Дифференциал лейкоцитов - White blood cell differential - Wikipedia

Дифференциал лейкоцитов
Нейтрофилы (слева) и лимфоциты (справа), видимые под микроскопом в мазке крови
Нейтрофил (слева) и лимфоциты (справа) под микроскопом на мазок крови
СинонимыДифференциальное количество лейкоцитов,[1] лейкограмма,[2] автодифф[3] ручная разница[1]
ЦельОписание популяций белые кровяные клетки в периферической крови
MedlinePlus003657
eMedicine2085133
LOINC33255-1, 24318-8, 69738-3

А дифференциал лейкоцитов это медицинская лаборатория тест, который предоставляет информацию о типах и количестве белые кровяные клетки в крови человека. Тест, который обычно заказывается как часть полный анализ крови (CBC), измеряет количество пяти нормальных типов белых кровяных телец - нейтрофилы, лимфоциты, моноциты, эозинофилы и базофилы - а также аномальные типы клеток, если они присутствуют. Эти результаты представлены в виде процентных и абсолютных значений и сравниваются с эталонные диапазоны чтобы определить, являются ли значения нормальными, низкими или высокими. Изменения количества лейкоцитов могут помочь в диагностике многих заболеваний, в том числе: популярный, бактериальный, и паразитический инфекции и заболевания крови Такие как лейкемия.

Дифференциация белых кровяных телец может выполняться автоматический анализатор - машина, предназначенная для проведения лабораторных испытаний - или вручную, путем исследования мазки крови под микроскопом. Тест выполнялся вручную до тех пор, пока в 1970-х годах не были представлены дифференциальные анализаторы лейкоцитов. автоматический дифференциал возможный. В автоматическом дифференциале образец крови загружается в анализатор, который отбирает небольшой объем крови и измеряет различные свойства лейкоцитов для проведения дифференциального подсчета. В ручной дифференциал, в котором лейкоциты подсчитываются на окрашенный предметное стекло микроскопа, теперь выполняется для исследования аномальных результатов автоматического дифференциала или по запросу поставщика медицинских услуг. Ручная дифференциация может идентифицировать типы клеток, которые не подсчитываются автоматическими методами, и обнаруживать клинически значимые изменения во внешнем виде лейкоцитов.

В 1674 г. Антони ван Левенгук опубликовал первые микроскопические наблюдения клеток крови. Улучшения в технологии микроскопов на протяжении 18 и 19 веков позволили идентифицировать и подсчитывать три клеточных компонента крови. В 1870-х гг. Пол Эрлих изобрел метод окрашивания, позволяющий различать каждый тип лейкоцитов. Дмитрий Леонидович Романовский позже модифицировал пятно Эрлиха, чтобы получить более широкий диапазон цветов, создавая Романовский морилка, который до сих пор используется для окрашивания мазков крови для ручной дифференциации.

Автоматизация дифференциала белых кровяных телец началась с изобретения Счетчик сошников, первые автоматизированные гематологический анализатор, в начале 1950-х гг. Эта машина использовала измерения электрического импеданса для подсчета клеток и определения их размеров, позволяя подсчитывать белые и эритроциты. В 1970-х годах были разработаны два метода автоматического дифференциального подсчета: цифровая обработка изображений предметных стекол микроскопа и проточной цитометрии методы с использованием светорассеяния и окрашивания клеток. Эти методы продолжают использоваться на современных гематологических анализаторах.

Медицинское использование

Пример диапазонов дифференциальных норм WBC[4]
Тип ячейкиВзрослый
эталонный диапазон
(× 109/ Л)		Взрослый
эталонный диапазон
(процент)
Нейтрофилов1.7–7.550–70
Лимфоциты1.0–3.218–42
Моноциты0.1–1.32–11
Эозинофилы0.0–0.31–3
Базофилы0.0–0.20–2

Дифференциал лейкоцитов - это обычный анализ крови, который часто назначают вместе с полный анализ крови. Тест может проводиться как часть рутинной процедуры. медицинское обследование; для исследования определенных симптомов, особенно тех, которые предполагают инфекционное заболевание или же гематологические нарушения;[5][6] или для мониторинга существующих состояний, таких как заболевания крови и воспалительные заболевания.[7]

В крови обычно обнаруживаются пять типов лейкоцитов: нейтрофилы, лимфоциты, моноциты, эозинофилы и базофилы.[8] Заметные сдвиги в пропорциях этих типов клеток, измеренные с помощью автоматического или ручного дифференциала, могут указывать на различные состояния здоровья.[9] Кроме того, типы клеток, которые обычно не встречаются в крови, такие как бластные клетки, можно определить по ручному дифференциалу. Эти типы клеток могут быть обнаружены при заболеваниях крови и других патологических состояниях.[10][11] Ручная дифференциация также может определять изменения внешнего вида лейкоцитов, такие как реактивные лимфоциты,[12] или такие функции, как токсическая грануляция и вакуолизация в нейтрофилах.[13] Результаты дифференциала белых кровяных телец представлены в процентах и ​​абсолютных значениях. Абсолютное количество обычно указывается в единицах клеток на микролитр (мкл) или 10.9 клеток на литр (л).[6] Затем результат сравнивается с эталонные диапазоны, которые определяются отдельными лабораториями и могут различаться в зависимости от групп пациентов и методов тестирования.[14]

