Индуцированная плюрипотентная стволовая клетка - Induced pluripotent stem cell - Wikipedia

Колонии iPS-клеток человека. Веретенообразные клетки на заднем плане - это клетки фибробластов мыши. Только клетки, составляющие центральную колонию, являются iPS-клетками человека.

Индуцированные плюрипотентные стволовые клетки (также известный как ИПС клетки или ИПСК) являются разновидностью плюрипотентный стволовая клетка которые могут быть созданы непосредственно из Соматическая клетка. Технология iPSC была впервые разработана Шинья Яманака Лаборатория в Киото, Япония, которые в 2006 году показали, что введение четырех специфических генов (названных Мой с, 3 октября / 4, Sox2 и Klf4 ) кодировка факторы транскрипции может преобразовывать соматические клетки в плюрипотентные стволовые клетки.[1] Он был удостоен Нобелевской премии 2012 года вместе с сэром Джон Гэрдон «за открытие, что зрелые клетки можно перепрограммировать, чтобы стать плюрипотентными».[2]

Плюрипотентные стволовые клетки являются многообещающими в области регенеративная медицина.[3] Поскольку они могут размножаться бесконечно, а также давать начало любому другому типу клеток в организме (например, нейронам, клеткам сердца, поджелудочной железы и печени), они представляют собой единый источник клеток, который можно использовать для замены тех, которые были потеряны из-за повреждений. или болезнь.

Самый известный тип плюрипотентных стволовых клеток - это эмбриональная стволовая клетка. Однако, поскольку создание эмбриональных стволовых клеток включает разрушение (или, по крайней мере, манипуляции)[4] Что касается эмбриона на преимплантационной стадии, то их использование вызвало много споров. Соответствующие пациенту линии эмбриональных стволовых клеток теперь могут быть получены с помощью SCNT.

Поскольку ИПСК могут быть получены непосредственно из тканей взрослого человека, они не только обходят потребность в эмбрионах, но и могут быть созданы индивидуально для каждого пациента, что означает, что у каждого человека может быть своя собственная линия плюрипотентных стволовых клеток. Эти неограниченные запасы аутологичный клетки могут быть использованы для создания трансплантатов без риска иммунного отторжения. Хотя технология ИПСК еще не достигла стадии, на которой терапевтические трансплантаты считаются безопасными, ИПСК с готовностью используются в персонализированных усилиях по поиску лекарств и пониманию специфических для пациента основ заболевания.[5]

Яманака назвал ИПСК строчной буквой «i» из-за популярности iPod и другие товары.[6][7][8][9]

Производство

Смотрите также: Перепрограммирование
Схема генерации индуцированных плюрипотентных стволовых (IPS) клеток. (1) Выделить и культивировать донорские клетки. (2) Трансдукция генов, связанных со стволовыми клетками, в клетки вирусными векторами. Красные клетки указывают на клетки, экспрессирующие экзогенные гены. (3) Собирают и культивируют клетки в соответствии с ES клетка культура с использованием митотически инактивированных питающие ячейки (светло-серый). (4) Небольшая часть трансфицированных клеток становится iPS клетки и генерируют ES-подобные колонии.

ИПСК обычно получают путем введения продуктов определенных наборов генов, связанных с плюрипотентностью, или «факторов перепрограммирования» в данный тип клеток. Исходный набор факторов перепрограммирования (также называемых факторами Яманаки) - это факторы транскрипции 4 октября (Pou5f1), Sox2, cMyc, и Klf4. Хотя эта комбинация является наиболее стандартной для получения ИПСК, каждый из факторов может быть функционально заменен родственными факторами транскрипции, миРНК, небольшие молекулы или даже не связанные гены, такие как спецификаторы происхождения.[10]

Получение ИПСК обычно является медленным и неэффективным процессом, занимающим 1-2 недели для клеток мыши и 3-4 недели для клеток человека с эффективностью около 0,01-0,1%. Однако были достигнуты значительные успехи в повышении эффективности и времени, необходимого для получения ИПСК. После введения факторов репрограммирования клетки начинают формировать колонии, похожие на плюрипотентные стволовые клетки, которые можно выделить на основании их морфологии, условий, которые выбирают для их роста, или посредством экспрессии поверхностных маркеров или репортерные гены.

Первое поколение (мышь)

Индуцированные плюрипотентные стволовые клетки были впервые созданы Шинья Яманака команда в Киотский университет, Япония, 2006 г.[1] Они выдвинули гипотезу, что гены, важные для функции эмбриональных стволовых клеток (ЭСК), могут вызывать эмбриональное состояние взрослых клеток. Они выбрали двадцать четыре гена, ранее идентифицированных как важные в ESC, и использовали ретровирусы для доставки этих генов мышам. фибробласты. Фибробласты были сконструированы таким образом, чтобы любые клетки, реактивирующие специфический ген ESC, Fbx15, могут быть выделены с помощью выбора антибиотиков.

После доставки всех 24 факторов появились ESC-подобные колонии, которые реактивировали репортер Fbx15 и могли размножаться бесконечно. Чтобы идентифицировать гены, необходимые для перепрограммирования, исследователи удаляли по одному фактору из двадцати четырех. С помощью этого процесса они идентифицировали четыре фактора, Oct4, Sox2, cMyc и Klf4, каждый из которых был необходим и вместе достаточен для образования ESC-подобных колоний при отборе для реактивации Fbx15.

Второе поколение (мышь)

В июне 2007 г. три отдельные исследовательские группы, включая группу Яманаки, Гарвард /Калифорнийский университет в Лос-Анджелесе сотрудничество, и группа в Массачусетский технологический институт, опубликовали исследования, которые существенно улучшили подход к репрограммированию и привели к появлению ИПСК, неотличимых от ЭСК. В отличие от ИПСК первого поколения, эти ИПСК второго поколения давали жизнеспособных химерных мышей и вносили вклад в зародышевую линию мыши, тем самым достигая «золотого стандарта» для плюрипотентных стволовых клеток.

Эти ИПСК второго поколения были получены из фибробластов мыши путем опосредованной ретровирусами экспрессии тех же четырех факторов транскрипции (Oct4, Sox2, cMyc, Klf4). Однако вместо использования Fbx15 для отбора плюрипотентных клеток исследователи использовали Наног, ген, который является функционально важным для ESC. Используя эту другую стратегию, исследователи создали ИПСК, функционально идентичные ЭСК.[11][12][13][14]

Плюрипотентные стволовые клетки, индуцированные человеком

Генерация из человеческих фибробластов

О перепрограммировании человеческих клеток в ИПСК сообщили в ноябре 2007 года две независимые исследовательские группы: Шинья Яманака Киотского университета, Япония, который первым разработал оригинальный метод ИПСК, и Джеймс Томсон из Университет Висконсин-Мэдисон кто первым получил эмбриональные стволовые клетки человека. Используя тот же принцип, что и при репрограммировании мышей, группа Яманаки успешно трансформировала человеческие фибробласты в ИПСК с теми же четырьмя ключевыми генами, Oct4, Sox2, Klf4 и cMyc, используя ретровирусный система,[15] в то время как Томсон и его коллеги использовали другой набор факторов, Oct4, Sox2, Nanog и Lin28, используя лентивирусный система.[16]

Генерация из дополнительных типов клеток

Получение фибробластов для производства ИПСК включает биопсию кожи, и были предприняты попытки идентифицировать более легкодоступные типы клеток.[17][18] В 2008 году ИПСК были получены из кератиноцитов человека, которые можно было получить из одного выщипывания волос.[19][20] В 2010 году ИПСК были получены из клеток периферической крови,[21][22] а в 2012 году ИПСК были изготовлены из почечных эпителиальных клеток в моче.[23]

Другие соображения относительно исходного типа клеток включают мутационную нагрузку (например, клетки кожи могут нести больше мутаций из-за воздействия ультрафиолета),[17][18] время, необходимое для увеличения популяции стартовых клеток,[17] и способность дифференцироваться в клетки данного типа.[24]

Гены, используемые для производства ИПСК

[нужна цитата ]

Генерация iPS-клеток в решающей степени зависит от факторы транскрипции используется для индукции.

3 октября / 4 октября и некоторые продукты Семейство генов Sox (Sox1, Sox2, Sox3 и Sox15) были идентифицированы как важные регуляторы транскрипции, участвующие в процессе индукции, отсутствие которых делает индукцию невозможной. Однако дополнительные гены, в том числе некоторые представители Семья Klf (Klf1, Klf2, Klf4 и Klf5), Семья Myc (c-myc, L-myc и N-myc), Наног, и LIN28, были определены для повышения эффективности индукции.

