены на предметные стекла. В отличие, цитопатология исследует свободные клетки или тканевые микрофрагменты (как «клеточные блоки»).

Сбор тканей

Гистопатологическое исследование тканей начинается с хирургия, биопсия, или же вскрытие. Ткань удаляется из тело или же растение, а затем, часто после экспертного вскрытия в свежем состоянии, помещается в фиксатор который стабилизирует ткани, чтобы предотвратить разлагаться. Самый распространенный фиксатор - это формалин (10% нейтральный буфер формальдегид в воде).

Подготовка к гистологии

Затем ткань подготавливается для просмотра под микроскоп с использованием химической фиксации или замороженного участка.

Если предоставляется большая выборка, например После хирургической процедуры патологоанатом смотрит на образец ткани и выбирает ту часть, которая с наибольшей вероятностью даст полезный и точный диагноз - эта часть удаляется для исследования в процессе, обычно известном как сбор или разделение. Образцы большего размера вырезаются для правильного размещения их анатомических структур в кассете. Некоторые образцы (особенно биопсии) могут подвергнуться агар предварительная заливка для обеспечения правильной ориентации ткани в кассете, затем в блоке и затем на предметном стекле для диагностической микроскопии. Затем его помещают в пластиковую кассету для большей части остального процесса.[нужна цитата ]

Химическая фиксация

Помимо формалина использовались и другие химические фиксаторы. Но с появлением иммуногистохимия (ИГХ) окрашивание и диагностика молекулярная патология При тестировании этих образцов формалин стал стандартным химическим фиксатором в диагностической гистопатологии человека. Время фиксации для очень маленьких образцов короче, и существуют стандарты в диагностической гистопатологии человека.

Обработка

Вода удаляется из пробы поэтапно за счет увеличения концентрации алкоголь.[1] Ксилол используется на последней стадии дегидратации вместо спирта - это потому, что воск, используемый на следующей стадии, растворим в ксилол где он не находится в спирте, позволяющем воску проникать (проникать) в образец.[1] Этот процесс обычно автоматизирован и выполняется в одночасье. Образец, пропитанный воском, затем переносят в отдельный контейнер для заделки образца (обычно металлический). Наконец, вокруг образца в контейнере вводится расплавленный воск, который охлаждается до затвердевания, чтобы поместить его в восковой блок.[1] Этот процесс необходим для получения правильно ориентированного образца, достаточно прочного для получения тонкого микротом раздел (ы) слайда.

После того, как блок, залитый воском, будет готов, из него будут вырезаны секции и обычно помещаются в плавание на поверхности водяной ванны, которая распределяет секцию. Обычно это делается вручную и представляет собой квалифицированную работу (гистотехнолог), когда персонал лаборатории выбирает, какие части восковой ленты микротома с образцом помещать на предметные стекла. Несколько слайдов обычно готовятся на разных уровнях блока. После этого установленное предметное стекло тонкого среза окрашивают и на него надевают защитное покровное стекло. Для обычных пятен обычно используется автоматический процесс; но редко используемые пятна часто наносятся вручную.[1]

Обработка замороженного среза

Второй метод обработки гистологии называется замороженный участок обработка. Это высокотехнологичный научный метод, выполняемый обученным ученым-гистологом. В этом методе ткань замораживается и тонко нарезается с помощью микротом установленный в холодильной установке ниже точки замерзания, называемой криостат. Тонкие замороженные срезы помещают на предметное стекло, сразу и на короткое время фиксируют в жидком фиксаторе и окрашивают с использованием тех же методов окрашивания, что и традиционные срезы, залитые воском. Преимущества этого метода - быстрое время обработки, меньшая потребность в оборудовании и меньшая потребность в вентиляции в лаборатории. Недостаток - плохое качество финального слайда. Он используется при интраоперационной патологии для определений, которые могут помочь в выборе следующего шага операции во время этого хирургического сеанса (например, для предварительного определения четкости край резекции опухоли во время операции).