Общий анализ крови и дифференциальное тестирование обычно проводят на венозный или же капилляр кровь. Забор капиллярной крови обычно используется для младенцев и людей, чьи вены труднодоступны.[15] Предотвращать свертывание, образец набирается в трубку, содержащую антикоагулянт сложный этилендиаминтетрауксусной кислоты (ЭДТА).[16] Пробирки, содержащие цитрат натрия может быть у пациентов, у которых ЭДТА вызывает скопление тромбоцитов.[17] Тест проводится на цельной крови, то есть на крови, которая не была центрифугированный.[18]

Типы

Ручной дифференциал

Реактивные лимфоциты при инфекционном мононуклеозе
Ручной дифференциальный метод позволяет классифицировать клетки на основе незначительных изменений внешнего вида, как в реактивные лимфоциты видел в человеке с инфекционный мононуклеоз.

В ручном дифференциале мазок крови исследуется под микроскопом, и лейкоциты подсчитываются и классифицируются в зависимости от их внешнего вида. Ручная дифференциация обычно выполняется, когда автоматическая дифференциация помечена для проверки или когда ее запрашивает поставщик медицинских услуг.[1][9] Если ручная дифференциация показывает результаты, указывающие на определенные серьезные заболевания, такие как лейкемия, мазок крови направляется к врачу (обычно гематолог или же патолог ) для подтверждения.[1]

Процедура

Крупный план пернатого края окрашенного мазка крови
Крупный план пернатого края окрашенного мазка крови

Мазок крови готовится путем помещения капли крови на предметное стекло микроскопа и использования второго предметного стекла, удерживаемого под углом, для распределения крови и протягивания ее по предметному стеклу, образуя «скошенный край», состоящий из одного слоя клеток на конец мазка.[19] Это можно сделать вручную или с помощью автоматического устройства для изготовления слайдов, соединенного с гематологическим анализатором. На предметное стекло наносят краситель Романовского, обычно Пятно Райта или Райт-Гимза, и исследовали под микроскопом. Мазок исследуют по систематической схеме, сканирование из стороны в сторону в пределах заостренного края и последовательный подсчет клеток. Дифференциал обычно выполняется в 400 или 500 раз. увеличение, но при наличии аномальных клеток можно использовать увеличение 1000x.[20] Клетки идентифицируются по их морфологический особенности, такие как размер и структура их ядра, а также цвет и текстура их цитоплазмы. Это позволяет идентифицировать аномальные типы клеток и изменения внешнего вида клеток.[8] В большинстве случаев микроскопист подсчитывает 100 лейкоцитов, но 200 может быть подсчитано для лучшего представления, если количество лейкоцитов высокое.[21] Ручной дифференциальный подсчет дает процентное соотношение каждого типа клеток, которое можно умножить на общее количество лейкоцитов, полученное анализатором, для получения абсолютных значений.[22]

Ручной дифференциал можно частично автоматизировать с помощью программного обеспечения для цифровой микроскопии.[23] который использует искусственный интеллект классифицировать лейкоциты из микрофотографии мазка крови.[24] Однако этот метод требует подтверждения вручную.[25][26]

Ограничения

Поскольку в ручном дифференциале подсчитывается относительно небольшое количество клеток, вариабельность выше, чем при автоматизированных методах, особенно когда клетки присутствуют в небольших количествах.[27] Например, в образце, содержащем 5 процентов моноцитов, результаты ручной дифференциации могут составлять от 1 до 10 процентов из-за отбор проб вариация.[28] Кроме того, идентификация клеток субъективна, а точность зависит от навыков человека, читающего слайд.[27][29] Плохая подготовка мазка крови может вызвать неравномерное распределение лейкоцитов, что приведет к неточному подсчету.[30] а неправильное окрашивание может затруднить идентификацию клеток.[31] В целом, ручной дифференциальный подсчет показывает коэффициенты вариации (CV) в диапазоне от 5 до 10 процентов, в то время как автоматический дифференциальный подсчет нормальных нейтрофилов и лимфоцитов дает CV около 3 процентов.[31]

В лейкемии и другие гематологические злокачественные новообразования, происхождение и генетические характеристики лейкоцитов имеют важное значение для лечения и прогноза, а микроскопический вид клеток часто недостаточен для точной классификации.[32][14] В этих случаях другие методы, такие как иммунофенотипирование с помощью проточной цитометрии или специального окрашивания можно использовать для окончательной идентификации клеток.[33]

Автоматический дифференциал

Дифференциальная диаграмма рассеяния лейкоцитов
Пример диаграммы рассеяния лейкоцитов: кластеры разного цвета указывают на разные популяции клеток

Наиболее гематологические анализаторы предоставить дифференциал из пяти частей, подсчитывающий нейтрофилы, лимфоциты, моноциты, эозинофилы и базофилы. Некоторые инструменты также могут считать незрелые гранулоциты и ядерные эритроциты.[34] Гематологические анализаторы измеряют различные свойства лейкоцитов, такие как импеданс, рассеяние света параметры и реакции окрашивания. Эти данные анализируются и наносятся на диаграмма рассеяния, образуя отдельные кластеры, соответствующие типам лейкоцитов.[35]Анализатор считает намного больше клеток, чем подсчитывается при ручном дифференциале, что приводит к повышению точности.[27] Если присутствуют аномальные функции или популяции клеток, которые анализатор не может идентифицировать, прибор может пометить результаты для ручного анализа мазка крови.[34][35]