  • 3 октября / 4 октября (Pou5f1) Oct-3/4 - один из семейства факторы транскрипции октамера ("Oct"), и играет решающую роль в поддержании плюрипотентности. Отсутствие 3/4 октября в 3/4 октября+ клетки, такие как бластомеры и эмбриональные стволовые клетки, приводит к спонтанным трофобласт дифференцировка и присутствие Oct-3/4, таким образом, приводит к плюрипотентности и потенциалу дифференцировки эмбриональных стволовых клеток. Различные другие гены семейства "Oct", включая близких родственников Oct-3/4, 1 октября и 6 октября, не вызывают индукцию, тем самым демонстрируя исключительность Oct-3/4 для процесса индукции. Однако команда, возглавляемая Хансом Шелером (который открыл ген Oct4 еще в 1989 году), показала, что избыточная экспрессия Oct4 во время репрограммирования вызывает эпигенетические изменения, ухудшающие качество ИПСК. По сравнению с OSKM (Oct4, Sox2, Klf4 и c-Myc) новое перепрограммирование SKM (Sox2, Klf4 и c-Myc) генерирует ИПСК с потенциалом развития, эквивалентным эмбриональная стволовая клетка, что определяется их способностью генерировать мышей, полностью содержащих ИПСК, с помощью комплементация тетраплоидного эмбриона.[25][26]
  • Семья Сокс: Семейство факторов транскрипции Sox ​​связано с поддержанием плюрипотентности, аналогичной Oct-3/4, хотя оно связано с мультипотентными и унипотентными стволовыми клетками в отличие от Oct-3/4, который экспрессируется исключительно в плюрипотентных стволовых клетках. Пока Sox2 был исходным геном, использованным для индукции Яманака и др., Яениш и др. и Томсоном и др., было обнаружено, что другие факторы транскрипции в семействе Sox также работают в процессе индукции. Sox1 дает iPS-клетки с такой же эффективностью, как Sox2, и гены Sox3, Sox15, и Sox18 также генерируют ячейки iPS, хотя и с меньшей эффективностью.
  • Семья Klf: Klf4 семейства транскрипционных факторов Klf был первоначально идентифицирован Yamanaka et al. и подтверждено Jaenisch et al. как фактор для генерации iPS-клеток мыши, что было продемонстрировано Yamanaka et al. как фактор генерации iPS-клеток человека. Однако Thomson et al. сообщили, что Klf4 не нужен для генерации человеческих iPS-клеток и фактически не может генерировать человеческие iPS-клетки. Klf2 и Klf4 оказались факторами, способными генерировать iPS-клетки, и родственные гены Klf1 и Klf5 сделал то же самое, хотя и с меньшей эффективностью.
  • Семья Myc: Семейство факторов транскрипции Myc протоонкогены причастен к раку. Яманака и др. и Jaenisch et al. продемонстрировали, что c-myc является фактором, участвующим в генерации iPS-клеток мыши, а Yamanaka et al. продемонстрировали, что это фактор, участвующий в генерации iPS-клеток человека. Однако Thomson et al., Yamanaka et al. Использование семейства генов «myc» для индукции iPS-клеток вызывает беспокойство из-за возможности использования iPS-клеток в качестве клинических методов лечения, поскольку у 25% мышей, которым трансплантировали c-myc-индуцированные iPS-клетки, развились летальные исходы. тератомы. N-myc и L-myc было идентифицировано, чтобы индуцировать вместо c-myc с аналогичной эффективностью.
  • Наног: В эмбриональных стволовых клетках Nanog, наряду с Oct-3/4 и Sox2, необходим для обеспечения плюрипотентности. Поэтому было удивительно, когда Яманака и др. сообщили, что Nanog не нужен для индукции, хотя Thomson et al. сообщил, что можно генерировать iPS-клетки с помощью Nanog в качестве одного из факторов.
  • LIN28: LIN28 - это мРНК-связывающий белок[27] выражено в эмбриональные стволовые клетки и клетки эмбриональной карциномы, связанные с дифференцировкой и пролиферацией. Thomson et al. продемонстрировал, что LIN28 является фактором генерации ИПСК в сочетании с OCT4, SOX2 и NANOG.[16]
  • Glis1: Glis1 - это фактор транскрипции, который можно использовать с Oct-3/4, Sox2 и Klf4 для индукции плюрипотентности. Он дает множество преимуществ при использовании вместо C-myc.[28]

Проблемы перепрограммирования клеток до плюрипотентности

Хотя методы, впервые разработанные Яманакой и другими, продемонстрировали, что взрослые клетки могут быть перепрограммированы в iPS-клетки, с этой технологией все еще связаны проблемы:

  1. Низкая эффективность: в целом преобразование в ячейки iPS было невероятно низким. Например, скорость, с которой соматический клетки были перепрограммированы в iPS-клетки в исходном исследовании Яманаки на мышах - 0,01–0,1%.[1] Низкий уровень эффективности может отражать потребность в точном времени, балансе и абсолютных уровнях экспрессии генов репрограммирования. Это также может указывать на необходимость редких генетических и / или эпигенетических изменений в исходной соматический популяция клеток или в пролонгированной культуре. Однако недавно был найден способ эффективного перепрограммирования, который потребовал подавления нуклеосома ремоделирование и деацетилирование (NuRD ) сложный. Сверхэкспрессия Mbd3, субъединицы NuRD, подавляет индукцию ИПСК. Истощение Mbd3, с другой стороны, улучшает эффективность перепрограммирования,[29] что приводит к детерминированному и синхронизированному перепрограммированию iPS-клеток (почти 100% эффективность в течение семи дней для клеток мыши и человека).[30]
  2. Геномная вставка: геномная интеграция факторы транскрипции ограничивает полезность фактор транскрипции подход из-за риска вставки мутаций в геном клетки-мишени.[31] Распространенной стратегией предотвращения вставки генома было использование другого вектора для ввода. Плазмиды, аденовирусы, и транспозон все векторы были изучены, но они часто сопровождаются меньшей пропускной способностью.[32][33][34]
  3. Онкогенность: в зависимости от используемых методов перепрограммирование взрослых клеток для получения ИПСК может создавать значительные риски, которые могут ограничить их использование у людей. Например, если вирусы используются для геномного изменения клеток, экспрессия онкогены (гены, вызывающие рак) потенциально могут быть запущены. В феврале 2008 года ученые объявили об открытии метода, который может удалять онкогены после индукции плюрипотентности, тем самым увеличивая потенциальное использование iPS-клеток при заболеваниях человека.[35] В другом исследовании Яманака сообщил, что можно создавать ИПСК без онкогена c-Myc. Процесс занял больше времени и был не таким эффективным, но в результате химеры не заболели раком.[36] Инактивация или делеция супрессора опухолей p53, который является ключевым регулятором рака, значительно увеличивает эффективность репрограммирования.[37] Таким образом, кажется, существует компромисс между эффективностью репрограммирования и образованием опухоли.
  4. Неполное перепрограммирование: перепрограммирование также сталкивается с проблемой полноты. Это особенно сложно, потому что общегеномные эпигенетический код необходимо переформатировать в ячейку целевого типа, чтобы полностью перепрограммировать ячейку. Однако трем отдельным группам удалось обнаружить эмбриональные фибробласт (MEF) -производные iPS-клетки, которые можно вводить в тетраплоид бластоцисты и привело к живорождению мышей, полностью полученных из iPS-клеток, что положило конец дискуссии об эквивалентности эмбриональных стволовых клеток (ESC) и iPS в отношении плюрипотентности.[38]

В таблице справа приведены ключевые стратегии и методы, использованные для разработки iPS-клеток в первые пять лет после прорыва Яманаки и др. В 2006 году. Строки аналогичных цветов представляют исследования, в которых использовались аналогичные стратегии перепрограммирования.

На этой временной шкале обобщены ключевые стратегии и методы, использованные для разработки iPS-клеток в первые пять лет после прорыва Яманаки и др. В 2006 году. Строки схожих цветов представляют исследования, в которых использовались аналогичные стратегии перепрограммирования.

Альтернативные подходы

Имитация факторов транскрипции с помощью химикатов

Одна из основных стратегий избежания проблем (1) и (2) заключалась в использовании маленькие молекулы которые могут имитировать эффекты факторов транскрипции. Эти соединения могут компенсировать фактор перепрограммирования, который не действует эффективно на геном или не может перепрограммировать по другой причине; таким образом они повышают эффективность перепрограммирования. Они также избегают проблемы геномной интеграции, которая в некоторых случаях способствует генезу опухоли. Ключевые исследования с использованием такой стратегии были проведены в 2008 году. Melton et al. изучал эффекты гистоновая деацетилаза (HDAC) ингибитор вальпроевой кислоты. Они обнаружили, что это увеличивает эффективность перепрограммирования в 100 раз (по сравнению с традиционным методом Яманаки. фактор транскрипции метод).[39] Исследователи предположили, что это соединение имитирует передачу сигналов, которая обычно вызывается фактор транскрипции c-Myc. Механизм компенсации аналогичного типа был предложен для имитации эффектов Sox2. В 2008 году Динг и др. использовали ингибирование гистон-метилтрансферазы (HMT) с помощью BIX-01294 в сочетании с активацией кальциевые каналы в плазматической мембране с целью повышения эффективности репрограммирования.[40] Deng et al. из Пекинского университета сообщил в июле 2013 года, что индуцированные плюрипотентные стволовые клетки могут быть созданы без каких-либо генетических модификаций. Они использовали коктейль из семи низкомолекулярных соединений, включая DZNep, чтобы индуцировать соматические клетки мыши в стволовые клетки, которые они назвали клетками CiPS, с эффективностью - 0,2% - сравнимой с эффективностью использования стандартных методов получения iPSC. Клетки CiPS были введены в развивающиеся мышиные эмбрионы, и было обнаружено, что они вносят вклад во все основные типы клеток, что доказывает их плюрипотентность.[41][42]

Ding et al. продемонстрировал альтернативу фактор транскрипции перепрограммирование с использованием химикатов, подобных лекарствам. Изучая МЕТ (мезенхимально-эпителиальный переход ) процесс, в котором фибробласты переводятся в состояние, подобное стволовым клеткам, группа Динга идентифицировала два химических вещества - ингибитор ALK5 SB431412 и ингибитор MEK (митоген-активируемую протеинкиназу) PD0325901 - которые, как было обнаружено, увеличивают эффективность классического генетического метода на 100%. складывать. Добавление третьего соединения, которое, как известно, участвует в пути выживания клеток, Тиазовивин дополнительно увеличивает эффективность в 200 раз. Использование комбинации этих трех соединений также уменьшило процесс перепрограммирования человеческих фибробластов с четырех до двух недель.[43][44]

В апреле 2009 года было продемонстрировано, что создание iPS-клеток возможно без какого-либо генетического изменения взрослой клетки: повторная обработка клеток определенными белками, направленными в клетки через полиаргининовые якоря было достаточно, чтобы вызвать плюрипотентность.[45] Акроним для этих ИПСК: piPSC (индуцированные белками плюрипотентные стволовые клетки).

