ДНК-полимераза Pwo - Pwo DNA polymerase

Смотрите также: Полимераза Taq, ДНК-полимераза Pfu, Вент-ДНК-полимераза, и Варианты ПЦР
ДНК-полимераза
Идентификаторы
ОрганизмPyrococcus woesei
Символpol
UniProtP61876

Полимераза Pwo - термостабильная ДНК-полимераза используется для полимеразной цепной реакции. Аббревиатура расшифровывается как Pyrococcus woesei, термофильный археон, из которого была выделена данная полимераза. Эта полимераза ломается при достижении ошибочного урацил в ДНК из удлинения цепи и благодаря этой функции опережения считывания синтезируется меньше дефектных клонов ДНК. Его используют намного меньше, чем обычные полимеразы Taq или Pfu.[1] Эта ДНК-полимераза, как и другие ДНК-полимеразы из архебактерий, чувствительна к остаткам урацила в ДНК и сильно ингибируется dUTP или остатками урацила в ДНК. Другие полимеразы этого класса: Pfu, Vent, Deep Vent и Pfx.[2] Ингибирование этого класса термостабильных ДНК-полимераз ограничивает их использование в некоторых приложениях ПЦР, то есть в применении dUTP для предотвращения переносимого загрязнения, а также в применении с dU-содержащими праймерами, такими как методы клонирования без лигазы или сайт-направленный мутагенез с использованием UNG.[3]

Рекомендации

  1. ^ Гасеми А., Салманян А.Х., Садегифард Н., Салариан А.А., Голи М.К. (сентябрь 2011 г.). «Клонирование, экспрессия и очистка полимеразы Pwo из Pyrococcus woesei». Иранский журнал микробиологии. 3 (3): 118–22. ЧВК  3279813. PMID  22347593.
  2. ^ Ласкен Р.С., Шустер Д.М., Рашчиан А. (июль 1996 г.). «ДНК-полимеразы архебактерий прочно связывают урацил-содержащую ДНК». Журнал биологической химии. 271 (30): 17692–6. Дои:10.1074 / jbc.271.30.17692. PMID  8663453.
  3. ^ Раштчян А., Торнтон К. Г., Хайдекер Г. (ноябрь 1992 г.). «Новый метод сайт-направленного мутагенеза с использованием ПЦР и урацил-ДНК-гликозилазы». Методы и приложения ПЦР. 2 (2): 124–30. Дои:10.1101 / gr.2.2.124. PMID  1477668.