Процедура

Автоматический гематологический анализатор (Sysmex XT-4000i)
Автоматический гематологический анализатор (Sysmex XT-4000i)

Общие методы, используемые гематологическими анализаторами для идентификации клеток, включают рассеяние света, Подсчет сошников и методы цитохимического окрашивания. Некоторые анализаторы также используют радиочастота анализ и моноклональное антитело маркировка для идентификации ячеек.[27][36] Методы окрашивания, используемые в дифференциальных анализаторах, включают окрашивание миелопероксидаза,[31] фермент, обнаруженный в клетках миелоидный происхождение[37] и нуклеиновые кислоты, которые обнаруживаются в более высоких концентрациях в незрелых клетках.[38]

Небольшой объем крови (всего 150 микролитров) всасывается в анализатор, где реагенты применяются к лизировать красные кровяные тельца и сохраняют лейкоциты. Образец разбавляется и передается в проточную ячейку, в которой используется гидродинамическая фокусировка изолировать отдельные клетки для точного анализа их свойств. Различные клеточные параметры, такие как размер, сложность и реакции окрашивания, измеряются и анализируются для идентификации клеточных популяций. Базофилы часто количественно определяют с помощью реагента, который лизирует цитоплазму других белых кровяных телец, но оставляет базофилы нетронутыми.[31] Образцы с ненормальными результатами[1] или подозрение на наличие аномальных клеток помечаются анализатором для ручного анализа мазка крови.[35]

Чтобы гарантировать правильность результатов автоматического анализатора, образцы для контроля качества запускаются не реже одного раза в день. Это образцы с известными результатами, которые чаще всего предоставляются производителем прибора. Лаборатории сравнивают свои дифференциальные результаты с известными значениями, чтобы убедиться в правильной работе прибора. Также можно использовать измерение скользящего среднего, при котором средние результаты для образцов пациентов измеряются через определенные интервалы. Если предположить, что характеристики популяции пациентов остаются примерно неизменными с течением времени, среднее значение должно оставаться постоянным. Большие сдвиги в среднем значении могут указывать на проблемы с прибором.[39][40]

Ограничения

При наличии незрелых или аномальных лейкоцитов результаты автоматической дифференциации могут быть неверными, что потребует ручного анализа мазка крови. В целом от 10 до 25 процентов образцов общего анализа крови помечаются анализатором для ручной проверки.[41] Хотя большинство аномальных образцов помечается автоматически, некоторые из них могут быть пропущены;[42] и наоборот, анализаторы могут генерировать ложные положительные флаги, когда нет аномальных клеток.[41] Гематологические лаборатории компенсируют эти проблемы, требуя анализа мазка, когда дифференциальные результаты или результаты общего анализа крови выходят за пределы определенных числовых порогов, независимо от наличия флажков анализатора.[1] В чувствительность и специфичность пометок анализатора можно определить путем сравнения флагов анализатора с результатами ручной дифференциации.[40]

Автоматизированная базофил счет заведомо ненадежен,[11][31] часто недооценивают базофилия и получение ложно завышенных результатов при наличии аномальных клеток.[43] Поэтому ручной дифференциал считается эталонным методом для этих ячеек.[11][44]

Анализаторы могут подсчитывать ядросодержащие эритроциты, гигант и слипшиеся тромбоциты, и красные кровяные тельца, содержащие аномальные гемоглобины (например, гемоглобин S в серповидноклеточная анемия ) как лейкоциты, что приводит к ошибочным результатам дифференциальной диагностики. Автоматический дифференциальный подсчет на старых образцах может быть неверным из-за клеточной дегенерации.[45]

Типы ячеек и интерпретация результатов

Нейтрофил
Нейтрофил
Нейтрофилов являются наиболее распространенными лейкоцитами в нормальной крови взрослого человека. При окрашивании морилкой Романовского они демонстрируют многолопастную ядро и розовый цитоплазма который содержит маленькие фиолетовые гранулы.[46][47]

Количество нейтрофилов обычно выше у новорожденных и беременных женщин, чем в других группах.[48] Вне этих условий повышенное количество нейтрофилов (нейтрофилия ) связаны с бактериальная инфекция, воспаление и различные формы физиологического стресса.[49] Количество нейтрофилов может стать чрезвычайно высоким в ответ на некоторые инфекции и воспалительные состояния, что называется лейкемоидная реакция потому что высокий количество лейкоцитов имитирует лейкоз.[50] Нейтрофилия также может возникать в миелопролиферативные заболевания.[49]
Нейтропения, что означает низкое количество нейтрофилов, может возникнуть в результате медикаментозного лечения (особенно химиотерапии)[51] или при определенных инфекциях, таких как туберкулез и Грамотрицательный сепсис. Нейтропения также встречается при многих гематологических заболеваниях, таких как лейкемия и миелодиспластический синдром, а также при различных аутоиммунных и врожденных заболеваниях.[52] Число нейтрофилов ниже референтного интервала может быть нормальным у лиц определенных этнических групп; это называется доброкачественная этническая нейтропения.[53][54] Очень низкое количество нейтрофилов связано с иммуносупрессия.[55]