Альтернативные векторы

Еще одна ключевая стратегия предотвращения таких проблем, как генез опухоли и низкая пропускная способность, заключалась в использовании альтернативных форм векторов: аденовирус, плазмиды и голая ДНК и / или белковые соединения.

В 2008 году Hochedlinger et al. использовал аденовирус перевезти необходимые четыре факторы транскрипции в ДНК клеток кожи и печени мышей, в результате чего образуются клетки, идентичные ЭСК. В аденовирус отличается от других векторов, таких как вирусы и ретровирусы, потому что он не включает в себя какие-либо собственные гены в целевом хозяине и избегает возможности инсерционного мутагенеза.[40] В 2009 году Freed et al. продемонстрировали успешное перепрограммирование человеческих фибробластов в iPS-клетки.[46] Еще одно преимущество использования аденовирусы в том, что им нужно присутствовать только на короткое время, чтобы произошло эффективное перепрограммирование.

Также в 2008 году Яманака и др. обнаружили, что они могут переносить четыре необходимых гена с помощью плазмиды.[32] Группа Яманака успешно перепрограммировала мышиные клетки путем трансфекции двумя плазмидными конструкциями, несущими факторы репрограммирования; первая плазмида экспрессировала c-Myc, а вторая - три других фактора (4 октября, Klf4 и Sox2 ). Хотя плазмидные методы избегают вирусов, они все же требуют генов, способствующих развитию рака, для выполнения репрограммирования. Другой основной проблемой этих методов является то, что они, как правило, намного менее эффективны по сравнению с ретровирусными методами. Кроме того, трансфицированные плазмиды было показано, что они интегрируются в геном хозяина и поэтому все еще представляют риск инсерционного мутагенеза. Поскольку неретровирусные подходы продемонстрировали такие низкие уровни эффективности, исследователи попытались эффективно спасти эту технику с помощью так называемого Система транспозонов PiggyBac. Несколько исследований продемонстрировали, что эта система может эффективно доставлять ключевые факторы перепрограммирования, не оставляя следов мутаций в геноме клетки-хозяина. В Система транспозонов PiggyBac включает повторное вырезание экзогенных генов, что устраняет проблему инсерционного мутагенеза.[нужна цитата ]

Обретение плюрипотентности, инициированное стимулом

Основная статья: Обретение плюрипотентности, вызванное стимулом

В январе 2014 года были опубликованы две статьи, в которых утверждалось, что тип плюрипотентных стволовых клеток можно получить, подвергая клетки определенным типам стресса (бактериальный токсин, низкий pH 5,7 или физическое сжатие); полученные клетки были названы клетками STAP, для инициируемое стимулом приобретение плюрипотентности.[47]

В связи с трудностями, возникшими в других лабораториях при воспроизведении результатов неожиданного исследования, в марте 2014 года один из соавторов призвал отозвать статьи.[48] 4 июня 2014 г. ведущий автор, Обоката согласился отозвать оба документа [49] после того, как было установлено, что она совершила «ненадлежащее поведение в исследовательской сфере», как было установлено RIKEN 1 апреля 2014 г.[50]

Молекулы РНК

МикроРНК представляют собой короткие молекулы РНК, которые связываются с комплементарными последовательностями информационной РНК и блокируют экспрессию гена. Измерение вариаций экспрессии микроРНК в iPS-клетках можно использовать для прогнозирования их потенциала дифференцировки.[51] Добавление микроРНК также можно использовать для увеличения потенциала ИПС. Было предложено несколько механизмов.[51] ES-специфичные для клеток микроРНК молекулы (такие как miR-291, miR-294 и miR-295) повышают эффективность индуцированной плюрипотентности, действуя ниже c-Myc.[52] микроРНК может также блокировать экспрессию репрессоров четырех факторов транскрипции Яманаки, и могут существовать дополнительные механизмы, индуцирующие перепрограммирование даже в отсутствие добавленных экзогенных факторов транскрипции.[51]

Личность

Три клетки / ткани зародышевой линии, дифференцированные от ИПСК: нейроны (эктодерма ), хрящ (мягкая кость, мезодерма ) и бокаловидные клетки в кишечнике (энтодерма).

Индуцированные плюрипотентные стволовые клетки похожи на естественные плюрипотентные стволовые клетки, такие как эмбриональные стволовые (ЭС) клетки, во многих аспектах, таких как экспрессия определенных генов и белков стволовых клеток, метилирование хроматина шаблоны, время удвоения, эмбриоидное тело формирование тератома формирование, жизнеспособный химера формирование, активность и дифференцируемость, но полная степень их связи с естественными плюрипотентными стволовыми клетками все еще оценивается.[1]

Экспрессия генов и геном в целом H3K4me3 и H3K27me3 оказались чрезвычайно похожими между ES- и iPS-клетками.[53][нужна цитата ] Полученные ИПСК были удивительно похожи на естественно изолированные плюрипотентные стволовые клетки (такие как мышиные и человеческие эмбриональные стволовые клетки, mESCs и hESCs соответственно) в следующих отношениях, тем самым подтверждая идентичность, подлинность и плюрипотентность ИПСК по отношению к естественно изолированным плюрипотентным стволовым клеткам:

  • Клеточные биологические свойства
    • Морфология: ИПСК морфологически сходны с ЭСК. Каждая ячейка имела круглую форму, большую ядрышко и скудный цитоплазма. Колонии ИПСК также были похожи на колонии ЭСК. ИПСК человека образовывали плоские, плотно упакованные колонии с острыми краями, подобные hESC, а ИПСК мыши образовывали колонии, подобные mESC, менее плоские и более агрегированные, чем колонии hESC.
    • Свойства роста: время удвоения и митотический активность являются краеугольными камнями ESC, поскольку стволовые клетки должны самообновляться как часть их определения. ИПСК были митотически активными, активно самообновлялись, пролиферировали и делились со скоростью, равной ESC.
    • Маркеры стволовых клеток: ИПСК экспрессировали антигенные маркеры клеточной поверхности, экспрессируемые на ESC. ИПСК человека экспрессировали маркеры, специфичные для hESC, включая SSEA-3, SSEA-4, TRA-1-60, TRA-1-81, TRA-2-49 / 6E и Nanog. ИПСК мыши экспрессировали SSEA-1, но не SSEA-3 или SSEA-4, как и mESC.
    • Гены стволовых клеток: ИПСК экспрессировали гены, экспрессируемые в недифференцированных ЭСК, включая Oct-3/4, Sox2, Nanog, GDF3, REX1, FGF4, ESG1, DPPA2, DPPA4 и hTERT.
    • Теломеразная активность: Теломеразы необходимы для поддержания деления клеток, не ограниченного Лимит Хейфлика ~ 50 делений клеток. hESC экспрессируют высокую активность теломеразы для поддержания самообновления и пролиферации, а iPSC также демонстрируют высокую активность теломеразы и экспрессируют hTERT (человеческий теломераза обратная транскриптаза ), необходимый компонент белкового комплекса теломеразы.
  • Плюрипотентность: ИПСК были способны дифференцироваться аналогично ЭСК в полностью дифференцированные ткани.
    • Нейронная дифференциация: ИПСК были дифференцированы на нейроны, экспрессирующие βIII-тубулин, тирозингидроксилазу, AADC, DAT, ChAT, LMX1B и MAP2. Наличие катехоламин -ассоциированные ферменты могут указывать на то, что ИПСК, как и чЭСК, могут дифференцироваться в дофаминергический нейроны. Гены, связанные со стволовыми клетками, подавлялись после дифференцировки.
    • Сердечная дифференциация: ИПСК были дифференцированы на кардиомиоциты который самопроизвольно начал избивать. Кардиомиоциты экспрессировали TnTc, MEF2C, MYL2A, MYHCβ и NKX2.5. Гены, связанные со стволовыми клетками, подавлялись после дифференцировки.
    • Формирование тератомы: ИПСК, введенные в иммунодефицитный спонтанно образованные мыши тератомы через девять недель. Тератомы - это опухоли нескольких линий, содержащие ткань, полученную из трех ростковые отростки энтодерма, мезодерма и эктодерма; это отличается от других опухолей, которые обычно относятся только к одному типу клеток. Формирование тератомы - важный тест на плюрипотентность.
    • Эмбриоидное тело: hESCs в культуре спонтанно образуют шарообразные структуры, похожие на эмбрион, называемые "эмбриоидные тела ", которые состоят из ядра митотически активных и дифференцирующихся чЭСК и периферии полностью дифференцированных клеток из всех трех зародышевых листков. ИПСК также образуют эмбриоидные тела и имеют периферические дифференцированные клетки.
    • Химерные мыши: чЭСК естественным образом находятся во внутренней клеточной массе (эмбриобласт ) из бластоцисты, а в эмбриобласте дифференцируются в эмбрион, в то время как оболочка бластоцисты (трофобласт ) дифференцируется во внеэмбриональные ткани.Полый трофобласт не может образовать живой эмбрион, и поэтому эмбриональным стволовым клеткам внутри эмбриобласта необходимо дифференцироваться и сформировать эмбрион. ИПСК вводили микропипетка в трофобласт, и бластоциста была передана самкам-реципиентам. Химерный Были созданы живые детеныши мышей: мыши с производными ИПСК по всему телу с 10–90% химеризмом.
    • Тетраплоидное дополнение: iPS-клетки из эмбриональных фибробластов мыши, введенные в тетраплоидные бластоцисты (которые сами по себе могут образовывать только внеэмбриональные ткани), могут образовывать целых, нехимерных, фертильных мышей, хотя и с низкой вероятностью успеха.[54][55][56]
  • Эпигенетическое перепрограммирование
    • Деметилирование промотора: метилирование - это перенос метильной группы на основание ДНК, обычно перенос метильной группы на молекулу цитозина в сайте CpG (соседняя последовательность цитозина / гуанина). Широко распространенное метилирование гена препятствует выражение путем предотвращения активности экспрессионных белков или привлечения ферментов, которые мешают экспрессии. Таким образом, метилирование гена эффективно подавляет его, предотвращая транскрипцию. Промоторы генов, связанных с плюрипотентностью, включая Oct-3/4, Rex1 и Nanog, были деметилированы в ИПСК, демонстрируя их промоторную активность, а также активное продвижение и экспрессию генов, связанных с плюрипотентностью, в ИПСК.
    • Глобальное метилирование ДНК: iPS-клетки человека очень похожи на ES-клетки, по структуре которых цитозины находятся метилированный, больше, чем к любому другому типу клеток. Однако порядка тысячи сайтов показывают различия в нескольких линиях iPS-клеток. Половина из них похожа на линию соматических клеток, из которой были получены iPS-клетки, остальные являются iPSC-специфичными. Десятки регионов, которые мегабазы по размеру также были обнаружены, когда iPS-клетки не перепрограммированы до состояния ES-клеток.[57]
    • Деметилирование гистонов: Гистоны представляют собой компактные белки, структурно локализованные в последовательностях ДНК, которые могут влиять на их активность посредством различных модификаций, связанных с хроматином. Гистоны H3, связанные с Oct-3/4, Sox2 и Nanog, были деметилированы, что указывает на экспрессию Oct-3/4, Sox2 и Nanog.