Окрашивание обработанных гистологических препаратов

Это может быть сделано для слайдов, обработанных химической фиксацией, или для слайдов замороженных срезов. Чтобы увидеть ткань под микроскопом, срезы окрашивают одним или несколькими пигменты. Целью окрашивания является выявление клеточных компонентов; Контрастные пятна используются для обеспечения контраста.

Наиболее часто используемые красители в гистологии представляют собой комбинацию гематоксилин и эозин (часто сокращенно H&E). Гематоксилин используется для окрашивания ядра синий, в то время как эозин окрашивает цитоплазма и внеклеточный матрикс соединительной ткани розовый. Существуют сотни различных других методов, которые используются для выборочного окрашивания клеток. Другие соединения, используемые для окрашивания срезов тканей, включают: сафранин, Масло Красное О, конго красный, соли серебра и искусственные красители. Гистохимия относится к науке об использовании химических реакций между лабораторными химическими веществами и компонентами тканей. Обычно применяемый гистохимический метод - это Берлинская лазурь Перлза реакция, используемая для демонстрации отложений железа при таких заболеваниях, как Гемохроматоз.[2]

Недавно, антитела были использованы для окрашивания определенных белки, липиды и углеводы. Называется иммуногистохимия, этот метод значительно расширил возможности специфической идентификации категорий клеток под микроскопом. Другие передовые методы включают: гибридизация in situ определить конкретные ДНК или же РНК молекулы. Эти методы окрашивания антител часто требуют использования гистологии замороженных срезов. Эти процедуры, описанные выше, также выполняются в лаборатории под тщательным наблюдением и точностью квалифицированным медицинским лабораторным ученым (гистологом). Цифровые камеры все чаще используются для получения гистопатологических изображений.

Интерпретация

Гистологические препараты исследуют под микроскопом с помощью патолог, квалифицированный врач, прошедший признанную программу обучения. Этот медицинский диагноз формулируется как отчет о патологии описание гистологических находок и заключения патолога. В случае рак, это представляет тканевая диагностика требуется для большинства протоколов лечения. При удалении рак, патологоанатом укажет, хирургический край очищается или вовлекается (остаточный рак остается позади). Это делается с помощью хлебец или же CCPDMA способ обработки. Микроскопические визуальные артефакты потенциально может привести к неправильной диагностике образцов.

При инфаркте миокарда

После инфаркт миокарда (сердечный приступ), гистопатология не наблюдается в первые ~ 30 минут. Единственный возможный признак первых 4 часов - это волнистость волокон на границе. Позже, однако, коагуляционный некроз начинается с отека и кровотечения. Через 12 часов можно увидеть кариопикноз и гиперэозинофилия миоцитов с некрозом полосы сокращения по краям, а также началом инфильтрации нейтрофилов. Через 1–3 дня продолжается коагуляционный некроз с потерей ядер и бороздок и повышенной инфильтрацией нейтрофилов в интерстиций. До конца первой недели после инфаркта начинается распад мертвых мышечных волокон, некроз нейтрофилов и начало удаления мертвых клеток макрофагами на границе, что увеличивает количество последующих дней. Через неделю также начинается формирование грануляционной ткани по краям, которая созревает в течение следующего месяца, увеличивается отложение коллагена и снижается клеточность до рубцевание миокарда полностью созревает примерно через 2 месяца после инфаркта.[3]

Смотрите также

Рекомендации

  1. ^ а б c d «Добро пожаловать, mwap.co.uk - Justhost.com».
  2. ^ «Perl - Red Blood Cell - Окрашивание». Scribd.
  3. ^ Глава 11 в: Митчелл, Ричард Шеппард; Кумар, Винай; Аббас, Абул К .; Фаусто, Нельсон (2007). Базовая патология Роббинса. Филадельфия: Сондерс. ISBN  978-1-4160-2973-1. 8-е издание.

внешняя ссылка