Когда нейтрофилы стимулируются инфекцией или воспалением, в их цитоплазме могут развиваться аномальные свойства, такие как токсическая грануляция, токсическая вакуолизация и Тела Döhle. Эти функции, вызванные выпуском цитокины,[56] все вместе известны как токсические изменения.[57]

Лимфоцит
Лимфоцит
Лимфоциты, которые являются вторым по распространенности типом лейкоцитов у взрослых, обычно представляют собой маленькие клетки с круглым темным ядром и тонкой полосой бледно-голубой цитоплазмы. Некоторые лимфоциты больше по размеру и содержат несколько синих гранул.[58]

Повышенное количество лимфоцитов (лимфоцитоз ) могут быть вызваны вирусными инфекциями[59] а также может произойти после спленэктомия. У детей больше лимфоцитов, чем у взрослых.[60] Хронический лимфолейкоз проявляется повышенным количеством лимфоцитов и аномальной морфологией лимфоцитов, при которой лимфоциты имеют чрезвычайно плотные, сгруппированные ядра[61] и появляются некоторые клетки размазанный по мазку крови.[62]
Низкое количество лимфоцитов (лимфопения ) может наблюдаться при таких инфекциях, как ВИЧ / СПИД, грипп и вирусный гепатит, а также в белково-энергетическая недостаточность,[63] острые заболевания и реакции на лекарства.[60]

В ответ на вирусные инфекции (особенно инфекционный мононуклеоз ) лимфоциты могут значительно увеличиваться в размере, развивая ядра необычной формы и большое количество темно-синей цитоплазмы. Такие клетки называются реактивные или атипичные лимфоциты[64] и когда они присутствуют, они либо комментируются, либо подсчитываются отдельно от нормальных лимфоцитов при ручной дифференциации.[14]

Моноцит
Моноцит
Моноциты представляют собой большие клетки с изогнутым или складчатым ядром и мелкозернистой серо-голубой цитоплазмой, которая часто содержит вакуоли. Моноциты являются третьими по распространенности лейкоцитами после нейтрофилов и лимфоцитов.[65]

Повышенное количество моноцитов (моноцитоз ) наблюдаются при хронической инфекции и воспалении. Чрезвычайно высокое количество моноцитов, а также незрелые формы моноцитов встречаются в хронический миеломоноцитарный лейкоз и острые лейкозы моноцитарного происхождения.[66] Количество моноцитов может снизиться (моноцитопения ) у лиц, получающих химиотерапию, а также у лиц с апластическая анемия, сильные ожоги и СПИД.[67]

Эозинофил
Эозинофил
Эозинофилы имеют большие оранжевые гранулы в цитоплазме и двудольных ядрах. В нормальной крови они обнаруживаются в небольших количествах.[65]

Повышенное количество эозинофилов (эозинофилия ) связаны с аллергические реакции, паразитарные инфекции и астма.[68][69] Количество эозинофилов может снижаться во время беременности и в ответ на физиологический стресс, воспаление или лечение определенными лекарствами, такими как стероиды и адреналин.[69]

Базофил
Базофил
Базофилы демонстрируют большие темно-пурпурные гранулы, которые часто покрывают ядро ​​клетки. Это самые редкие из пяти типов нормальных клеток.[70]

Базофилия и эозинофилия может возникать вместе с другими аномалиями лейкоцитов в хронический миелоидный лейкоз и другие миелопролиферативные заболевания.[70] Повышенное количество базофилов также можно увидеть в реакции гиперчувствительности и после спленэктомии. Количество базофилов может уменьшаться во время овуляция, стероидное лечение и периоды физиологического стресса.[71]

Группа нейтрофилов
Группа нейтрофилов
Кольцевые нейтрофилы молодые формы нейтрофилов, в которых отсутствует сегментация ядро. Эти клетки, которые идентифицируются ручным подсчетом, обнаруживаются в небольшом количестве в нормальной крови взрослого человека.[72]

А левый "шифт, что означает увеличение палочкоядерных нейтрофилов или незрелых гранулоцитов, может указывать на инфекцию, воспаление или заболевания костного мозга, хотя это также может быть нормальным явлением при беременность.[72][73] Некоторые лаборатории не отделяют полосы от зрелых нейтрофилов при дифференциальном подсчете, потому что классификация очень субъективна и ненадежна.[14]

Незрелый гранулоцит (миелоцит)
Незрелый гранулоцит
Незрелые гранулоциты - это незрелые формы нейтрофилов и других гранулоциты (эозинофилы и базофилы). Эта классификация состоит из метамиелоциты, миелоциты и промиелоциты, которые могут быть подсчитаны отдельно при ручной дифференциации или сообщены вместе как незрелые гранулоциты (IG) автоматическими методами.[74] Незрелые гранулоциты обычно находятся в Костный мозг, но не в периферической крови.[75]

Незрелые гранулоциты, присутствующие в крови в значительных количествах, могут указывать на инфекцию и воспаление.[11] а также миелопролиферативное заболевание, лейкемия и другие состояния, влияющие на костный мозг.[75] IG также может повышаться при приеме стероидов и беременности.[11] Хронический миелоидный лейкоз часто проявляется большим количеством незрелых гранулоцитов в периферической крови.[76] Аномальные промиелоциты с множественными Стержни Ауэра, называется клетки для педиков, происходят в острый промиелоцитарный лейкоз.[77]