Безопасность

  • Основная проблема потенциального клинического применения ИПСК - их склонность к образованию опухолей.[58] Как и ESC, ИПСК легко образуются тератома при введении мышам с иммунодефицитом. FDA считает образование тератом основным препятствием для регенеративной медицины на основе стволовых клеток.
  • Более недавнее исследование восстановления двигательной функции после травм спинного мозга у мышей показало, что после трансплантации мышам индуцированных человеком плюрипотентных стволовых клеток эти клетки дифференцировались в три нервные линии спинного мозга. Клетки стимулировали отрастание поврежденного спинного мозга, поддерживали миелинизацию и формировали синапсы. Эти положительные результаты наблюдались в течение более 112 дней после травмы спинного мозга без образования опухоли.[59] Тем не менее, последующее исследование той же группы показало, что отдельные клоны индуцированных человеком плюрипотентных стволовых клеток в конечном итоге образуют опухоли.[60]
  • Поскольку в настоящее время ИПСК могут быть получены только с высокой эффективностью с использованием модификаций, они, как правило, считаются менее безопасными и более канцерогенными, чем чЭСК. Все гены, которые, как было показано, способствуют образованию ИПСК, также так или иначе связаны с раком. Некоторые из генов являются известными онкогенами, включая членов семейства Myc. Несмотря на то, что исключение Myc по-прежнему допускает образование IPSC, эффективность снижается до 100 раз.
  • Негенетический метод получения ИПСК был продемонстрирован с использованием рекомбинантных белков, но его эффективность была довольно низкой.[45] Однако усовершенствования этой методологии, обеспечивающие более высокую эффективность, могут привести к производству более безопасных ИПСК. Другие подходы, такие как использование аденовируса или плазмид, обычно считаются более безопасными, чем ретровирусные методы.
  • Важной областью будущих исследований в области ИПСК является непосредственное тестирование онкогенности ИПСК с использованием методов, имитирующих подходы, которые будут использоваться для терапии регенеративной медицины. Такие исследования имеют решающее значение, поскольку ИПСК не только образуют тератому, но и мыши, полученные на основе ИПСК, имеют высокий уровень смертности от злокачественного рака.[61] В 2010 году в журнале Stem Cells была опубликована статья, в которой указывается, что iPS-клетки гораздо более туморогенны, чем ESC, что подтверждает мнение о том, что безопасность iPS-клеток является серьезной проблемой.[62]
  • Обеспокоенность относительно иммуногенности клеток IPS возникла в 2011 году, когда Zhou et al. провели исследование, включающее анализ образования тератомы, и продемонстрировали, что клетки IPS вырабатывают иммунный ответ, достаточно сильный, чтобы вызвать отторжение клеток. Однако, когда аналогичная процедура была проведена на генетически эквивалентных ES-клетках, Zhou et al. найденный тератомы, что указывало на то, что клетки переносились иммунной системой.[63] В 2013 году Араки и др. попытался воспроизвести вывод, полученный Zhou et al. используя другую процедуру. Они взяли клетки химеры, выращенной из клонов IPSC и эмбриона мыши, затем эту ткань трансплантировали в сингенный мышей. Они провели аналогичное испытание с использованием ES-клеток вместо клона IPSC и сравнили результаты. Результаты показывают, что не было значительной разницы в иммуногенном ответе, продуцируемом клетками IPS и клетками ES. Кроме того, Araki et al. сообщили о слабом иммуногенном ответе или его отсутствии для обеих клеточных линий.[64] Таким образом, Araki et al. не смог прийти к такому же выводу, как Zhou et al.

Недавние достижения и будущие задачи для безопасной клеточной терапии на основе ИПСК собраны в обзоре Okano et al.[65]

Медицинские исследования

Задача производства iPS-клеток продолжает оставаться сложной из-за шести проблем, упомянутых выше. Ключевой компромисс, который необходимо преодолеть, - это компромисс между эффективностью и геномной интеграцией. Большинство методов, которые не основываются на интеграции трансгенов, неэффективны, в то время как те, которые действительно полагаются на интеграцию трансгенов, сталкиваются с проблемами неполного репрограммирования и генеза опухоли, хотя было предпринято множество попыток и методов. Другой большой набор стратегий состоит в том, чтобы выполнить протеомную характеристику iPS-клеток.[56] Дальнейшие исследования и новые стратегии должны привести к оптимальным решениям пяти основных проблем. Один из подходов может попытаться объединить положительные атрибуты этих стратегий в чрезвычайно эффективную технику перепрограммирования клеток в iPS-клетки.

Другой подход - использование iPS-клеток, полученных от пациентов, для идентификации терапевтических препаратов, способных спасти фенотип. Например, клеточные линии iPS, полученные от пациентов с синдромом эктодермальной дисплазии (EEC), у которых стр. 63 ген мутирован, проявляет аномальные эпителиальные обязательства, которые можно частично устранить с помощью небольшого соединения.[66]

Моделирование заболеваний и разработка лекарств

Привлекательной особенностью iPS-клеток человека является способность получать их от взрослых пациентов для изучения клеточных основ заболеваний человека. Поскольку iPS-клетки являются самообновляющимися и плюрипотентными, они представляют собой теоретически неограниченный источник клеток, полученных от пациентов, которые могут быть превращены в клетки любого типа в организме. Это особенно важно, потому что многие другие типы клеток человека, полученные от пациентов, имеют тенденцию прекращать рост после нескольких пассажей в лабораторной культуре. iPS-клетки были созданы для лечения широкого спектра генетических заболеваний человека, включая общие нарушения, такие как синдром Дауна и поликистоз почек.[67][68] Во многих случаях ИПС-клетки, полученные от пациентов, обнаруживают клеточные дефекты, не наблюдаемые в ИПС-клетках здоровых пациентов, что дает представление о патофизиологии заболевания.[69] В 2012 году был создан международный совместный проект StemBANCC для создания коллекции линий iPS-клеток для скрининга лекарств для различных заболеваний. Управляется Оксфордский университет, в рамках проекта были объединены средства и ресурсы 10 фармацевтических компаний и 23 университетов. Цель состоит в том, чтобы создать библиотеку из 1500 клеточных линий iPS, которые будут использоваться на ранних этапах тестирования лекарств, обеспечивая имитацию среды болезни человека.[70] Кроме того, сочетание технологии hiPSC и генетически закодированных индикаторов напряжения и кальция обеспечило крупномасштабную и высокопроизводительную платформу для скрининга безопасности сердечно-сосудистых препаратов.[71][72]

Органный синтез

Доказательство концепции использования индуцированных плюрипотентных стволовых клеток (ИПСК) для создания человеческого органа для трансплантация сообщили исследователи из Японии. Человек 'печень почки (ИПСК-LB) были выращены из смеси трех разных видов стволовых клеток: гепатоциты (для функции печени), полученные от ИПСК; эндотелиальные стволовые клетки (для формирования подкладки кровеносный сосуд ) из пуповинная кровь; и мезенхимальные стволовые клетки (сформировать соединительная ткань ). Этот новый подход позволяет различным типам клеток самоорганизовываться в сложный орган, имитируя процесс развитие плода. После выращивания in vitro В течение нескольких дней зачатки печени пересаживали мышам, где «печень» быстро соединялась с кровеносными сосудами хозяина и продолжала расти. Что наиболее важно, он выполнял регулярные функции печени, включая метаболизм лекарств и выработку специфических для печени белков. Дальнейшие исследования будут контролировать долговечность трансплантированного органа в организме хозяина (способность интегрировать или избегать отказ ) и превратится ли он в опухоли.[73][74] Используя этот метод, клетки одной мыши можно использовать для тестирования 1000 лекарственных соединений для лечения заболеваний печени и сокращения использования животных до 50 000.[75]