Взрывная ячейка
Взрывная ячейка
Бластные клетки очень незрелые клетки, которые обычно находятся в костном мозге, где они развиваются в зрелые клетки (кроветворение ) перед попаданием в кровь. Их можно отличить по большому размеру, темно-синего цвета. цитоплазма, и большое ядро ​​с мелкой хроматин и видный ядрышки.[10]

На мазке крови бластные клетки являются аномальной находкой и могут указывать на острый лейкоз или другие серьезные заболевания крови. Редко их можно увидеть в тяжелых случаях сдвига влево. Наличие стержней Ауэра внутри бластных клеток указывает на то, что они миелоидный происхождения, что имеет важное значение для лечения лейкемии.[10][78] Другие морфологические признаки могут предоставить информацию о происхождении бластных клеток: например, миелобласты имеют тенденцию быть большими с отчетливыми ядрышками, в то время как лимфобласты может быть меньше с более плотным рисунком хроматина. Однако эти признаки не являются диагностическими, и для подтверждения происхождения обычно используется проточная цитометрия или специальное окрашивание.[79]

Лимфомная клетка
Другие клетки
При определенных условиях в крови могут присутствовать различные другие аномальные клетки. Например, клетки лимфомы могут быть обнаружены при ручном дифференциале в некоторых случаях лимфома,[80] И в лейкоз тучных клеток, тучные клетки, которые обычно ограничены тканями, циркулируют в крови.[81] Есть очень редкое явление, называемое карциноцитемия в котором опухоль клетки видны на мазке периферической крови.[82]

История

До внедрения автоматических счетчиков клеток подсчет клеток выполнялся вручную; количество лейкоцитов и эритроцитов, а также тромбоцитов подсчитывали с помощью микроскопов.[83] Первым, кто опубликовал микроскопические наблюдения за клетками крови, был Антони ван Левенгук,[84] который сообщил о появлении красных клеток в письме 1674 г. Труды Лондонского королевского общества;[85] Ян Сваммердам описал эритроциты несколькими годами ранее, но тогда не опубликовал свои выводы. На протяжении XVIII и XIX веков усовершенствования в технологии микроскопов, такие как ахроматические линзы разрешены лейкоциты и тромбоциты для подсчета в неокрашенных образцах. В 1870-х гг. Пол Эрлих разработали технику окрашивания, позволяющую различать пять типов лейкоцитов. Окрашивание Эрлиха использовало комбинацию кислотного и основного красителя для одновременного окрашивания белых и красных кровяных телец.[86] Дмитрий Леонидович Романовский усовершенствовал эту технику в 1890-х, используя смесь эозин и в возрасте метиленовый синий, который давал широкий спектр оттенков, которых не было при использовании одного из красителей. Это было названо эффектом Романовского и стало основой для Окраска по Романовскому, метод, который до сих пор используется для окрашивания мазков крови для ручной дифференциации.[87]

Первый автоматический гематологический анализатор, Счетчик сошников, был изобретен в начале 1950-х годов Уоллес Х. Коултер.[88][89] Анализатор работает по принципу Коултера, который гласит, что когда клетки находятся во взвешенном состоянии в жидкости, несущей электрический ток и прошедшие через отверстие, они вызывают уменьшение тока пропорционально их объему из-за их плохой электрическая проводимость. Количество и величина этих сокращений можно использовать для подсчета клеток крови и расчета их размеров. Счетчик Коултера изначально был разработан для подсчета красные кровяные тельца, но он оказался эффективным и для подсчета лейкоцитов.[89]

Счетчик Coulter Model A, первый коммерческий гематологический анализатор
Счетчик Coulter Model A, первый коммерческий гематологический анализатор

После того, как основной подсчет клеток был автоматизирован, дифференциация лейкоцитов оставалась сложной задачей. Исследования по автоматизации дифференциального подсчета начались в 1970-х годах и использовали два основных подхода: цифровую обработку изображений и проточную цитометрию. Использование технологий, разработанных в 1950-х и 60-х годах, для автоматизации чтения Пап-мазки, выпущено несколько моделей анализаторов обработки изображений.[90] Эти инструменты будут сканировать окрашенный мазок крови, чтобы найти ядра клеток, а затем делать снимок клетки с более высоким разрешением, чтобы проанализировать его. денситометрия.[91] Они были дорогими, медленными и мало помогали снизить рабочую нагрузку в лаборатории, потому что они по-прежнему требовали подготовки и окрашивания мазков крови, поэтому системы на основе проточной цитометрии стали более популярными.[92][93] и к 1990 году в США и Западной Европе не было коммерческих анализаторов цифровых изображений.[94] Эти методы возродились в 2000-х годах с появлением более совершенных платформ анализа изображений, использующих искусственные нейронные сети.[25][95][96]