Ремонт тканей

Эмбриональные клетки пуповинной крови индуцировали в плюрипотентные стволовые клетки с использованием плазмидной ДНК. Использование эндотелиальных / перицитарных маркеров клеточной поверхности CD31 и CD146, исследователи определили «сосудистых предшественников», высококачественные мультипотентные сосудистые стволовые клетки. После того, как iPS-клетки были введены непосредственно в стекловидное тело поврежденных сетчатка мышей стволовые клетки прижились в сетчатке, выросли и восстановили сосуды.[76][77]

Было показано, что меченые НСК, полученные из ИПСК, введенные лабораторным животным с поражениями головного мозга, мигрируют в очаги поражения, и наблюдалось некоторое улучшение двигательной функции.[78]

Кардиомиоциты

Бьющиеся клетки сердечной мышцы, полученные из ИПСК кардиомиоциты, могут производиться серийно с использованием протоколов дифференциации, определенных химическим составом.[79] Эти протоколы обычно модулируют те же сигнальные пути развития, необходимые для развитие сердца .[80] Эти ИПСК-кардиомиоциты могут повторять генетические аритмии и сердечные лекарственные реакции, поскольку они имеют тот же генетический фон, что и пациент, от которого они были получены.[81][82]

В июне 2014 года Takara Bio получила передачу технологии от iHeart Japan, венчурной компании Института исследования клеток iPS при Киотском университете, чтобы сделать возможным использование исключительно технологий и патентов, которые индуцируют дифференцировку iPS-клеток в кардиомиоциты в Азии. Компания объявила об идее продажи кардиомиоцитов фармацевтическим компаниям и университетам, чтобы помочь в разработке новых лекарств от болезней сердца.[83]

9 марта 2018 года Комитет по специальной регенеративной медицине Университета Осаки официально утвердил первый в мире план клинических исследований по трансплантации «миокардиального листа», сделанного из iPS-клеток, в сердце пациентам с тяжелой сердечной недостаточностью. Университет Осаки объявил, что в тот же день подал заявку в Министерство здравоохранения, труда и социального обеспечения.

16 мая 2018 года план клинических исследований был одобрен экспертной группой Министерства здравоохранения, труда и социального обеспечения с условием.[84][85]

В октябре 2019 года группа из Университета Окаяма разработала модель ишемической болезни сердца с использованием кардиомиоцитов, дифференцированных от iPS-клеток.[86]

красные кровяные тельца

Хотя пинта донорской крови содержит около двух триллионов эритроцитов, и во всем мире собирается более 107 миллионов донаций крови, по-прежнему существует острая потребность в крови для переливания. В 2014, тип O красные кровяные тельца были синтезированы в Шотландской национальной службе переливания крови из iPSC. Клетки были вынуждены стать мезодерма а потом кровяные клетки а затем красные кровяные тельца. Последним шагом было заставить их выбросить свои ядра и должным образом созреть. Тип O можно переливать всем пациентам. Ожидается, что клинические испытания на людях начнутся не раньше 2016 года.[87]

Клинические испытания

Первый человек клиническое испытание с помощью аутологичный ИПСК одобрены Министерство здравоохранения Японии и должен был быть проведен в 2014 г. Райкен Центр биологии развития в Кобе. Однако судебное разбирательство было приостановлено после того, как в ноябре 2015 года вступили в силу новые законы Японии о регенеративной медицине.[88] В частности, существующий набор руководящих принципов был усилен, чтобы иметь силу закона (ранее - просто рекомендации).[89] ИПСК, полученные из клетки кожи от шести пациентов, страдающих влажная возрастная дегенерация желтого пятна были перепрограммированы, чтобы дифференцироваться в клетки пигментного эпителия сетчатки (РПЭ). Клеточный лист будет трансплантирован пораженному сетчатка где иссекали дегенерированную ткань РПЭ. Мониторинг безопасности и восстановления зрения должен был длиться от одного до трех лет.[90][91]

В марте 2017 года команда во главе с Масайо Такахаши завершили первую успешную трансплантацию полученных из ИПС клеток сетчатки от донора в глаз человека с выраженной дегенерацией желтого пятна.[92] Однако сообщалось, что сейчас у них возникли осложнения.[93] Преимущества использования аутологичных ИПСК заключаются в том, что теоретически отсутствует риск отказ и что это избавляет от необходимости использовать эмбриональные стволовые клетки. Однако эти ИПСК были получены от другого человека.[91]

Стратегия получения универсальных ИПСК

Чтобы сделать технологии регенеративной медицины на основе ИПСК доступными большему количеству пациентов, необходимо создать универсальные ИПСК, которые можно трансплантировать независимо от гаплотипы из HLA. Текущая стратегия создания универсальных ИПСК преследует две основные цели: удалить экспрессию HLA и предотвратить NK-клетки нападения из-за удаление HLA. Удаление B2M и CIITA гены, использующие CRISPR / Cas9 Сообщается, что система подавляет экспрессию HLA класса I и класса II, соответственно. Чтобы избежать атак NK-клеток. трансдукция из лиганды ингибирование NK-клеток, таких как HLA-E и CD47 был использован.[94] HLA-C остается неизменным, поскольку 12 общих аллелей HLA-C достаточно, чтобы охватить 95% населения мира.[94]

Антивозрастные свойства

Мультипотентные мезенхимальные стволовые клетки при индукции плюрипотентности открывают большие перспективы для замедления или обращения вспять фенотипов старения. Такие антивозрастные свойства были продемонстрированы в ранних клинических испытаниях в 2017 году.[95] В 2020 г. Стэндфордский Университет После изучения пожилых мышей исследователи пришли к выводу, что старые человеческие клетки при воздействии факторов Яманаки могут омолаживаться и становиться почти неотличимыми от своих более молодых собратьев.[96]