Ранние устройства проточной цитометрии испускали лучи света на клетки с определенной длиной волны и измеряли результирующее поглощение, флуоресценцию или светорассеяние, собирая информацию о характеристиках клеток и позволяя клеточному содержимому, например ДНК подлежат количественной оценке.[97] Один из таких инструментов - Rapid Cell Spectrophotometer, разработанный Луи Каментски в 1965 году для автоматизации цитологии шейки матки - мог генерировать диаграммы рассеяния клеток крови с использованием методов цитохимического окрашивания. Леонард Орнштейн, который помогал разработать систему окрашивания на спектрофотометре Rapid Cell Spectrophotometer, и его коллеги позже создали первый коммерческий проточно-цитометрический дифференциальный анализатор лейкоцитов Hemalog D.[98][99] Представлен в 1974 г.[100][101] в этом анализаторе использовалось рассеяние света, поглощение и окрашивание клеток для определения пяти нормальных типов лейкоцитов в дополнение к «крупным неидентифицированным клеткам», классификация, которая обычно состояла из атипичные лимфоциты или бластные клетки. Hemalog D мог подсчитывать 10 000 ячеек за один проход, что является заметным улучшением по сравнению с ручным дифференциалом.[99][102] В 1981 году компания Technicon объединила Hemalog D с анализатором Hemalog-8, чтобы создать Technicon H6000, первый комбинированный анализатор полного анализа крови и дифференциального анализа. Этот анализатор не пользовался популярностью в гематологических лабораториях, потому что он был трудоемким в эксплуатации, но в конце 1980-х - начале 1990-х аналогичные системы широко производились другими производителями, такими как Sysmex, Эбботт, Рош и Бекман Коултер.[103]

Смотрите также

Рекомендации

  1. ^ а б c d е ж Гулати, Джин; Песня, Цзиньминь; Дулау Флореа, Алина; Гонг, Джеральд (2013). «Цель и критерии сканирования мазка крови, исследования мазка крови и анализа мазка крови». Анналы лабораторной медицины. 33 (1): 1–7. Дои:10.3343 / alm.2013.33.1.1. ISSN  2234-3806. ЧВК  3535191. PMID  23301216.
  2. ^ Колледж ветеринарной медицины Корнельского университета. «Лейкограмма». eClinpath. Получено 9 августа 2019.
  3. ^ Лютингер, Ирина (2002). «Максимально эффективное использование лабораторной информационной системы в гематологической лаборатории». Аккредитация и гарантия качества. 7 (11): 494–497. Дои:10.1007 / s00769-002-0539-у. ISSN  0949-1775. S2CID  110787482.
  4. ^ Кеохан, E и другие. (2015). Передняя материя.
  5. ^ «Дифференциальная кровь: данные лабораторных тестов MedlinePlus». MedlinePlus. Архивировано из оригинал 13 августа 2019 г.. Получено 12 августа 2019.
  6. ^ а б Американская ассоциация клинической химии (1 мая 2019 г.). «Дифференциальный WBC». Лабораторные тесты онлайн. В архиве из оригинала 14 апреля 2019 г.. Получено 8 июля 2019.
  7. ^ Коттке-Марчант, К; Дэвис, Б. (2012). п. 33.
  8. ^ а б Turgeon, ML (2016). п. 303.
  9. ^ а б Barnes, P.W .; Mcfadden, S.L .; Machin, S.J .; Симсон, Э. (2005). «Международная консенсусная группа по гематологическому обзору: предлагаемые критерии действий после автоматического дифференциального анализа общего анализа крови и лейкоцитов». Лаборатория гематологии. 11 (2): 83–90. Дои:10.1532 / LH96.05019. ISSN  1080-2924. PMID  16024331.
  10. ^ а б c д'Онофрио, G и другие. (2014). п. 289.
  11. ^ а б c d е Chabot-Richards, Devon S .; Джордж, Трейси I. (2015). «Подсчет лейкоцитов». Клиники лабораторной медицины. 35 (1): 11–24. Дои:10.1016 / j.cll.2014.10.007. ISSN  0272-2712. PMID  25676369.
  12. ^ Бейн, Б и другие. (2012). С. 95–7.
  13. ^ Ciesla, B (2018). п. 153.
  14. ^ а б c d Palmer, L .; Briggs, C .; McFadden, S .; Zini, G .; Burthem, J .; Розенберг, Г .; Пройчева, М .; Мачин, С. Дж. (2015). «Рекомендации ICSH по стандартизации номенклатуры и классификации морфологических характеристик клеток периферической крови». Международный журнал лабораторной гематологии. 37 (3): 287–303. Дои:10.1111 / ijlh.12327. ISSN  1751-5521. PMID  25728865. S2CID  4649418.
  15. ^ Бейн, Б и другие. (2012). С. 2–4.
  16. ^ Смок, KJ. Глава 1 в Greer, JP и другие. изд. (2018), с. «Коллекция образцов».
  17. ^ Кеохан, E и другие. (2015). п. 118.
  18. ^ Warekois, R; Робинсон, Р. (2013). п. 116.
  19. ^ Тургеон, М.Л. (2016). С. 346–8.
  20. ^ Ван, S; Хассерджян, Р. (2018). С. 10–1.
  21. ^ Ван, S; Хассерджян, Р. (2018). п. 10.
  22. ^ Тургеон, М.Л. (2016). п. 329.
  23. ^ Тургеон, МЛ. (2016). п. 318.
  24. ^ Бейн, Б и другие. (2012). С. 44–5.
  25. ^ а б Кратц, Александр; Ли, Су-хи; Зини, Джина; Riedl, Jurgen A .; Гур, Мина; Мачин, Сэм (2019). «Цифровые морфологические анализаторы в гематологии: обзор и рекомендации ICSH». Международный журнал лабораторной гематологии. 41 (4): 437–447. Дои:10.1111 / ijlh.13042. ISSN  1751-5521. PMID  31046197.
  26. ^ Да Коста, Лиди (2015). «Анализ цифровых изображений клеток крови». Клиники лабораторной медицины. 35 (1): 105–122. Дои:10.1016 / j.cll.2014.10.005. ISSN  0272-2712. PMID  25676375.
  27. ^ а б c d Смок, KJ. Глава 1 в Greer, JP и другие. изд. (2018), с. «Подсчет клеток».
  28. ^ Руэмке, К. Л. (1978). «Статистически ожидаемая вариабельность дифференциального подсчета лейкоцитов» (PDF). В Koepke, J. A. (ed.). Дифференциальный подсчет лейкоцитов. Колледж американских патологов Conference / Aspen 1997. Скоки, Иллинойс: Колледж американских патологов.
  29. ^ Макклатчи, К. (2002). п. 809.
  30. ^ Бейн, Б и другие. (2012). С. 30–1.
  31. ^ а б c d е Смок, KJ. Глава 1 в Greer, JP и другие. изд. (2018). сек. «Лейкоцитарные дифференциалы».
  32. ^ Харменнинг, Д. (2009). п. 336.
  33. ^ Ван, S; Хассерджян Р. (2018). п. 9.
  34. ^ а б Харменнинг, Д. (2009). п. 795.
  35. ^ а б c Бейн, Б и другие. (2012). п. 43.
  36. ^ Харменнинг, Д. (2009). С. 795–803.
  37. ^ Наием, Ф и другие. (2009). п. 210.
  38. ^ Arneth, Borros M .; Меньщиковки, Марио (2015). «Технология и новые параметры флуоресцентной проточной цитометрии в гематологических анализаторах». Журнал клинического лабораторного анализа. 29 (3): 175–183. Дои:10.1002 / jcla.21747. ISSN  0887-8013. ЧВК  6807107. PMID  24797912.
  39. ^ Коттке-Марчант, К; Дэвис, Б. (2012). С. 697–8.
  40. ^ а б Vis, JY; Хьюсман, А (2016). «Поверка и контроль качества стандартных гематологических анализаторов». Международный журнал лабораторной гематологии. 38: 100–9. Дои:10.1111 / ijlh.12503. ISSN  1751-5521. PMID  27161194.
  41. ^ а б Смок, KJ. Глава 1 в Greer, JP и другие изд. (2018), с. «Преимущества и источники ошибок автоматизированной гематологии».
  42. ^ Бейн, Б и другие. (2012). С. 43–4.
  43. ^ Буттарелло, Мауро; Плебани, Марио (2008). «Автоматический подсчет клеток крови». Американский журнал клинической патологии. 130 (1): 104–116. Дои:10.1309 / EK3C7CTDKNVPXVTN. ISSN  0002-9173. PMID  18550479.
  44. ^ Гиббс, Б. (2014). п. 88.
  45. ^ Кеохан, E и другие. (2015). п. 226.
  46. ^ Харменнинг, Д. (2009). п. 306.