Смотрите также

Рекомендации

  1. ^ а б c d Такахаши К., Яманака С. (август 2006 г.). «Индукция плюрипотентных стволовых клеток из культур эмбриональных и взрослых фибробластов мыши с помощью определенных факторов». Клетка. 126 (4): 663–76. Дои:10.1016 / j.cell.2006.07.024. PMID  16904174.открытый доступ
  2. ^ "Нобелевская премия по физиологии и медицине - пресс-релиз 2012 г.". Nobel Media AB. 8 октября 2012 г.
  3. ^ Махла RS (2016). «Применение стволовых клеток в регенеративной медицине и терапии болезней». Международный журнал клеточной биологии. 2016: 6940283. Дои:10.1155/2016/6940283. ЧВК  4969512. PMID  27516776.
  4. ^ Климанская И., Чунг Ю., Беккер С., Лу С. Дж., Ланза Р. (ноябрь 2006 г.). «Линии эмбриональных стволовых клеток человека, полученные из отдельных бластомеров». Природа. 444 (7118): 481–5. Bibcode:2006Натура 444..481K. Дои:10.1038 / природа05142. PMID  16929302. S2CID  84792371.
  5. ^ Хоккемайер Д., Яениш Р. (май 2016 г.). «Индуцированные плюрипотентные стволовые клетки встречаются с редактированием генома». Стволовая клетка. 18 (5): 573–86. Дои:10.1016 / j.stem.2016.04.013. ЧВК  4871596. PMID  27152442.
  6. ^ 山 中 、 緑 2010, п. 120.
  7. ^ "「 I 」PS な ぜ 小 文字？ 山 中 さ ん っ て ど ん な 人？". 朝日 新聞. 8 октября 2012 г.. Получено 27 апреля 2013.
  8. ^ "な iPS 細胞「 iPod の よ う に 普及 し て ほ し い 」". ス ポ ー ツ ニ ッ ポ ン. 9 октября 2012 г.. Получено 14 октября 2012.
  9. ^ "中 教授 の「 iPS 細胞 」っ て iPod の パ ク リ!? 流行 ら せ た い と 頭 小 文字". J-CAST ニ ュ ー ス. 9 октября 2012 г.. Получено 28 апреля 2013.
  10. ^ Го XL, Чен Дж.С. (2015). «Исследование индуцированных плюрипотентных стволовых клеток и их применение в тканях глаза». Международный журнал офтальмологии. 8 (4): 818–25. Дои:10.3980 / j.issn.2222-3959.2015.04.31. ЧВК  4539634. PMID  26309885.
  11. ^ Окита К., Ичисака Т., Яманака С. (июль 2007 г.). «Генерация плюрипотентных стволовых клеток, компетентных в зародышевой линии». Природа. 448 (7151): 313–7. Bibcode:2007Натура.448..313O. Дои:10.1038 / природа05934. PMID  17554338. S2CID  459050.
  12. ^ Верниг М., Мейснер А., Форман Р., Брамбринк Т., Ку М., Хохедлингер К. и др. (Июль 2007 г.). «Перепрограммирование фибробластов in vitro в плюрипотентное состояние, подобное ES-клеткам». Природа. 448 (7151): 318–24. Bibcode:2007 Натур.448..318Вт. Дои:10.1038 / природа05944. PMID  17554336. S2CID  4377572.
  13. ^ Махерали Н., Шридхаран Р., Се В., Утикал Дж., Эминли С., Арнольд К. и др. (Июнь 2007 г.). «Непосредственно перепрограммированные фибробласты демонстрируют глобальное эпигенетическое ремоделирование и широкое распространение ткани». Стволовая клетка. 1 (1): 55–70. Дои:10.1016 / j.stem.2007.05.014. PMID  18371336.
  14. ^ Поколения ИПСК и связанные ссылки
  15. ^ Такахаши К., Танабе К., Охнуки М., Нарита М., Ичисака Т., Томода К., Яманака С. (ноябрь 2007 г.). «Индукция плюрипотентных стволовых клеток из фибробластов взрослого человека определенными факторами». Клетка. 131 (5): 861–72. Дои:10.1016 / j.cell.2007.11.019. PMID  18035408.
  16. ^ а б Ю. Дж., Водяник М. А., Смуга-Отто К., Антосевич-Бурже Дж., Фран Дж. Л., Тиан С. и др. (Декабрь 2007 г.). «Индуцированные линии плюрипотентных стволовых клеток, полученные из соматических клеток человека». Наука. 318 (5858): 1917–20. Bibcode:2007Научный ... 318.1917Y. Дои:10.1126 / science.1151526. PMID  18029452. S2CID  86129154.
  17. ^ а б c Яманака С. (июль 2010 г.). «Индивидуальные для пациента плюрипотентные стволовые клетки становятся еще более доступными». Стволовая клетка. 7 (1): 1–2. Дои:10.1016 / j.stem.2010.06.009. PMID  20621038.
  18. ^ а б Махерали Н., Хочедлингер К. (декабрь 2008 г.). «Рекомендации и методы создания индуцированных плюрипотентных стволовых клеток». Стволовая клетка. 3 (6): 595–605. Дои:10.1016 / j.stem.2008.11.008. PMID  19041776.
  19. ^ Махерали Н., Ахфельдт Т., Ригамонти А., Утикал Дж., Коуэн С., Хочедлингер К. (сентябрь 2008 г.). «Высокоэффективная система для создания и изучения индуцированных человеком плюрипотентных стволовых клеток». Стволовая клетка. 3 (3): 340–5. Дои:10.1016 / j.stem.2008.08.003. ЧВК  3987901. PMID  18786420.
  20. ^ Aasen T, Raya A, Barrero MJ, Garreta E, Consiglio A, Gonzalez F и др. (Ноябрь 2008 г.). «Эффективное и быстрое создание индуцированных плюрипотентных стволовых клеток из кератиноцитов человека». Природа Биотехнологии. 26 (11): 1276–84. Дои:10.1038 / nbt.1503. PMID  18931654. S2CID  205274019.
  21. ^ Staerk J, Dawlaty MM, Gao Q, Maetzel D, Hanna J, Sommer CA и др. (Июль 2010 г.). «Перепрограммирование клеток периферической крови человека в индуцированные плюрипотентные стволовые клетки». Стволовая клетка. 7 (1): 20–4. Дои:10.1016 / j.stem.2010.06.002. ЧВК  2917234. PMID  20621045.
  22. ^ Loh YH, Hartung O, Li H, Guo C, Sahalie JM, Manos PD и др. (Июль 2010 г.). «Перепрограммирование Т-клеток периферической крови человека». Стволовая клетка. 7 (1): 15–9. Дои:10.1016 / j.stem.2010.06.004. ЧВК  2913590. PMID  20621044.
  23. ^ Zhou T, Benda C, Dunzinger S, Huang Y, Ho JC, Yang J и др. (Декабрь 2012 г.). «Создание индуцированных человеком плюрипотентных стволовых клеток из образцов мочи». Протоколы природы. 7 (12): 2080–9. Дои:10.1038 / nprot.2012.115. PMID  23138349. S2CID  205465442.
  24. ^ Поло Дж. М., Лю С., Фигероа М. Е., Кулалерт В., Эминли С., Тан К. Я. и др. (Август 2010 г.). «Тип клеток влияет на молекулярные и функциональные свойства плюрипотентных стволовых клеток, индуцированных мышами». Природа Биотехнологии. 28 (8): 848–55. Дои:10.1038 / nbt.1667. ЧВК  3148605. PMID  20644536.
  25. ^ Исключение Oct4 из коктейля Яманака раскрывает потенциал развития ИПСК
  26. ^ Качество индуцированных плюрипотентных стволовых клеток значительно повышается за счет исключения того, что считалось наиболее важным фактором репрограммирования. Oct4 не только не нужен, но и повреждает при генерации индуцированных мышами плюрипотентных стволовых клеток (ИПСК)
  27. ^ Али PS, Ghoshdastider U, Hoffmann J, Brutschy B, Filipek S (ноябрь 2012 г.). «Распознавание предшественника let-7g miRNA человеческим Lin28B». Письма FEBS. 586 (22): 3986–90. Дои:10.1016 / j.febslet.2012.09.034. PMID  23063642. S2CID  28899778.
  28. ^ Маэкава М., Ямагути К., Накамура Т., Сибукава Р., Коданака И., Ичисака Т. и др. (Июнь 2011 г.). «Прямому репрограммированию соматических клеток способствует материнский фактор транскрипции Glis1». Природа. 474 (7350): 225–9. Дои:10.1038 / природа10106. HDL:2433/141930. PMID  21654807. S2CID  4428172.
  29. ^ Ло М., Лин Т., Се В., Сун Х, Чжоу Ю., Чжу К. и др. (Июль 2013). «NuRD блокирует перепрограммирование соматических клеток мыши в плюрипотентные стволовые клетки». Стволовые клетки. 31 (7): 1278–86. Дои:10.1002 / стержень.1374. HDL:10397/18487. PMID  23533168. S2CID  206512562.
  30. ^ Rais Y, Zviran A, Geula S, Gafni O, Chomsky E, Viukov S, et al. (Октябрь 2013). «Детерминированное прямое репрограммирование соматических клеток до плюрипотентности». Природа. 502 (7469): 65–70. Bibcode:2013Натура.502 ... 65р. Дои:10.1038 / природа12587. PMID  24048479. S2CID  4386833.
  31. ^ Сельварадж В., Плоскость Дж. М., Уильямс А. Дж., Дэн В. (апрель 2010 г.). «Переключение клеточной судьбы: заметный рост индуцированных плюрипотентных стволовых клеток и технологий репрограммирования клонов». Тенденции в биотехнологии. 28 (4): 214–23. Дои:10.1016 / j.tibtech.2010.01.002. ЧВК  2843790. PMID  20149468.
  32. ^ а б Окита К., Накагава М., Хёнджонг Х., Ичисака Т., Яманака С. (ноябрь 2008 г.). «Создание индуцированных мышами плюрипотентных стволовых клеток без вирусных векторов». Наука. 322 (5903): 949–53. Bibcode:2008Sci ... 322..949O. Дои:10.1126 / science.1164270. PMID  18845712. S2CID  23735743.
  33. ^ Stadtfeld M, Nagaya M, Utikal J, Weir G, Hochedlinger K (ноябрь 2008 г.). «Индуцированные плюрипотентные стволовые клетки, созданные без вирусной интеграции». Наука. 322 (5903): 945–9. Bibcode:2008Sci ... 322..945S. Дои:10.1126 / science.1162494. ЧВК  3987909. PMID  18818365.
  34. ^ Вольтьен К., Майкл И.П., Мохсени П., Десаи Р., Милейковский М., Хямяляйнен Р. и др. (Апрель 2009 г.). «Транспозиция piggyBac перепрограммирует фибробласты в индуцированные плюрипотентные стволовые клетки». Природа. 458 (7239): 766–70. Bibcode:2009 Натур.458..766Вт. Дои:10.1038 / природа07863. ЧВК  3758996. PMID  19252478.