  47. ^ Бейн, Б и другие. (2012). С. 88–93.
  48. ^ Порвит, А и другие. (2011). п. 252.
  49. ^ а б Тургеон, М.Л. (2016). п. 306.
  50. ^ Порвит, А и другие. (2011). п. 253.
  51. ^ Хоффман, Р. и другие. (2013). п. 644.
  52. ^ Порвит, А и другие. (2011). С. 247–52.
  53. ^ Порвит, А и другие. (2011). п. 8.
  54. ^ Аталлах-Юнес, Сухейл Альберт; Готово, Одри; Ньюбургер, Питер Э. (2019). «Доброкачественная этническая нейтропения». Отзывы о крови. 37: 100586. Дои:10.1016 / j.blre.2019.06.003. ISSN  0268-960X. ЧВК  6702066. PMID  31255364.
  55. ^ Харменнинг, Д. (2009). стр. 308–11
  56. ^ Комитет по гематологии и клинической микроскопии (2019) с. 4.
  57. ^ Ciesla, B (2018). п. 153.
  58. ^ Тургеон, МЛ. (2016). С. 308–9.
  59. ^ Turgeon, ML (2016). п. 309.
  60. ^ а б Порвит, А и другие. (2011). п. 258–9.
  61. ^ Оссье, Дэвид; Остальное, Моника; Матутес, Эстелла; Морилла, Рикардо; Strefford, Jonathan C .; Катовский, Даниил (2016). «Пересмотр морфологии ХЛЛ: клиническое значение пролимфоцитов и корреляция с прогностическими / молекулярными маркерами в исследовании LRF CLL4». Британский журнал гематологии. 174 (5): 767–775. Дои:10.1111 / bjh.14132. ISSN  0007-1048. ЧВК  4995732. PMID  27151266.
  62. ^ Касеб, Хатем; Танеха, Аланкрита; Мастер, Самип (2019). «Рак, хронический лимфоцитарный лейкоз (ХЛЛ)». StatPearls. Получено 24 июля 2019.
  63. ^ Террито, Мэри (2018). «Лимфоцитопения». Руководства Merck Professional Edition. В архиве с оригинала 10 октября 2018 г.. Получено 22 июля 2019.
  64. ^ Бейн, Б и другие. (2012). С. 95–7.
  65. ^ а б Тургеон, М.Л. (2016). п. 307.
  66. ^ Бейн, Б и другие. (2012). п. 95.
  67. ^ Порвит, А и другие. (2011). п. 258.
  68. ^ Бейн, Б и другие. (2012). п. 94.
  69. ^ а б Порвит, А и другие. (2011). п. 256.
  70. ^ а б Бейн, Б и другие. (2012). С. 94–5.
  71. ^ Порвит, А и другие. (2011). п. 257.
  72. ^ а б Бейн, Б и другие. (2012). п. 93.
  73. ^ Чесла, Б. (2018). С. 153–4.
  74. ^ Бейн, Б и другие. (2012). п. 44.
  75. ^ а б Карри, Чоладда Веджабхути; Старос, Эрик (14 января 2015 г.). «Дифференциальный анализ крови». EMedicine. Архивировано из оригинал 12 июля 2019 г.. Получено 17 июля 2019.
  76. ^ Эмади, Ашкан; Закон, Дженни (2018). «Хронический миелоидный лейкоз (ХМЛ)». Руководства Merck Professional Edition. В архиве с оригинала 18 августа 2019 г.. Получено 30 августа 2019.
  77. ^ Адамс, Джулия; Насири, Мехди (2015). «Острый промиелоцитарный лейкоз: обзор и обсуждение вариантов транслокаций». Архив патологии и лабораторной медицины. 139 (10): 1308–1313. Дои:10.5858 / arpa.2013-0345-RS. ISSN  0003-9985. PMID  26414475.
  78. ^ Гласси, Э. (1998). С. 6–7.
  79. ^ Комитет по гематологии и клинической микроскопии (2019). С. 13–22.
  80. ^ Гласси, Э. (1998). п. 228.
  81. ^ Гласси, Э. (1998). п. 328.
  82. ^ Перейра, я и другие. (2011). п. 185.
  83. ^ Кеохан, E и другие. (2015). С. 1–4.
  84. ^ Коттке-Марчант, К; Дэвис, Б. (2012). п. 1.
  85. ^ Винтроб, ММ. (1985). п. 10.
  86. ^ Коттке-Марчант, К; Дэвис, Б. (2012). С. 3–4.
  87. ^ Безруков, А.В. (2017). «Окраска по Романовскому, эффект Романовского и размышления о научном приоритете». Биотехника и гистохимия. 92 (1): 29–35. Дои:10.1080/10520295.2016.1250285. ISSN  1052-0295. PMID  28098484. S2CID  37401579.
  88. ^ Харменнинг, Д. (2009). п. 794.
  89. ^ а б Грэм, М. (2003). «Принцип Коултера: основа отрасли». Журнал ассоциации лабораторной автоматизации. 8 (6): 72–81. Дои:10.1016 / S1535-5535 (03) 00023-6. ISSN  1535-5535.
  90. ^ Гронер, W (1995). С. 12–4.
  91. ^ Льюис, С.М. (1981). «Автоматический дифференциальный подсчет лейкоцитов: современное состояние и будущие тенденции». Blut. 43 (1): 1–6. Дои:10.1007 / BF00319925. ISSN  0006-5242. PMID  7260399. S2CID  31055044.
  92. ^ Да Коста, Л. (2015). п. 5.
  93. ^ Гронер, W (1995). С. 12–5.
  94. ^ Бентли, С.А. (1990). «Автоматический дифференциальный подсчет лейкоцитов: критическая оценка». Клиническая гематология Байера. 3 (4): 851–69. Дои:10.1016 / S0950-3536 (05) 80138-6. ISSN  0950-3536. PMID  2271793.
  95. ^ Да Коста, Л. (2015). «Анализ цифровых изображений клеток крови». Клиники лабораторной медицины. 35 (1): 105–22. Дои:10.1016 / j.cll.2014.10.005. ISSN  0272-2712. PMID  25676375.
  96. ^ Макканн, SR (2016). п. 193.
  97. ^ Меламед, М. (2001). С. 5–6.
  98. ^ Шапиро, HM (2003). С. 84–5.
  99. ^ а б Меламед М. (2001). п. 8.
  100. ^ Пико, Жюльен; Guerin, Coralie L .; Ле Ван Ким, Кэролайн; Буланже, Шанталь М. (2012). «Проточная цитометрия: ретроспектива, основы и новейшее оборудование». Цитотехнология. 64 (2): 109–130. Дои:10.1007 / s10616-011-9415-0. ISSN  0920-9069. ЧВК  3279584. PMID  22271369.
  101. ^ Mansberg, H.P .; Сондерс, Алекс М .; Гронер, В. (1974). «Дифференциальная система белых клеток Hemalog D». Журнал гистохимии и цитохимии. 22 (7): 711–724. Дои:10.1177/22.7.711. ISSN  0022-1554. PMID  4137312.
  102. ^ Пьер, Роберт V (2002). «Обзор мазка периферической крови: исчезновение лейкоцитарного дифференциала в количестве глаз». Клиники лабораторной медицины. 22 (1): 279–297. Дои:10.1016 / S0272-2712 (03) 00075-1. ISSN  0272-2712. PMID  11933579.
  103. ^ Коттке-Марчант, К; Дэвис, Б. (2012). С. 8–9.

Библиография