  35. ^ Каплан, Карен (6 марта 2009 г.). «Угроза рака устранена благодаря стволовым клеткам, - говорят ученые». Лос-Анджелес Таймс.
  36. ^ Сваминатан, Нихил (30 ноября 2007 г.). «Стволовые клетки - на этот раз без рака». Новости журнала Scientific American. Получено 11 декабря 2007.
  37. ^ Марион Р.М., Страти К., Ли Х, Мурга М., Бланко Р., Ортега С. и др. (Август 2009 г.). «P53-опосредованная реакция на повреждение ДНК ограничивает перепрограммирование, чтобы гарантировать целостность генома iPS-клеток». Природа. 460 (7259): 1149–53. Bibcode:2009 Натур.460.1149М. Дои:10.1038 / природа08287. ЧВК  3624089. PMID  19668189.
  38. ^ Zhao XY, Li W, Lv Z, Liu L, Tong M, Hai T. и др. (Сентябрь 2009 г.). «iPS-клетки производят жизнеспособных мышей посредством тетраплоидной комплементации». Природа. 461 (7260): 86–90. Bibcode:2009 Натур.461 ... 86Z. Дои:10.1038 / природа08267. PMID  19672241. S2CID  205217762.
  39. ^ Хуанфу Д., Маер Р., Го В., Эйкеленбум А., Снитоу М., Чен А. Е., Мелтон Д. А. (июль 2008 г.). «Индукция плюрипотентных стволовых клеток определенными факторами значительно улучшается за счет низкомолекулярных соединений». Природа Биотехнологии. 26 (7): 795–7. Дои:10.1038 / nbt1418. ЧВК  6334647. PMID  18568017.
  40. ^ а б Ши Y, Desponts C, Do JT, Hahm HS, Schöler HR, Ding S (ноябрь 2008 г.). «Индукция плюрипотентных стволовых клеток из эмбриональных фибробластов мыши с помощью Oct4 и Klf4 с помощью низкомолекулярных соединений». Стволовая клетка. 3 (5): 568–74. Дои:10.1016 / j.stem.2008.10.004. PMID  18983970.
  41. ^ Сираноски Д. (18 июля 2013 г.). «Стволовые клетки перепрограммированы с помощью одних только химикатов». Новости природы. Дои:10.1038 / природа.2013.13416. S2CID  88247014. Получено 22 июля 2013.
  42. ^ Hou P, Li Y, Zhang X, Liu C, Guan J, Li H и др. (Август 2013). «Плюрипотентные стволовые клетки, индуцированные из соматических клеток мыши низкомолекулярными соединениями». Наука. 341 (6146): 651–4. Bibcode:2013Наука ... 341..651H. Дои:10.1126 / science.1239278. PMID  23868920. S2CID  45685692.
  43. ^ «Главный шаг в создании лучших стволовых клеток из тканей взрослого человека». Science Daily. 19 октября 2009 г.. Получено 30 сентября 2013.
  44. ^ Лин Т., Амбасудхан Р., Юань Х, Ли В., Хилков С., Абуджарур Р. и др. (Ноябрь 2009 г.). «Химическая платформа для улучшенной индукции ИПСК человека». Методы природы. 6 (11): 805–8. Дои:10.1038 / nmeth.1393. ЧВК  3724527. PMID  19838168.
  45. ^ а б Zhou H, Wu S, Joo JY, Zhu S, Han DW, Lin T и др. (Май 2009 г.). «Создание индуцированных плюрипотентных стволовых клеток с использованием рекомбинантных белков». Стволовая клетка. 4 (5): 381–4. Дои:10.1016 / j.stem.2009.04.005. PMID  19398399.
  46. ^ Чжоу В., Freed CR (ноябрь 2009 г.). «Доставка аденовирусного гена может репрограммировать человеческие фибробласты в индуцированные плюрипотентные стволовые клетки». Стволовые клетки. 27 (11): 2667–74. Дои:10.1002 / стержень.201. PMID  19697349. S2CID  41418742.
  47. ^ Дэвид Сираноски для Nature News. 29 января 2014 г. Кислотная ванна предлагает легкий путь к стволовым клеткам
  48. ^ Трейси Венс для ученого. 11 марта 2014 г. Призыв к отзыву STAP
  49. ^ Ложь E (4 июня 2014 г.). «Японский исследователь соглашается отозвать спорную статью о стволовых клетках». Рейтер. Получено 4 июн 2014.
  50. ^ Пресс-релиз (1 апреля 2014 г.). «Отчет об исследовании бумаги STAP Cell Research». RIKEN. Получено 2 июн 2014.
  51. ^ а б c Бао X, Чжу X, Ляо Б., Бенда С., Чжуан К., Пей Д. и др. (Апрель 2013). «МикроРНК в репрограммировании соматических клеток». Текущее мнение в области клеточной биологии. 25 (2): 208–14. Дои:10.1016 / j.ceb.2012.12.004. PMID  23332905.
  52. ^ Джадсон, Р.Л. (2009). «Специфичные для эмбриональных стволовых клеток микроРНК способствуют индуцированной плюрипотентности». Источник: Центр регенеративной медицины и исследования стволовых клеток Эли и Эдит Брод.. 27 (5): 459–61. Дои:10.1038 / nbt.1535. ЧВК  2743930. PMID  19363475.
  53. ^ Гюнтер М.Г., Фрэмптон Г.М., Солднер Ф., Хоккемейер Д., Миталипова М., Яениш Р., Янг Р.А. (август 2010 г.). «Структура хроматина и программы экспрессии генов эмбриональных и индуцированных плюрипотентных стволовых клеток человека». Стволовая клетка. 7 (2): 249–57. Дои:10.1016 / j.stem.2010.06.015. ЧВК  3010384. PMID  20682450.
  54. ^ Zhao XY, Li W, Lv Z, Liu L, Tong M, Hai T. и др. (Сентябрь 2009 г.). «iPS-клетки продуцируют жизнеспособных мышей посредством тетраплоидной комплементации». Природа. 461 (7260): 86–90. Bibcode:2009 Натур.461 ... 86Z. Дои:10.1038 / природа08267. PMID  19672241. S2CID  205217762.
  55. ^ Кан Л., Ван Дж, Чжан И, Коу З, Гао С. (август 2009 г.). «iPS-клетки могут поддерживать полноценное развитие эмбрионов с тетраплоидными бластоцистами». Стволовая клетка. 5 (2): 135–8. Дои:10.1016 / j.stem.2009.07.001. PMID  19631602.
  56. ^ а б Боланд М.Дж., Хазен Дж.Л., Назор К.Л., Родригес А.Р., Гиффорд В., Мартин Дж. И др. (Сентябрь 2009 г.). «Взрослые мыши, полученные из индуцированных плюрипотентных стволовых клеток». Природа. 461 (7260): 91–4. Bibcode:2009Натура 461 ... 91Б. Дои:10.1038 / природа08310. PMID  19672243. S2CID  4423755.
  57. ^ Lister R, Pelizzola M, Kida YS, Hawkins RD, Nery JR, Hon G, et al. (Март 2011 г.). «Горячие точки аберрантного эпигеномного репрограммирования в индуцированных человеком плюрипотентных стволовых клетках». Природа. 471 (7336): 68–73. Bibcode:2011Натура 471 ... 68л. Дои:10.1038 / природа09798. ЧВК  3100360. PMID  21289626.
  58. ^ Knoepfler PS (май 2009 г.). «Деконструкция туморогенности стволовых клеток: дорожная карта к безопасной регенеративной медицине». Стволовые клетки. 27 (5): 1050–6. Дои:10.1002 / шток.37. ЧВК  2733374. PMID  19415771.
  59. ^ Нори С., Окада Ю., Ясуда А., Цудзи О, Такахаши Ю., Кобаяси Ю. и др. (Октябрь 2011 г.). «Привитые индуцированные человеком плюрипотентные нейросферы, полученные из стволовых клеток, способствуют восстановлению двигательных функций после повреждения спинного мозга у мышей». Труды Национальной академии наук Соединенных Штатов Америки. 108 (40): 16825–30. Bibcode:2011ПНАС..10816825Н. Дои:10.1073 / pnas.1108077108. ЧВК  3189018. PMID  21949375.
  60. ^ Нори С., Окада Ю., Нисимура С., Сасаки Т., Итакура Г., Кобаяси Ю. и др. (Март 2015 г.). «Долгосрочные вопросы безопасности клеточной терапии на основе ИПСК на модели повреждения спинного мозга: онкогенная трансформация с эпителиально-мезенхимальным переходом». Отчеты о стволовых клетках. 4 (3): 360–73. Дои:10.1016 / j.stemcr.2015.01.006. ЧВК  4375796. PMID  25684226.
  61. ^ Аой Т., Яэ К., Накагава М., Ичисака Т., Окита К., Такахаши К. и др. (Август 2008 г.). «Генерация плюрипотентных стволовых клеток из клеток печени и желудка взрослых мышей». Наука. 321 (5889): 699–702. Bibcode:2008Sci ... 321..699A. Дои:10.1126 / science.1154884. HDL:2433/124215. PMID  18276851. S2CID  52869734.
  62. ^ Гутьеррес-Аранда I, Рамос-Мехиа V, Буэно С., Муньос-Лопес М., Реал П.Дж., Мася А. и др. (Сентябрь 2010 г.). «Плюрипотентные стволовые клетки, индуцированные человеком, развивают тератому более эффективно и быстрее, чем эмбриональные стволовые клетки человека, независимо от места инъекции». Стволовые клетки. 28 (9): 1568–70. Дои:10.1002 / шток.471. ЧВК  2996086. PMID  20641038.
  63. ^ Чжао Т., Чжан З.Н., Жун З., Сюй И (май 2011 г.). «Иммуногенность индуцированных плюрипотентных стволовых клеток». Природа. 474 (7350): 212–5. CiteSeerX  10.1.1.864.8029. Дои:10.1038 / природа10135. PMID  21572395. S2CID  4416964.
  64. ^ Араки Р., Уда М., Хоки Ю., Сунаяма М., Накамура М., Андо С. и др. (Февраль 2013). «Незначительная иммуногенность терминально дифференцированных клеток, полученных из индуцированных плюрипотентных или эмбриональных стволовых клеток». Природа. 494 (7435): 100–4. Bibcode:2013Натура.494..100А. Дои:10.1038 / природа11807. PMID  23302801. S2CID  205232231.
  65. ^ Окано Х., Накамура М., Йошида К., Окада Й., Цудзи О, Нори С. и др. (Февраль 2013). «Шаги к безопасной клеточной терапии с использованием индуцированных плюрипотентных стволовых клеток». Циркуляционные исследования. 112 (3): 523–33. Дои:10.1161 / CIRCRESAHA.111.256149. PMID  23371901.
  66. ^ Шалом-Фейерштейн Р., Серрор Л., Абердам Э., Мюллер Ф. Дж., Ван Боховен Х., Виман К. Г. и др. (Февраль 2013). «Нарушение эпителиальной дифференцировки индуцированных плюрипотентных стволовых клеток от пациентов, связанных с эктодермальной дисплазией, спасает небольшое соединение APR-246 / PRIMA-1MET». Труды Национальной академии наук Соединенных Штатов Америки. 110 (6): 2152–6. Bibcode:2013ПНАС..110.2152С. Дои:10.1073 / pnas.1201753109. ЧВК  3568301. PMID  23355677.
  67. ^ Park IH, Arora N, Huo H, Maherali N, Ahfeldt T., Shimamura A, et al. (Сентябрь 2008 г.). «Плюрипотентные стволовые клетки, индуцированные специфическим заболеванием». Клетка. 134 (5): 877–86. Дои:10.1016 / j.cell.2008.07.041. ЧВК  2633781. PMID  18691744.
  68. ^ Фридман Б.С., Лам А.К., Сундсбак Дж.Л., Ятрино Р., Су Х, Кун С.Дж. и др. (Октябрь 2013). «Снижение уровня цилиарного полицистина-2 в индуцированных плюрипотентных стволовых клетках пациентов с поликистозом почек с мутациями PKD1». Журнал Американского общества нефрологов. 24 (10): 1571–86. Дои:10.1681 / ASN.2012111089. ЧВК  3785271. PMID  24009235.
  69. ^ Грскович М., Джавахериан А., Струловичи Б., Дейли Г.К. (ноябрь 2011 г.). «Индуцированные плюрипотентные стволовые клетки - возможности для моделирования болезней и открытия лекарств». Обзоры природы. Открытие наркотиков. 10 (12): 915–29. Дои:10.1038 / nrd3577. PMID  22076509. S2CID  7945956.
  70. ^ Герлин А. (5 декабря 2012 г.). "Рош, Пфайзер, Санофи планируют банк стволовых клеток на 72,7 миллиона долларов". Bloomberg.com. Получено 23 декабря 2012.
  71. ^ Шиннави Р., Хубер И., Майзельс Л., Шахин Н., Гепштейн А., Арбель Г. и др. (Октябрь 2015 г.). «Мониторинг индуцированных человеком плюрипотентных стволовых клеток кардиомиоцитов с помощью генетически кодированных флуоресцентных репортеров кальция и напряжения». Отчеты о стволовых клетках. 5 (4): 582–96. Дои:10.1016 / j.stemcr.2015.08.009. ЧВК  4624957. PMID  26372632.
  72. ^ Шахин Н., Шити А., Хубер И., Шиннави Р., Арбель Г., Гепштейн А. и др. (Июнь 2018). «Таблицы сердечных клеток, индуцированных индуцированными человеческими плюрипотентными стволовыми клетками, экспрессирующие генетически закодированный индикатор напряжения для фармакологических исследований и исследований аритмии». Отчеты о стволовых клетках. 10 (6): 1879–1894. Дои:10.1016 / j.stemcr.2018.04.006. ЧВК  5989818. PMID  29754959.
  73. ^ Бейкер М (3 июля 2013 г.). «Миниатюрная человеческая печень, выращенная на мышах». Природа. Дои:10.1038 / природа.2013.13324. S2CID  87064973. Получено 19 июля 2013.
  74. ^ Takebe T, Sekine K, Enomura M, Koike H, Kimura M, Ogaeri T. и др. (Июль 2013). «Васкуляризованная и функциональная человеческая печень из трансплантата зачатка органа, полученного из ИПСК». Природа. 499 (7459): 481–4. Bibcode:2013Натура.499..481Т. Дои:10.1038 / природа12271. PMID  23823721. S2CID  4423004.
  75. ^ «Мини-печень может снизить вероятность тестирования на животных». Лабораторное оборудование.com. 27 февраля 2014 г.
  76. ^ Муллин Э. (28 января 2014 г.). «Исследователи восстанавливают сетчатку у мышей с помощью стволовых клеток, свободных от вирусов». fiercebiotech.com. Получено 17 февраля 2014.
  77. ^ Парк Т.С., Бхутто И., Циммерлин Л., Хо Дж. С., Нагария П., Миллер Д. и др. (Январь 2014). «Сосудистые предшественники из индуцированных пуповинной крови плюрипотентных стволовых клеток обладают повышенной способностью к регенерации ишемической сосудистой сети сетчатки». Тираж. 129 (3): 359–72. Дои:10.1161 / CIRCULATIONAHA.113.003000. ЧВК  4090244. PMID  24163065.
  78. ^ Тан Х, Ша Х, Сун Х, Ву Х, Се Л., Ван П и др. (Октябрь 2013). «Отслеживание индуцированных плюрипотентных стволовых клеток нервных стволовых клеток в центральной нервной системе крыс и обезьян». Клеточное перепрограммирование. 15 (5): 435–42. Дои:10.1089 / сотовый. 2012.0081. ЧВК  3787483. PMID  24020696.
  79. ^ Burridge PW, Matsa E, Shukla P, Lin ZC, Churko JM, Ebert AD, et al. (Август 2014 г.). «Химически определенное поколение кардиомиоцитов человека». Методы природы. 11 (8): 855–60. Дои:10.1038 / nmeth.2999. ЧВК  4169698. PMID  24930130.
  80. ^ Виллемс Э., Спиринг С., Давидович Х., Ланье М., Ся З., Доусон М. и др. (Август 2011 г.). «Низкомолекулярные ингибиторы пути Wnt эффективно способствуют развитию кардиомиоцитов из мезодермы, происходящей из человеческих эмбриональных стволовых клеток». Циркуляционные исследования. 109 (4): 360–4. Дои:10.1161 / CIRCRESAHA.111.249540. ЧВК  3327303. PMID  21737789.
  81. ^ Ицхаки И., Майзельс Л., Хубер И., Цви-Данцис Л., Каспи О, Винтерстерн А. и др. (Март 2011 г.). «Моделирование синдрома удлиненного интервала QT с помощью индуцированных плюрипотентных стволовых клеток». Природа. 471 (7337): 225–9. Bibcode:2011Натура.471..225I. Дои:10.1038 / природа09747. PMID  21240260. S2CID  4384573.
  82. ^ Шарма А., Берридж П. В., МакКейтан В. Л., Серрано Р., Шукла П., Сайед Н. и др. (Февраль 2017). «Высокопроизводительный скрининг кардиотоксичности ингибитора тирозинкиназы с индуцированными человеком плюрипотентными стволовыми клетками». Научная трансляционная медицина. 9 (377): eaaf2584. Дои:10.1126 / scitranslmed.aaf2584. ЧВК  5409837. PMID  28202772.
  83. ^ "iPS か ら 心 筋 細胞 製造 タ カ ラ バ オ と ベ ャ ー". 日本 経 済 新聞 電子 天 (на японском языке). Получено 8 ноября 2019.
  84. ^ "iPS で 心 臓 治療 了 承 高難度 の 再生 医療 へ 一 歩". 日本 経 済 新聞 電子 天 (на японском языке). Получено 8 ноября 2019.
  85. ^ "ｉＰＳ 細胞 の 心 筋 シ ー 国 が 大 筋 了 承 新聞 デ ジ タ ル". 朝日 新聞 デ ジ タ ル (на японском языке). Получено 8 ноября 2019.
  86. ^ Вэй Х, Ван С., Го Р., Такахаши К., Нарусэ К. (декабрь 2019 г.). «Разработка модели ишемической болезни сердца с использованием кардиомиоцитов, дифференцированных от индуцированных человеком плюрипотентных стволовых клеток». Сообщения о биохимических и биофизических исследованиях. 520 (3): 600–605. Дои:10.1016 / j.bbrc.2019.09.119. PMID  31623826.
  87. ^ «Первые переливания« искусственной »крови запланированы на 2016 год». Gizmag.com. Получено 23 апреля 2014.
  88. ^ Гарбер К. (сентябрь 2015 г.). «RIKEN приостанавливает первое клиническое испытание с участием индуцированных плюрипотентных стволовых клеток». Природа Биотехнологии. 33 (9): 890–1. Дои:10.1038 / nbt0915-890. PMID  26348942. S2CID  205271169.
  89. ^ Тобита М., Кономи К., Торашима Ю., Кимура К., Таока М., Каминота М. (июнь 2016 г.). «Проблемы трансляционной регенеративной медицины в Японии: Закон о безопасности регенеративной медицины». Регенеративная терапия. 4: 78–81. Дои:10.1016 / j.reth.2016.04.001. ЧВК  6581824. PMID  31245489.
  90. ^ Райкен Центр биологии развития. «Информация о планируемом пилотном исследовании безопасности и осуществимости трансплантации клеточных листов аутологичного hiPSC пигментного эпителия сетчатки (RPE) пациентам с неоваскулярной возрастной дегенерацией желтого пятна». Исследование. Архивировано из оригинал 26 июня 2013 г.. Получено 23 июля 2013.
  91. ^ а б Галлахер Дж (19 июля 2013 г.). «Первые испытания стволовых клеток взрослых одобрены Японией». Новости BBC. Получено 23 июля 2013.
  92. ^ «Первая трансплантация донорских iPSC-полученных клеток RPE пациенту с AMD». Центр биологии развития RIKEN. 4 апреля 2017 г.. Получено 6 сентября 2017.
  93. ^ «Сообщается о первой серьезной побочной реакции на трансплантацию клеток сетчатки, полученных из iPS». The Japan Times Online. 17 января 2018.
  94. ^ а б Кога, К., Ван, Б., и Канеко, С. (2020). Текущее состояние и будущие перспективы индуцированных плюрипотентных стволовых клеток, отредактированных HLA. Воспаление и регенерация, 40 (1), 23-29. Дои:10.1186 / s41232-020-00132-9 ЧВК  7528263 PMID  33014207
  95. ^ Хариди Р. (23 октября 2017 г.). «Антивозрастное лечение стволовыми клетками оказалось успешным в первых испытаниях на людях». Новый Атлас.
  96. ^ Саркар Т.Дж., Кварта М., Мукерджи С., Колвилл А., Пейн П., Доан Л. и др. (Март 2020 г.). «Временная неинтегративная экспрессия факторов ядерного репрограммирования способствует многогранному замедлению старения в клетках человека». Nature Communications. 11 (1): 1545. Bibcode:2020NatCo..11.1545S. Дои:10.1038 / s41467-020-15174-3. ЧВК  7093390. PMID  32210226.

внешняя ссылка